陈龙
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多黏菌素B刺激下伤寒沙门菌mig-14基因的表达特性被引量：2
- 2017年
- 目的:研究多黏菌素B(polymyxin,PB)刺激下,伤寒沙门菌mig-14基因的表达是否受调节因子Fis、OmpR、IHF、HilD激活。方法:用自杀质粒法分别制备hilD及IHF的α亚基编码基因(himA)和β亚基编码基因(himD)的缺陷株;然后通过实时定量PCR和lacZ融合实验比较PB刺激下mig-14在伤寒沙门菌各缺陷株(himA、himD、hilD、fis、ompR)与野生株中的转录水平差异,筛选出作用于mig-14的调控因子。结果:成功制备伤寒沙门菌himA、himD及hilD缺陷株;在多黏菌素B刺激下,实时定量PCR结果显示fis、ompR、himA、himD及hilD缺陷株中mig-14 mRNA水平明显低于野生株;lac Z融合实验中,fis、ompR、himA、himD及hilD缺陷株Miller Units值明显低于野生株。结论:在多黏菌素B刺激下,调节因子Fis、OmpR、IHF、HilD可激活伤寒沙门菌mig-14表达。
- 陈龙杨璐璐李敏殷灵莉徐顺高黄新祥生秀梅
- 关键词：伤寒沙门菌多黏菌素B基因调控
- glipr1基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2016年
- 目的克隆表达胶质瘤致病相关蛋白1基因(glipr1)并制备多克隆抗体,运用该抗体检测各肿瘤细胞系中GLIPR1的表达。方法通过PCR技术以含glipr1基因的c DNA克隆质粒(p LX304-glipr1)为模板获得glipr1(M)片段,再将此片段克隆至表达载体p ET-15b上,并转入大肠杆菌BL21-Codon Plus(DE3)进行表达;Ni柱纯化后的GLIPR1(M)蛋白作为抗原免疫家兔,获得多克隆抗体,Western blot法检测其特异性,并检测GLIPR1在A549、PC14、LNCa P、PC3及U87细胞中的表达。结果成功构建了表达载体p ET-15bglipr1(M),并获得了纯化的GLIPR1(M)蛋白,成功制备了兔抗GLIPR1多克隆抗体,特异性高,可用于检测各细胞系中GLIPR1的表达,GLIPR1在U87中的表达最高。结论成功表达了GLIPR1(M)蛋白,并获得了多克隆抗体,为进一步研究GLIPR1的功能和作用机制奠定了基础。
- 生秀梅陈龙王正新
- 关键词：蛋白表达多克隆抗体
- 伤寒沙门菌外膜孔道蛋白ompC、ompF缺陷株的制备及其耐药性被引量：3
- 2015年
- 目的:制备伤寒沙门菌omp C缺陷株及omp C-omp F双缺陷株,研究外膜孔道蛋白Omp C、Omp F在伤寒沙门菌耐药中的作用。方法:经自杀质粒介导的同源重组方法制备omp C缺陷株及omp C-omp F双缺陷株,比较伤寒沙门菌omp C缺陷株、omp F缺陷株及omp C-omp F双缺陷株与野生株在多黏菌素B、卡那霉素以及氨苄青霉素处理下的生存能力。结果:成功制备伤寒沙门菌omp C单缺陷以及omp C-omp F双缺陷株。各菌株在普通培养条件下生长情况无差异;多黏菌素B及氨青苄霉素处理条件下omp C缺陷株、omp C-omp F双缺陷株生存能力明显强于野生株,而omp F缺陷株生存能力则低于野生株;卡那霉素处理条件下,各缺陷株生存能力均明显低于野生株。结论:外膜孔道蛋白Omp C、Omp F参与伤寒沙门菌耐药,但对不同药物的耐药机制不尽相同,具体机制有待进一步研究。
- 汪伟伟夏歆王静瑜张桂红陈龙黄新祥生秀梅
- 关键词：伤寒沙门菌OMPCOMPF抗生素耐药性
