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闫晓飞

作品数：8 被引量：16H指数：3
供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省海外学人科研资助项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇学位论文
  • 1篇会议论文

领域

  • 7篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇细胞
  • 4篇胚胎
  • 3篇细胞骨架
  • 2篇蛋白
  • 2篇遗传学
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光蛋白
  • 2篇受精
  • 2篇鼠胚
  • 2篇鼠胚胎
  • 2篇体外
  • 2篇体外受精
  • 2篇重编程
  • 2篇转基因
  • 2篇小鼠胚胎
  • 2篇绿色荧光
  • 2篇绿色荧光蛋白
  • 2篇克隆胚
  • 2篇克隆胚胎
  • 2篇基因

机构

  • 8篇哈尔滨医科大...
  • 1篇嘉兴学院

作者

  • 8篇闫晓飞
  • 7篇雷蕾
  • 4篇金连弘
  • 4篇陈雅隽
  • 3篇徐燕宁
  • 3篇郭铁云
  • 3篇张喜梅
  • 3篇钟淑琦
  • 3篇张宝东
  • 2篇冯秀清
  • 2篇池美花
  • 2篇关娜
  • 2篇董建将
  • 1篇张庆华
  • 1篇单智焱
  • 1篇徐营
  • 1篇王宁
  • 1篇李洪武

传媒

  • 3篇解剖科学进展
  • 1篇解剖学报
  • 1篇生理学报
  • 1篇细胞生物学杂...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2010
  • 1篇2009
  • 3篇2008
  • 1篇2007
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
不同类型的转基因供体细胞对生产小鼠转基因克隆胚胎的影响
目的：本实验旨在利用体细胞核移植技术生产小鼠的转基因克隆胚胎。 方法：构建了含新霉素抗性基因(Neo)和绿色荧光蛋白基因(EGFP)的双标记选择载体,通过电穿孔的方法,分别转染了小鼠胎儿成纤维细胞和小鼠胚胎干细...
闫晓飞
关键词：转基因克隆胚胎绿色荧光蛋白胚胎干细胞
F9细胞的培养和全细胞抽提物获取方法的比较
2010年
目的对F9小鼠畸胎瘤细胞进行培养,探索理想的获取全细胞抽提物的方法。方法应用蛋白质抽提试剂盒、反复冻融循环和超声波裂解法进行F9全细胞抽提物的获取。结果通过蛋白质抽提试剂盒和反复细胞冻融循环的方法所获取的细胞抽提物渗透压和浓度偏低,而选用超声波裂解法所获取的细胞抽提物,无论从pH,渗透压,还是蛋白浓度方面分析均与理想值接近。结论选择超声波裂解法作为获取F9小鼠畸胎瘤全细胞抽提物的理想方法 。
张喜梅郭铁云王宁闫晓飞徐燕宁雷蕾金连弘张宝东池美花
关键词：畸胎瘤抽提物小鼠
体外受精和孤雌活化过程中小鼠胚胎细胞骨架的动态变化
目的：本实验以 ICR 小鼠为研究对象,研究体外受精(IVF)和孤雌活化早期胚胎发育过程中,微管蛋白在第一次卵裂时的动态变化和作用。方法：本实验首先比较了体外受精胚胎、氯化锶激活的孤雌胚胎和体内受精的原核期胚胎在体外发育...
冯秀清陈雅隽钟淑琦闫晓飞董建将雷蕾
文献传递
应用激光扫描共聚焦显微镜研究卵母细胞和早期胚胎的细胞骨架被引量：5
2008年
介绍了应用激光扫描共聚焦显微镜,结合免疫荧光技术研究卵母细胞和早期胚胎细胞骨架的方法。观察了β-微管蛋白、γ-微管蛋白、微丝以及染色体在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的分布和形态,讨论了实验过程中的注意事项以及实验结果的分析和处理方法。
徐营张庆华关娜徐燕宁闫晓飞雷蕾
关键词：激光扫描共聚焦显微镜细胞骨架卵母细胞早期胚胎
体外受精和孤雌活化过程中小鼠胚胎细胞骨架的动态变化被引量：3
2008年
为研究微管在体外受精与孤雌活化过程中的动态变化，本实验比较了体外受精胚胎、SrCl2激活的孤雌胚胎和体内受精的原核期胚胎在体外发育的情况，采用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术检测卵母细胞孤雌活化过程中及体外受精后微管及核的动态变化，以分析微管在减数分裂过程中的作用及其对早期发育的影响。结果显示，体内受精胚胎的发育率显著高于体外受精和孤雌激活胚胎体外发育率（P〈0．05），而体外受精与孤雌激活胚胎在各阶段发育率差异均不显著。在体外受精中，精子入卵，激活卵母细胞，减数分裂恢复，纺锤丝牵拉赤道板上致密排列的母源染色体向纺锤体两侧迁移：后期将染色体拉向两极；末期时，微管分布于两组已去凝集的母源染色体之间，卵母细胞排出第二极体（the second polarbody，Pb2），解聚的母源染色体形成雌原核。同时，在受精后5—8h精子染色质发生去浓缩与再浓缩，形成雄原核。在原核形成的同时，胞质星体在雌、雄原核的周围重组形成长的微管，负责雌、雄原核的迁移靠近。孤雌活化过程中，卵母细胞恢复减数分裂，姐妹染色单体分离，被拉向两极，经细胞松弛素B处理后，活化4—6h，卵周隙中未见Pb2，而在胞质中出现两个混合的单倍体原核，之间由微管相连接，负责两个单倍体原核的迁移靠近。与体外受精相比较，孤雌活化时卵母细胞更容易被激活，减数分裂期间微管的发育早且更完善。
冯秀清林英巍陈雅隽钟淑琦闫晓飞董建将雷蕾
关键词：体外受精孤雌活化激光共聚焦
不同类型的转基因细胞核供体对生产小鼠转基因克隆胚胎的影响被引量：1
2009年
目的利用体细胞核移植（SCNT）技术生产小鼠转基因克隆胚胎。方法利用所构建的含新霉素抗性（Neor）基因和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的双标记选择载体,通过电穿孔的方法,分别转染小鼠胎儿成纤维细胞和小鼠胚胎干细胞,经G418筛选14d后用于核移植。同时以未转基因小鼠卵丘细胞和成纤维细胞为核供体,进行体细胞核移植。结果转基因与未转基因胎鼠成纤维细胞的重构胚的囊胚（154/160）发育率为19.23%和22.91%,差异不显著（P〉0.05）;转基因胚胎干细胞与胎鼠成纤维细胞的重构胚的囊胚（152/154）发育率为41.54%和19.23%,差异显著（P〈0.05）;未转基因卵丘细胞与成纤维细胞的重构胚的囊胚（171/160）发育率为41.17%和22.91%,差异显著（P〈0.05）。结论利用体细胞核移植技术,小鼠胎儿成纤维细胞和胚胎干细胞可以有效地生产小鼠转基因囊胚。
闫晓飞徐燕宁李洪武关娜单智焱钟淑琦金连弘雷蕾
关键词：核移植电穿孔绿色荧光蛋白
BHA和β-ME对表观修饰后的NIH/3T3细胞向神经方向诱导的实验研究被引量：1
2012年
目的通过联合应用表观修饰药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)和曲古抑菌素A(TrichstatinA,TSA)对NIH/3T3细胞进行重编程,应用β-羟基酸(betahydroxyacid,BHA)和β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,β-ME)进一步诱导,以期表达与神经细胞密切相关的基因。方法应用流式细胞技术检测实验组(4.5μM5-aza-dC+0.35μMTSA+1mMβ-ME+200μMBHA作用后的NIH/3T3细胞)和对照组中NIH/3T3细胞的DNA甲基化水平。应用RT-PCR的方法检测Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的表达,免疫细胞化学染色检测巢蛋白(nestin)和神经丝轻链(neurofilamentlightchain,NF-L)的表达情况。结果实验组NIH/3T3细胞DNA甲基化水平较对照组明显降低,细胞均呈现出Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4基因的阳性表达。经过BHA和β-ME诱导后,NIH/3T3细胞呈巢蛋白和神经丝轻链阳性。结论表观修饰后的细胞经诱导后可以呈现nestin和NF-L的阳性表达。
张喜梅张宝东郭铁云闫晓飞陈雅隽雷蕾金连弘
关键词：重编程表观遗传学
5-aza-dC和TSA对NIH/3T3细胞多能性基因表达作用的实验研究被引量：6
2010年
目的本实验通过联合应用甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)和去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(Trichstatin A,TSA)对NIH/3T3胎鼠成纤维细胞进行DNA去甲基化重编程,以期使其表达与多向分化潜能性密切相关的基因。方法药物处理组与正常对照组NIH/3T3细胞的形态学观察。流式细胞技术检测药物处理前后NIH/3T3细胞的DNA甲基化水平。应用RT-PCR的方法检测多能性基因Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的表达情况。结果经过药物处理后的NIH/3T3细胞与对照组的细胞比较,从细胞形态来观察,没有明显的区别,均呈现成纤维细胞的外观。药物处理组的DNA甲基化水平较对照组明显降低。药物处理后细胞均呈现出Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4基因的阳性表达。结论 5-aza-dC和TSA对NIH/3T3细胞进行表观重编程,可以使重编程后的体细胞中呈现与多向分化潜能基因的阳性表达。
张喜梅郭铁云闫晓飞陈雅隽雷蕾金连弘池美花张宝东
关键词：5-AZA-DCTSA重编程表观遗传学胎鼠
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