郑锡澄
- 作品数:13 被引量:22H指数:3
- 供职机构:广州市医药工业研究所更多>>
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- 简化HBV-DNA抽提用于多聚酶链式基因扩增被引量:1
- 1993年
- 采用异硫氰酸胍、柠檬酸钠、2-巯基乙醇、十二烷基肌氨酸钠作为变性裂解剂,结合水饱和酚、氯仿、异戍醇等进行快速程序式抽提血清HBV-DNA模板用于多聚酶链式(PCR)基因扩增。该提取法比一般方法简单、稳定、不易污染,抽提过程可在lh内完成。PCR应用结果表明敏感性高于地高辛素标记探针斑点杂交法。经酶切及a-^(32)标记放射自显影鉴定PCR产物具有良好的特异性。
- 高志良姚集鲁吕凌黄仰苏郑锡澄
- 关键词:多聚酶基因扩增血清HBV-DNA斑点杂交法抽提肌氨酸钠
- 建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术被引量:3
- 1992年
- 建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果。这一技术用以检测经常规DNA提取的127例HBsAg阳性血清,结果HBV DNA检出率达88%,其中HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为97%,抗HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为82%。
- 吕凌黄仰甦姚集鲁郑锡澄彭文伟
- 关键词:聚合酶链反应乙型肝炎病毒DNA
- 乙型肝炎表面抗原酶联免疫诊断试剂盒
- 孙虹黄就力芦小秀姚集鲁郑锡澄
- 酶联免疫吸附检测是七十年代发展起来的一种免疫诊断技术,国外已应用于临床。广州医药工业研究所于1985年开始与中山医科大学附属三院共同合作,利用单克 隆抗体酶标技术开展乙型肝炎表面抗原酶联免疫诊断试剂盒的研制。它是利用酶联...
- 关键词:
- 关键词:诊断试剂盒酶联免疫吸附法免疫诊断乙型肝炎诊断
- 两孔一步法同时检测HBsAg与抗-HBs的ELISA技术
- 1989年
- 以一步夹心法检测HBsAg的ELISA技术为基础,结合中和试验原理,提出了两孔一步法同时检测HBsAg与抗-HBs的ELISA技术。对已知RIA法为HBsAg阳性血清108份、抗-HBs阳性且S/N>10的血清395份、HBsAg与抗-HBs均阴性的血清167份,用本法检测,结果符合RIA法的分别为106份(符合率98.14%),385份(97.46%)和158份(94.61%),对乙肝疫苗免疫前的各类健康人血清424份及经乙肝疫苗三针免疫后1—2个月的血清359份,用本法及RIA法平行测试HBsAg与抗-HBs,结果两法总的符合率分别为89.39%(379份)87.30%(282份)。
- 陆玮伦姚集鲁郑锡澄
- 关键词:单克隆抗体
- 生物素标记HBV-DNA探针的临床应用
- 1989年
- 本文报告用自制的生物素HBV-DNA探针进行斑点杂交检测HBV感染患者血清中的HBV-DNA,并与同位素探针相比较。用生物素探针测定HBV-DNA之阳性率在HBsAg和HBeAg同时阳性者中为84.2%,HBsAg和抗-HBe同时阳性者中为23.5%,单纯HBsAg阳性者中为18.6%结果表明生物素HBV-DNA探针其特异性、敏感性和重复性与同位素探针相似,且生物素探针有效时间长,稳定性好。
- 陈青谢彦博郑锡澄彭文伟
- 关键词:生物素探针HBV-DNA
- 地高辛素标记乙型肝炎病毒DNA探针的制备及应用被引量:1
- 1991年
- 采用随机引物法以地高辛素标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dig-II-dUTP)标记克隆的乙型肝炎病毒(HBV)DNA adw/pAM6,制得高特异性和高敏感性的HBV DNA探针。用于斑点杂交检测HBV DNA,最大敏感度为0.lpg。用于检测HBsAg阳性血清,HBV DNA阳性率为82.7%(91/110),与市售同类药盒相比,阴阳结果一致,与缺口翻译的生物索探针相比,检出率有显著提高(P<0.01)。用于肝癌组织与血清HBV DNA研究,与既往用~32P探针所得结果相符。该探针操作简单、使用方便、出结果快速、价格便宜又无需特殊设备,故适于在临床单位尤其是基层医疗单位应用推广。
- 吕凌彭文伟姚集鲁郑锡澄徐林
- 关键词:乙肝病毒DNA探针
- 单克鹰抗体ELISA一孔一期培育法检测HBeAg与抗-HBe
- 1988年
- 本文介绍一种使用单克隆抗-HBeα与单克隆抗-HBeβ作为试剂,以一孔一期培育法同时鉴定待检血清中的HBeAg或抗-HBe的ELISA新技术.82例HBV标志物均阴性的正常人血清,无一例检出HBeAg或抗-HBe.1,481例HBsAg阳性血清中的1,260例(85.1%),能被本法确定为HBeAg或抗-HBe阳性.110份HBsAg阳性血清同时使用本法以及RIA法,由不同操作者检测.109例两者取得完全一致的结果,仅l例用RIA法属抗-HBe阳性,本法阴性.本法是一种简便、节约、灵敏、特异的方法,效果满意.
- 姚集鲁郭万里郑锡澄
- HBV—DNA不同模板制备进行多聚酶链基因扩增被引量:1
- 1994年
- 本文采用 4.2mol/L异硫氰酸胍、25mmol/L柠檬酸钠、0.1mol/L2一巯基乙醇,0.5%(W/V)十二烷基肌氨酸钠作为裂解液进行一步法程序式抽提血清标本HBV—DNA模板用于多聚酶链基因扩增.该法与常规DSD抽提法及微量直接法进行比较,具有方法简单、稳定、不易污染且敏感性高.抽提过程可在1个小时内完成,经酶切及a^(32)P标记探针放射自显影鉴定PCR产物具良好特异性,该法尤其适应于大量临床标本的检测,值得推广使用.
- 高志良姚集鲁吕凌黄仰苏郑锡澄
- 关键词:乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸多聚酶链反应
- 病毒性肝炎患者血清透明质酸含量测定及其临床价值被引量:1
- 1993年
- 184例严重度不一的病毒性肝炎患者血清透明质酸检测结果表明,肝实质受损时间越长,肝功能损害越甚,血清透明质酸含量也见逐步增高,以152.6纳克/毫升((?)±2s)为界鉴别临床诊断为慢性迁延性肝炎和慢性活动性肝炎准确率为90.5%,敏感性为85%,特异性为97.8%,阳性预测率98.1%,阴性预测率为83.0%。血清透明质酸测定对病毒性肝炎的鉴别诊断和判定肝损害的严重程度,具有较大的临床参考价值。
- 陈青郑锡澄姚集鲁
- 关键词:病毒性肝炎透明质酸放射免疫测定
- 诊断用乙型肝炎表面抗原(HBsAg)酶标(ELISA)试剂盒
- 孙虹黄就力姚集鲁郑锡澄
- 应用ELISA技术检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是一种简易,敏感,特异性高的免疫诊断方法。该试剂盒应用高灵敏度的单克隆试剂,解决如下三大技术关键:高灵敏度单克隆抗-HBS;改良的高碘酸钠法将高纯度的辣根过氧化物酶标记...
- 关键词:
- 关键词:乙型肝炎诊断免疫诊断方法酶标试剂盒