贺婉红
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:华东理工大学更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 绿豆总RNA的分离及环氧水解酶基因的克隆被引量:3
- 2011年
- 目的研究分离绿豆总RNA的方法,并从中克隆环氧水解酶基因。方法采用UNIQ-10柱式法、Trizol法和改良Trizol法等3种方法分离绿豆种子、胚芽和豆芽总RNA,鉴定RNA的产率、纯度及完整性,根据环氧水解酶的保守序列扩增绿豆环氧水解酶基因。结果 UNIQ-10柱式法分离的RNA降解,Trizol法获得的RNA有杂质污染,改良Trizol法得到的RNA产率、纯度及完整性最好;RT-PCR后仅从绿豆胚芽中成功扩增到环氧水解酶基因保守序列。结论改良Trizol法简便易行,能有效地去除多糖、多酚等次生物质的干扰,最适于绿豆胚芽总RNA的分离。
- 贺婉红华叶范立强
- 关键词:绿豆RNA分离环氧水解酶克隆
- 土豆环氧化物水解酶基因的克隆、表达及其活性包涵体分析
- 2012年
- 目的克隆、表达土豆环氧化物水解酶基因,分析其活性包涵体。方法提取土豆总RNA,以反转录获得的cDNA为模板进行聚合酶链式反应(PCR),扩增得到土豆环氧化物水解酶基因,构建大肠杆菌表达质粒pET-P.EH,将重组表达质粒pET–P.EH转化E.coli BL21(DE3)。结果 SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导表达的重组土豆环氧化物水解酶在各种温度下均主要以包涵体形式表达,只在15℃有微量可溶表达。酶活性分析表明,28℃表达的重组酶包涵体酶活性性为0.7 U/mg。结论初步证实了存在活性包涵体的观点。
- 李小灵贺婉红范立强程安阳王刚潘忠孝朱庆庆孟军
- 关键词:大肠杆菌
- 绿豆环氧水解酶基因克隆、表达及酶学性质表征
- 环氧水解酶/(Epoxide hydrolase, EH/)能催化合成光学纯环氧化合物和邻位二醇,在医药、绿色精细化工等领域具有重要应用前景。近年新发现的绿豆EH /(mbEH/)能对映归一性水解消旋环氧化物产生单一构型...
- 贺婉红
- 关键词:环氧水解酶克隆
- 文献传递
- 一种环氧水解酶基因、编码蛋白及其应用
- 本发明公开了从绿豆中获得的一种环氧水解酶(VREH1)的编码序列,在GenBank中同源搜索,未发现同源序列,为一新基因,并且首次衍生获得VREH1相应的氨基酸序列,分析了其主要功能区。本发明还公开了所述编码环氧水解酶的...
- 范立强贺婉红赵健许建和
- 文献传递