蒋菊香 作品数:34 被引量:96 H指数:7 供职机构: 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学系 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
膜型基质金属蛋白酶-1在不同内皮细胞株中的表达差异 2007年 为研究膜型基质金属蛋白酶-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)在血管生物学中的作用机制,比较了3株常用的内皮细胞株:人微血管内皮细胞株HMEC-1、人脐静脉内皮细胞株ECV304和EAhy926中MT1-MMP及与其功能相关的MMP-2,TIMP-2的表达差异.实时PCR和流式细胞术检测HMEC-1、EAhy926和ECV304中MT1-MMP/MMP-2/TIMP-2的表达,明胶酶谱法分析各细胞株上清中MMP-2的酶活.实时PCR结果显示,3株细胞均表达MT1-MMP与TIMP-2,MT1-MMP在EAhy926中表达最高,TIMP-2在ECV304中表达最高,而仅在EAhy926中检测到MMP-2的表达.流式细胞术和酶谱的结果与PCR结果基本一致.MT1-MMP和MMP-2在典型的大血管内皮细胞株EAhy926中高表达可能与该细胞独特的来源、表型特点和功能有关. 蒋菊香 马珍妮 胡晓慧 董宁征 吴士良 阮长耿关键词:MT1-MMP 内皮细胞株 人基质金属蛋白酶-2纤维连接蛋白样片段的原核表达及单抗制备 被引量:1 2005年 目的在体外原核表达基质金属蛋白酶-2(MMP-2)纤维连接蛋白样片段,制备抗MMP-2特异性的单克隆抗体。方法体外掊养EAhy926内皮细胞,收集细胞后抽提总RNA,利用所合成引物经RT-PCR获得纤维连接蛋白样片段cDNA,与PET20b(+)表达载体重组后转化大肠杆菌BL21(DE3)plus,挑选阳性克隆后,经IPTG诱导表达蛋白。蛋白经次氮基三乙酸镍琼脂糖(Ni—NTAagarose)柱纯化浓缩后免疫Balb/c小鼠,尾静脉加强后取脾细胞融合,ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水。结果原核表达MMP-2纤维连接蛋白样片段大小为21kd,表达量占菌体总蛋白25%,经Ni-NTAagarose柱纯化后,获得了部分纯化的蛋白。小鼠脾细胞与杂交瘤细胞融合后筛选获得1株单克隆抗体。结论抗MMP-2特异性抗体的获得为MMP-2测定提供了一个有效工具,为进一步研究MMP-2的功能及探讨MMP-2在实体瘤及血液肿瘤发病过程中的作用奠定了基础。 胡晓慧 蒋菊香 董宁征 沈飞 阮长耿关键词:MMP-2 原核表达 单克隆抗体 人伴侣蛋白CCT的β亚基全长cDNA克隆、表达及染色体定位的研究 被引量:1 2000年 伴侣蛋白能促进其他底物蛋白形成正确折叠结构,而本身并不成为底物蛋白的组分.在真核细胞质中的伴侣蛋白CCT主要是参与协助细胞骨架蛋白的构成,为细胞生长所必需.通常哺乳动物的CCT是由7-9种不同亚基所组成的蛋白复合体.从人的睾丸组织cDNA文库中分离出一条新的全长 cDNA,在其 1935bp序列中含有一个长 1605bp的可读框,它编码了 535个氨基酸.基于从该cDNA推导的蛋白质与啤酒酵母。裂殖酵母、线虫、小鼠等的CCTβ亚基存在较高的同源度,尤其是与小鼠的CCTβ同源度高达97%,由这个新基因所编码的推导蛋白可能就是人的CCTβ亚基. Northern杂交结果显示,人CCTβ基因的转录本长约 2.0 kb,它在多种组织中均有表达,但在睾丸组织中呈超量表达,约为其他组织表达量的3-24倍.利用辐射杂种细胞克隆板定位技术,CCTβ基因被定位于人染色体12q14区带.此外,通过同源检索,发现这个cDNA序列的5’侧与人的一个BAC基因组序列(U91327)的3’侧呈间隙的区段性同源,经对比分析,还对CCTβ基因5’端的基因组结构进行了详细描述. 蒋菊香 林伟 余龙 张宏来 屠强 赵寿元 陈政 蒋滢关键词:CDNA克隆 染色体定位 Β亚基 花粉对Raji肿瘤细胞株的抑制作用研究 被引量:2 1999年 花粉是一种完全营养食品。研究花粉对Raji肿瘤细胞株的抑制作用,结果:(1)破壁花粉中游离氨基酸组成基本与1640培养基相似; 蒋滢 冯树一 黄美英 蒋菊香关键词:花粉 细胞株 衰老大鼠的某些脑区多胺水平分析 2002年 着重探讨某些脑区非胍基多胺 (腐胺 ,精脒 ,精胺等 )与衰老关系 ,结果表明人工致衰老组和自然衰老组大鼠的纹状体、下丘脑。 王尉平 蒋菊香 蒋滢 徐颖关键词:衰老 大黄多糖分离纯化及其功能的研究(Ⅰ) 被引量:9 2002年 大黄多糖的分离纯化 ,通过甲醇回流 ,除去大黄中致泻的蒽醌类物质 ,按Sevag s方法去除蛋白质 ,获得大黄多糖粗制品 ,再分别经SephadexG 5 0和G 10 0柱分别纯化 ,结果获得单一组分多糖纯品 ;建立四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型 ;大黄多糖有明显 (P <0 .0 1)降低血糖及提高血清胰岛素水平的功能。 蒋滢 马建民 徐颖 蒋菊香 戴英关键词:大黄多糖 纯化 四氧嘧啶 血糖 胰岛素 膜型基质金属蛋白酶-1的结构、功能与调节 被引量:8 2005年 膜型基质金属蛋白酶(membrane-type matrix metalloproteinase,MT-MMP)是一类基质金属蛋白酶家族的新成员,MT1-MMP是第一个鉴别出的膜型基质金属蛋白酶,它直接或间接降解细胞外基质中的多种成分,并对黏附分子有调节作用,被认为是MMP家族中与肿瘤侵袭关系最密切的酶,具有独特的结构、功能与调节机制。 蒋菊香 阮长耿 吴士良关键词:MT1-MMP 肿瘤侵袭 花粉延缓脑衰老的实验研究 被引量:8 2002年 目的 通过研究花粉对脑衰老模型大鼠海马区超氧化物歧化酶 (SOD)、氨基酸神经递质 (AANT)和NO水平的影响 ,探讨花粉延缓脑衰老的机制。方法 采用D -半乳糖建立大鼠衰老模型 ,用生化方法检测对照组、衰老模型组和衰老模型花粉组大鼠海马区SOD活性、AANT和NO水平 ,并作统计分析。结果 花粉能明显提高脑衰老模型大鼠海马区SOD活性 ,降低NO水平 ,并增加兴奋性氨基酸谷氨酸 (Glu)和天门冬氨酸 (Asp)的含量 ,降低抑制性氨基酸γ -氨基丁酸 (GABA)的含量。结论 花粉通过清除自由基 ,减少NO释放 ,升高兴奋性氨基酸 。 蒋菊香 王尉平 蒋滢关键词:花粉 脑衰老 抗衰老 人类GABARAPL1基因的染色体定位 被引量:2 2001年 目的 确定人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 1基因在染色体上的位置。方法 根据该基因cDNA的 3′非翻译区序列设计一对RH定位引物 ,以人 /鼠体细胞辐射杂种板Genebridge 4(GB4) panel试剂盒中的杂种细胞株基因组DNA为模板 ,进行PCR扩增 ,经琼脂糖凝胶电泳检测后 ,按Sanger网站的RH定位分析系统进行统计学分析。结果 PCR法在一些杂种细胞株中扩增出特异的目的片段 ,经测序验证了该序列的准确性。通过Sanger网站统计分析表明 ,该基因与 12号染色体上的AFM 0 2 6tb5 (D12S77) ,AFM32 0xb5 (D12S35 8) ,AFM 2 0 5xg3(D12S310 ) ,AFM2 17xa7(D12S99) ,AFM 2 34wb6 (D12S16 6 4)位标紧密连锁 ,且LOD值均大于 3。经该染色体区带的物理图、遗传图及细胞图谱整合分析 ,将该基因定位在染色体 12 p12 .3区带的D12S77和D12S35 8位标之间。 结论 放射杂交定位法是一种新颖便捷的基因定位方法 ,通过此法成功地进行了人类GABAA 受体相关蛋白相似蛋白 1基因的染色体定位。 陈政 辛玉蓉 蒋滢 王尉平 蒋菊香关键词:PCR 右侧结肠癌伴Sister Mary Joseph’s结节及腹股沟淋巴结转移——一例报告及文献综述(英文) 被引量:2 2010年 Sister Mary Joseph’s结节(Sister Mary Joseph’s nodule,SMJN)是指腹腔内恶性肿瘤导致的脐部转移性结节,1949年由Hamilton Bailey命名以纪念St.Mary’s Hospital的护士Sister Joseph。SMJN并不多见,但个案报道屡屡见诸文献。这种脐部转移可以与腹腔内肿瘤同时出现或异时出现,是预后极差的表现。SMJN最常见原发肿瘤为胃癌及卵巢癌,结肠癌特别是右侧结肠癌引起的SMJN极其罕见。另外右侧结肠癌转移至腹股沟淋巴结未见文献报道。本文报道一例右侧结肠癌同时伴有SMJN及腹股沟淋巴结转移,并对相关文献进行综述。 吴永友 邢春根 蒋菊香 吕孝东 冯一中 吴浩荣关键词:结肠癌 SISTER MARY 腹股沟淋巴结