莫永炎
- 作品数：28 被引量：184H指数：7
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 云芝多糖对巨噬细胞氧化LDL的抑制作用与iNOS基因表达被引量：19
- 1999年
- 目的和方法为揭示云艺多糖（PSK）的抗动脉粥样硬化机理，用RT-PCR和Westernblot等方法研究了PSK对巨噬细胞氧化低密度脂蛋白（LDL）的影响。结果PSK处理小鼠的巨噬细胞对LDL的氧化作用明显降低，NO分泌明显增加；PSK增强了IFN-Y对巨噬细胞LDL的抑制作用，减弱了一氧化氮合酶抑制剂N-Arg和DPI对细胞氧化LDL的增强作用；同时PSK能增强IFN-Y对细胞分泌NO的诱导作用，减弱N-Arg对细胞分泌NO的抑制作用；PSK能增强Raw264.7细胞iNOSmRNA和蛋白表达。结论PSK能抑制巨噬细胞对LDL的氧化，其作用机制可能与其能诱导iNOS基因表达有关。
- 王瑾雯陈瑗周玫莫永炎张宝
- 关键词：云芝多糖LDLINOS巨噬细胞
- 星形胶质细胞条件培养液对tbOOH致PC12细胞凋亡的抑制作用被引量：3
- 2004年
- 目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流式细胞术测定细胞凋亡率的变化;用巴比妥酸法评估细胞内丙二醛含量的变化。结果tbOOH可诱导PC12细胞凋亡,而星形胶质细胞条件培养液可降低其凋亡;同时,巴比妥酸法显示星形胶质细胞条件培养液可显著性降低PC12细胞丙二醛含量(P<0.05)。结论星形胶质细胞条件培养液有提高PC12细胞抗氧化能力,可抑制活性氧tbOOH诱导的神经细胞凋亡。
- 莫永炎邢飞跃张宝陈瑗姜勇
- 间隙连接的结构和功能（综述）
- 1996年
- 间隙连接的结构和功能（综述）＊罗深秋莫永炎董敬明（第一军医大学基础部细胞生物学与医学遗传学教研室５１０５１５，广州）在多细胞生物中，除少数细胞如血液中的细胞外，绝大部分细胞必须相互粘附、连接并按一定方式排列才能有效地发挥其生理作用。将细胞连接在一起的...
- 罗深秋莫永炎董敬明
- 关键词：细胞连接细胞生物学
- 人His-AWP1融合蛋白表达载体的构建及其在原核生物的表达被引量：7
- 2003年
- 目的 获取人His-AWP1融合蛋白,为下阶段深入研究AWP1的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础 方法 应用逆转录聚合酶链反府(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞系中克隆AWP1 cDNA,并将其重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒DET-14b中。经酶节、序列鉴定,选择正确重组克隆,将其质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA His柱纯化和SDS-PAGE分离蛋门。结果克隆到一个627 bp的AWP1 cDNA片段.重组质粒目的DNA测序正确.纯化出了一个分子量约为38 kD的融合蛋白。结论用基因工程方法在原核细胞表达并成功纯化出His-AWP融合蛋白。
- 莫永炎曹永宽刘亚伟龚小卫姜勇
- 关键词：ECV304细胞
- His-GILZ原核表达载体的构建及其表达与纯化被引量：2
- 2009年
- 目的获取糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)的His融合蛋白,为下阶段深入研究GILZ的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础。方法利用基因工程技术,BamHⅠ/XhoⅠ酶切真核表达质粒HA-GILZ/PcDNA3获得GILZ cDNA,重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒pET-30a中。然后用该亚克隆重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA柱纯化。结果亚克隆获得GILZ/pET-30a高效原核表达重组载体,诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,纯化的蛋白分子量约为24kD。结论成功构建His-GILZ融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化,为进一步研究其结构功能关系和临床应用奠定了基础。
- 王毅飞蔡德鸿陈宏莫永炎伊娜邢飞跃
- 关键词：融合蛋白纯化
- 星形胶质细胞条件培养液对活性氧所致的神经元损伤的防护作用被引量：21
- 2000年
- 本文以活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH应激PC12神经元细胞,造成PC12神经元损伤、死亡;以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的无血清条件培养液培养tbOOH损伤的神经元细胞。采用快速灵敏的MTT比色法测定神经细胞活力,用Olym-pus光学显微镜观察神经细胞的形态学变化。结果发现神经元细胞活力由0.179±0.037上升至0.563±0.025,细胞数目明显增多,细胞死亡残留碎片明显减少,表明星形胶质细胞条件培养液可能有防护tbOOH致的神经元损伤作用,具抗氧化能力。
- 莫永炎陈瑗周玫
- 关键词：活性氧神经元损伤
- 红外荧光成像技术分析DNA-蛋白复合物电泳迁移率的变动被引量：3
- 2009年
- 目的通过红外荧光技术研究糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)与过氧化物酶体增殖物活化受体γ2(PPARγ2)启动子寡核苷酸的结合,了解一种非放射性研究电泳迁移率变动分析的新方法。方法原核表达制备GILZ蛋白,与红外荧光染料IRDye800标记的PPARγ2启动子寡核苷酸结合,丙烯酰胺非变性胶电泳分离,Odyssey红外荧光成像系统扫描分析。结果一条DNA-蛋白结合复合物图像清晰直观,信号强度随着蛋白量的增加而增加。结论红外荧光技术可用于DNA-蛋白复合物电泳迁移率变动的分析,具有灵敏度高、操作方便的优点。
- 王毅飞蔡德鸿陈宏莫永炎伊娜邢飞跃
- 混合培养神经元和星形胶质细胞对活性氧的应激性被引量：2
- 2001年
- 目的研究混合培养脑神经元与星形神经胶质细胞对活性氧叔丁基脂氢过氧化物（ｔｂＯＯＨ）的应激性，以探讨神经 元与星形神经胶质细胞的相互作用。方法采用ＭＴＴ比色法测定单独培养的大鼠大脑皮层神经元与星形神经胶质细 胞在分别遭受ｔｂＯＯＨ攻击后的细胞存活率，及用形态学方法评估二者混合培养时遭受ｔｂＯＯＨ攻击时的细胞形态变 化。结果单独培养时遭受ｔｂＯＯＨ攻击后的细胞存活率无显著性差异（Ｐ＞０．０５），但二者混合培养时，神经元比星形神 经胶质细胞损伤、死亡严重。结论神经元和星形神经胶质细胞共同存在时，星形神经胶质细胞较神经元对活性氧有 较强的抵抗力。
- 莫永炎陈瑗周玫张宝邱小忠
- 关键词：大脑皮质神经元氧应激
- RFP-AWP1原核表达载体的构建及表达特性研究
- 2008年
- 目的:建立红RFP-AWP1融合基因的原核表达载体,研究其表达蛋白特性。方法:将克隆的人AWP1(associated with protein kinase Crelated kinase 1,AWP1)和水母的红色荧光蛋白(redfluorescence protein,RFP)的cD-NA插入到原核表达载体pET-17b的多克隆位点(mutiple clone sites,MCS)中,经AWP1 cDNA的PCR鉴定和E.coli DE3中的表达鉴定后,E.coli DE3表达AWP1-RFP融合蛋白,荧光显微镜观察其表达特性及与GST-beads的pull-down实验。结果:成功构建了载体pET-AWP1-DsRed1,在大肠杆菌中获得了高效表达的AWP1-RFP融合蛋白,其活菌液在荧光显微镜下呈火山熔岩状的亮红色,干固的细菌呈斑片状红色荧光;AWP1-RFP融合蛋白可与GST-beads结合,并在激发波长为508nm的条件下呈红色荧光,而在波长为488 nm激发光条件下可见橙黄色荧光。结论:在体外验证了AWP1-RFP融合蛋白具有可视性表达的特点,同时发现其能与GST-beads结合,为pull-down AWP1及其相关蛋白提供了一条新途径,为研究AWP1-RFP融合蛋白在真核细胞中的表达、定位及蛋白-蛋白相互作用等具有指导意义。
- 曹永宽莫永炎薛刚王培红姜勇田伏洲
- 关键词：红色荧光蛋白大肠杆菌
- 云芝多糖对脑、肝组织的抗氧化作用研究被引量：36
- 2001年
- 目的 探讨中药云芝多糖对脑、肝组织抗氧化作用的影响及机制。方法 以SD大鼠和昆明小鼠为动物模型 ,采用Fe H2 O2 诱导大脑皮层组织和肝组织匀浆的脂氢过氧化反应及黄嘌呤氧化酶体系释放自由基超氧阴离子 (O·2 ) ,以改良的邻苯三酚自氧化法、DNTB直接法测定脑组织抗氧化酶活性及原位杂交法检测脑组织硒谷胱甘肽过氧化物酶 (SeG Px)mRNA表达。结果 云芝多糖有提高脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)、SeGPx和非硒谷胱甘肽过氧化物酶 (non SeGPx)抗氧化酶活性 ,增加SeGPxmRNA表达 ,降低脑、肝组织Fe H2 O2 引发的脂氢过氧化反应和黄嘌呤氧化酶体系产生的O·2 。结论 云芝多糖可提高鼠大脑皮层、肝组织的抗氧化作用 ,对开发应用多糖类药物防治神经系统疾病。
- 莫永炎陈瑗周玫姜勇
- 关键词：云芝多糖大脑皮层抗氧化作用肝组织药物
