苟小兰
- 作品数：21 被引量：97H指数：6
- 供职机构：西南民族大学更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目四川省科技计划项目国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的诊断与治疗被引量：1
- 2012年
- 黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）属于鲇形目、鳞科、黄颡鱼属，又名黄腊丁，是一种重要的淡水经济鱼类，广泛分布在我国各种水域中。黄颡鱼营养丰富、味道鲜美，深受消费者青睐，也引起了科技人员的极大关注。随着养殖集约化程度的加大，由于水体污染严重、化学药品滥用、微生物病原传播等原因使黄颡鱼的疾病频繁发生。2012年6月，本实验室采用常规的细菌鉴定方法结合分子生物学方法，从四川成都某养殖场的发病黄颡鱼体中分离鉴定出了小肠结肠炎耶尔森氏菌，并采用PCR方法扩增该小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株的五个毒力基因，验证了该菌株的致病性，最后提出该疾病的治疗措施，从而为黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的防治积累资料。
- 王利苟小兰魏勇侯显耀
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌黄颡鱼分子生物学方法淡水经济鱼类PCR方法
- 小肠结肠炎耶尔森氏菌对黄颡鱼的致病性及毒力基因检测被引量：11
- 2013年
- 为研究小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株GM2402对黄颡鱼的致病性及毒力基因分布,采用动物回归感染试验方法探讨菌株对黄颡鱼的致病性,利用PCR技术扩增毒力基因,通过药物敏感试验检测该菌株对抗生素的敏感性。在动物回归感染试验中,试验处理组鱼7d内的死亡率达100%,从感染后的试验鱼体中再次分离到小肠结肠炎耶尔森氏菌,证实了该菌株具较强致病性;成功扩增到粘附侵袭位点、耐热肠毒素、粘附素、毒力活化因子和强毒力岛上P4样噬菌体整合酶5种毒力基因,揭示毒力基因与致病性密切相关。菌株GM2402对卡拉霉素、恩诺沙星、磺胺异恶唑等9种药物高度敏感,对氟苯尼考、先锋霉素V中度敏感,而对链霉素、洁霉素等5种药物表现为耐药,这将为鱼类小肠结肠炎耶尔森菌病的有效防治提供参考。
- 苟小兰王利
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌黄颡鱼毒力基因
- 致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定及三重PCR检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为鉴定导致患病鲫鱼肛门红肿、腹部有出血点症状的病原菌,并建立一种快速检测该病原菌的方法。本研究从患病鲫鱼中分离了病原菌,采用形态学、理化特性分析及16S rDNA序列分析方法鉴定菌株。采用PCR扩增法检测该菌毒力基因,琼脂纸片扩散法检测该菌株的耐药性,致病性能验证试验检测其致病性。针对该菌ail基因、inv基因和intB基因设计了3条特异性引物,通过对反应体系和条件的优化,建立了一种检测该菌的三重PCR方法并初步应用于患病鲫鱼样品的检测中。结果显示,从患病鲫鱼心脏组织中分离了一株小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica),命名为fsznc-10。检测到该菌携带ail、ystB、virF、intB毒力基因,该菌对诺氟沙星、庆大霉素等5种抗生素敏感,对鲫鱼具有一定的致病性。三重PCR方法可准确扩增出小肠结肠炎耶尔森氏菌ail、inv和intB三个目的基因,而其他菌株均未扩增出目的基因。该方法检测该菌DNA最低检出量为1.704×10-6 ng/μL,检测患病鱼心脏样品的阳性率约为86.67%,与16S rDNA序列分析方法的检测符合率为100%。本试验建立的三重PCR检测法具有特异性强、敏感性高、操作简单、成本低的优点。这为临床中小肠结肠炎耶尔森氏菌的防控和检测提供参考依据。
- 张楠驰苟小兰王利
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因多重PCR
- 鱼源小肠结肠炎耶尔森菌5种毒力基因的检测和分析被引量：1
- 2013年
- 采用煮沸法和细菌基因组DNA试剂盒两种方法制备鱼源小肠结肠炎耶尔森菌DNA模板,运用聚合酶链反应(PCR)方法检测小肠结肠炎耶尔森菌的5种毒力基因(ail、yadA、virF、ystB和HPI-int),并对HPI-int基因进行测序分析。结果表明,小肠结肠炎耶尔森菌ail、virF和HPI-int 3种毒力基因被检测出,而另外两种毒力基因ystB和yadA未被检测到。HPI-int基因长度为722bp,GenBank序列号为JX041513,与该数据库中的小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛基因的相似性达到99%,由此推断该菌株具有较强的致病性。这为深入研究小肠结肠炎耶尔森菌的毒力和危害积累了科学资料。
- 王利苟小兰
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森菌毒力基因
- 齐口裂腹鱼维氏气单胞菌16SrDNA序列分析被引量：10
- 2012年
- 从齐口裂腹鱼(Sclizothorax prenanti)肠道中分离出菌株Spc0408,采用常规形态特征的观察、生理生化试验、结合16S rDNA基因序列分析并构建系统发育树。结果表明,该菌为革兰氏染色呈阴性,短杆形,无芽孢;该菌理化特性为具有动力性,H2S、尿素阴性、不发酵木糖、鼠李糖、山梨醇等;β-半乳糖苷酶、葡磷胨水、枸橼酸盐阳性;其16S rDNA长度为1443bp,GenBank数据库登录号为JF929912,与GenBank中维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的相似性高达97%;系统发育树显示,菌株Spc0408和多株维氏气单胞菌聚为一簇。综合分离菌的生化特征及分子鉴定结果,判定该菌株是维氏气单胞菌,从而为气单胞菌的分类鉴定提供参考。
- 刘港彪王利王吉坤龙钟明苟小兰
- 关键词：齐口裂腹鱼维氏气单胞菌RDNA系统发育分析
- 丁鲑鱼维氏气单胞菌的鉴定和生物学特性研究被引量：5
- 2012年
- 对引起丁鲑鱼发病的菌株——XN602进行鉴定和生物学特性研究,经形态特征与生理生化鉴定,结果表明:该菌为革兰氏阴性杆菌,其16SrDNA序列与GenBank中多株维氏气单胞菌相似性高达99%,系统发育树显示该菌与维氏气单胞菌聚为一簇。因此,分离菌株XN602在分类学上应属于维氏气单胞菌。
- 苟小兰王利侯显耀龙钟明魏勇黄文明
- 关键词：维氏气单胞菌RDNA系统发育分析
- 复方中药对黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的防治被引量：2
- 2013年
- 小肠结肠炎耶尔森氏菌广泛分布在环境、食品、动物及人群中，对人、家畜、家禽及水产动物均有致病能力，是重要的“人一畜一鱼”共患病原菌。已有研究表明该菌可感染鱼类并导致其大量死亡。近年来，水产养殖集约化规模进一步扩大，细菌性病害问题日益凸显，目前在防治该类病害过程中抗生素及化学合成药物仍占主导地位，但长期不合理运用药物易引发耐药性及药残超标等问题。
- 苟小兰王利
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森氏菌黄颡鱼复方中药化学合成药物细菌性病害
- 黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌16S rDNA及系统发育分析被引量：4
- 2012年
- 从发病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)心脏中分离到1株细菌GM 2402,进行了分离培养、形态学观察、生理生化试验与16S rDNA基因的PCR扩增及序列分析。结果表明,菌株GM 2402为革兰氏阴性杆菌,具动力性,V-P试验、水杨酸、过氧化氢酶、脲酶等阳性,不发酵鼠李糖、乳糖等,硫化氢、枸椽酸盐等阴性。16S rDNA序列长1 417 bp,GenBank的登录号是JX 101598,且与数据库中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)的相似性高达99.6%,系统发育树显示与小肠结肠炎耶尔森氏菌聚为一个分支。综合菌株的生化特性及分子生物学分析结果,判定菌株GM2402为小肠结肠炎耶尔森氏菌。
- 苟小兰王利黄艳青
- 关键词：黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌RDNA系统发育分析
- 鱼源维氏气单胞菌的耐药性研究被引量：11
- 2013年
- 为检测7株鱼源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的耐药基因和耐药表型的分布情况,试验采用PCR法检测分离株中氨基糖苷类耐药基因(aac(3)-Ⅱa、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰa和aph(3′)-Ⅱa),磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2和Sul3)和四环素类耐药基因(tetA、tetC和tetM),运用Kirby-Bauer纸片扩散法检测7株鱼源维氏气单胞菌分离株对22种常用抗生素的敏感性。结果表明,可检出耐药基因aac(3)-Ⅱa(71.4%)、aac(6′)-Ⅰb(85.7%)、Sul2(85.7%)和tet A(28.5%);未检出ant(3″)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅱa、Sul1、Sul3、tetC和tetM基因。7株维氏气单胞菌对磷霉素(100%)、多黏霉素B(100%)、痢特灵(85.7%)、奥复星(71.4%)较敏感;对氨苄西林(100%)、乙酰螺旋霉素(100%)、复方新诺明(85.7%)、磺胺异恶唑(85.7%)、四环素(85.7%)等耐药。这说明耐药基因和耐药表型之间存在一定的相关性。
- 王海娟王利苟小兰龙钟明赵静
- 关键词：维氏气单胞菌耐药基因耐药表型
- 小肠结肠炎耶尔森菌对磺胺类和 β -内酰胺类抗生素的耐药性研究被引量：8
- 2014年
- 为了探讨12株小肠结肠炎耶尔森菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药性,试验采用标准K-B纸片扩散法检测该菌对磺胺类和β-内酰胺类抗生素的耐药表型,并采用PCR法检测磺胺类耐药基因(sul1、sul2、sul3基因)和β-内酰胺类耐药基因(TEM基因)。结果表明:头孢噻吩、复方新诺明和磺胺异唑治疗效果较差,耐药率分别高达58.3%、66.7%、58.3%,但先锋霉素Ⅴ抑菌效果较好,头孢菌素次之;在菌株中检测出磺胺类耐药基因sul1、sul2和β-内酰胺类耐药基因TEM,其检出率分别为91.7%、100%、75.0%,而sul3基因未检出。
- 赵静王利邱翔苟小兰王海娟
- 关键词：小肠结肠炎耶尔森菌磺胺类抗生素Β-内酰胺类抗生素
