苗德强
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小鼠死后滞留对卵母细胞和胚胎的影响
- 各种实验中所使用的卵母细胞多数来自屠宰场宰杀后的动物。死后动物机体会发生一系列生理生化变化，这些变化对卵母细胞质量的影响有待研究。本实验研究了处死小鼠后短时间滞留对卵巢卵母细胞、排卵后卵母细胞和着床前胚胎的影响，为更好地...
- 苗德强
- 关键词：小鼠卵母细胞胚胎
- 文献传递
- 影响小鼠体细胞脂质体法转染效率的因素被引量：10
- 2005年
- 本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响.首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响.结果表明,在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×104个细胞,70%-90%贴满程度,当脂质体(LipofectAMINE)4μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高,为30.7%.用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%,3代为28.9%,到15代降到7.2%.说明随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低.将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%.可见不同种类细胞的转染效率不同.细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关.这为如何提高转染效率提供了有利的依据.
- 于建宁苗德强马所峰谭秀文袁继红谭景和
- 关键词：基因转移脂质体小鼠体细胞转染效率脂质体法
- 能量代谢在小鼠卵老化中的作用及小鼠胚胎发育的雄性效应研究
- 第一章能量代谢在小鼠卵老化中的作用 停滞在MII期的哺乳动物卵母细胞随着在输卵管或培养液中停留时间的延长而发生老化。老化的卵母细胞受精导致胚胎发育异常,而且卵母细胞老化也不利于体外受精和体细胞核移植等体外卵母细胞操作。在...
- 苗德强
- 关键词：能量代谢受精孤雌激活
- 应用乙二醇冷冻小鼠胚胎:优化和简化程序的探索被引量：3
- 2005年
- 提高解冻胚胎的发育能力和简化冷冻解冻程序是胚胎冷冻研究的两大永恒的主题。尽管乙二醇(EG)广泛用于家畜胚胎冷冻,但很少用于冷冻小鼠和人胚胎。为数很少的以EG慢冻小鼠或人胚胎的研究均采用较为复杂的人胚冷冻程序,未见简化程序和用EG冷冻小鼠桑椹胚的报道。采用简单的牛胚胎冷冻程序研究了发育时期、EG浓度、平衡方法、添加蔗糖以及解冻后脱除EG等对小鼠胚胎冻后发育能力的影响。结果显示:(1)致密晚期桑椹胚冻后体外培养囊胚发育率(81.92%±2.24%)和孵出率(68.56%±2.43%)显著(P<0.05)高于4细胞、8细胞胚胎和致密早期桑椹胚胎;(2)1.8molLEG冷冻小鼠致密晚期桑椹胚的囊胚发育和孵出率显著高于其它浓度;(3)在EG中平衡10min的冻后囊胚发育显著好于平衡5、20或30min;(4)两步平衡冷冻胚胎的囊胚发育率和孵出率显著高于一步平衡;(5)用EG冷冻小鼠胚胎无需添加蔗糖;(6)解冻后可不脱除EG;(7)冻后发育的早期囊胚和囊胚细胞数明显少于体内发育胚胎。因此,用EG冷冻小鼠胚胎的最佳方案为:致密晚期桑椹胚用1.8molLEG不添加蔗糖、两步平衡15min、以简单的牛胚胎冷冻程序冷冻解冻、解冻后不脱除EG直接培养或移植。
- 罗明久刘娜苗德强兰国成马所峰常仲乐谭景和
- 关键词：胚胎冷冻乙二醇小鼠
