耿超
- 作品数：10 被引量：47H指数：4
- 供职机构：南京中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 基于ITS2序列的茅苍术及其近缘种DNA分子鉴定被引量：10
- 2015年
- 目的应用ITS2条形码鉴定茅苍术Atractylodes lancea及其近缘种药材。方法提取不同产地29份茅苍术、北苍术A.chinesis及白术A.macrocephala基因组DNA,通过PCR扩增ITS2序列并进行双向测序,测序结果提交至Gen Bank;从Gen Bank下载茅苍术及其菊科近缘种10种45条ITS2序列;对提交与下载的73条序列,应用MEGA 5.1软件进行序列比对,计算种内和种间距离,采用相似性搜索法、最近距离法进行鉴定分析,并构建Neighber-jioning(NJ)系统进化树直观反映鉴定结果。结果茅苍术药材ITS2序列长度均为229 bp,是1个单倍型;与菊科近缘种苍术属药材距离较近,与菊科其他属近缘种之间遗传距离较远,NJ树结果显示茅苍术及其近缘种药材均可明显区分,表现出良好的单系性,依据ITS2二级结构,也可以直观地将茅苍术与菊科近缘种药材区分。结论 ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别茅苍术药材,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。
- 邵婧谷巍巢建国耿超孙红梅李孟洋
- 关键词：茅苍术北苍术白术近缘种ITS2物种鉴定
- 泽泻3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抗体制备及检测方法
- 本发明涉及一种泽泻3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶，具有序列表SEQ？ID？No.2的氨基酸序列，或由具有序列表SEQ？ID？No.1的碱基序列的基因所编码。本发明还涉及了上述泽泻3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶...
- 谷巍吴启南巢建国徐飞李思蒙田方耿超
- 文献传递
- 卷柏科药用植物种间遗传多样性的ISSR分析被引量：4
- 2016年
- 应用ISSR分子标记技术对34种卷柏科植物（其中18种药用植物）进行遗传多样性分析。利用PopGene 32软件及NTsys2.10e软件分析卷柏科34种植物的遗传多样性及亲缘关系,并根据UPGMA法,构建亲缘关系树状图。从100个随机引物中筛选出7条多态性稳定、条带清晰的引物,共扩增出156条谱带,多态性比例为100%。分析结果表明,平均Shannon信息指数为0.537,平均Nei’s基因多样性指数为0.359,平均有效等位基因数为1.617,34种卷柏科植物种间的遗传相似性系数在0.359-0.872,显示出该植物类群具丰富的遗传多样性。聚类分析结果表明,34种卷柏科植物之间有较明显的分界,其中卷柏与垫状卷柏,剑叶卷柏与异穗卷柏,兖州卷柏和江南卷之间的亲缘关系较近,分别聚为一类。初步证明利用ISSR分子标记可有效地分析卷柏科药用植物的遗传多样性,从而为卷柏科植物的分类鉴定以及资源的合理开发利用提供理论基础和科学依据。
- 孙红梅谷巍耿超孙庆文曹园
- 关键词：卷柏科ISSR聚类分析
- 基于反转录双链DNA扩增片段长度多态性技术的不同产地太子参基因差异表达分析
- 2016年
- 目的研究不同产地太子参的基因差异表达,分离并鉴定相关差异基因。方法采用反转录双链DNA扩增片段长度多态性技术分析国内4个主产地太子参差异表达基因片段。结果筛选6个引物组合进行扩增,从不同产地太子参中获得34条差异表达转录衍生片段(trivially distributed file system,TDFs),对差异片段进行克隆、序列测定,得到21个TDFs核苷酸序列。经过BLASTX程序比对,15个TDFs有其对应的显著同源序列,其中7个TDFs为已知功能的蛋白,这些蛋白主要参与植物的生长发育、抵御病虫害、提高植物抗非生物胁迫的能力。结论利用c DNA-AFLP技术鉴定出不同产地太子参的差异基因,为揭示太子参药材品质形成的分子机制提供基础资料。
- 华愉教耿超王胜男刘训红谷巍罗益远刘娟秀侯娅马阳
- 关键词：太子参差异表达基因
- 穿心莲生理特性及盐胁迫对其影响研究被引量：7
- 2014年
- 目的:研究穿心莲的生理特性及盐胁迫的影响。方法:用LI-6400光合仪等便携式仪器及试剂盒等研究穿心莲的光合、蒸腾、酶活等生理特性,用不同浓度NaCl对穿心莲进行盐胁迫处理,并测定各生理指标的变化。结果:穿心莲净光合速率(Pn)与气孔导度(Gs)日变化呈双峰曲线,蒸腾速率(Tr)及气孔限制值(Ls)日变化呈单峰曲线,胞间CO2浓度(Ci)及水分利用率(WUE)日变化呈单谷曲线。盐胁处理下,随着浓度的增加,Pn、Tr、Ci、Gs、WUE均下降,Ls呈上升趋势,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶酶活性均先升后降,丙二醛含量、脯氨酸含量呈上升趋势。结论:穿心莲为阳生植物,存在明显的"光合午休"现象,具一定耐盐性,应向阳种植,并可对其进行适当的遮荫处理,以提高其质量。
- 陈娟谷巍段金廒宿树兰邵婧耿超
- 关键词：穿心莲生理特性保护酶系统渗透调节物质盐胁迫
- 慢性肾功能衰竭患者不同血液净化方式溶质清除特征的比较被引量：5
- 2018年
- 目的 :探讨血液透析(hemodialysis, HD)、血液透析滤过(hemodiafiltration, HDF)、血液灌流(hemoperufsion,HP)在慢性肾功能衰竭尿毒症溶质清除疗效方面的差异。方法:以南通大学附属医院血液净化中心进行血液净化治疗的慢性肾功能衰竭尿毒症患者89例为研究对象,按照不同血液净化方式分成4组(HD组,HDF组,HD+HP组,HDF+HP组),比较4组患者溶质清除疗效。结果:4组患者在性别、年龄、透析龄、平均动脉压、血红蛋白、白蛋白水平、原发病等方面比较差异均无统计学意义(均P>0.05);4组患者的血电解质(钠、钾、钙、磷)在治疗前后比较亦无统计学意义(P>0.05);4组患者血尿素氮、肌酐、尿酸于透析后较透析前均有明显下降,4组治疗后对小分子毒素清除比较差异无统计学意义(P>0.05);与HD组相比,HDF组与HD+HP组显著增加甲状旁腺激素及β2微球蛋白的清除,而HDF+HP组较其他3组增加更为显著。结论:4种血液净化方式都能有效地清除慢性肾功能衰竭患者体内尿毒症毒素;对血电解质及小分子毒素具有相似的清除效果,在清除患者体内增多的甲状旁腺激素及β2微球蛋白方面,HDF+HP法较HD、HDF以及HD+HP法更为有效。
- 张俊王新美耿超陈玲黄新忠
- 关键词：慢性肾功能衰竭尿毒症毒素血液透析血液透析滤过血液灌流
- 不同生长期穿心莲活性成分及关键酶基因差异表达研究被引量：14
- 2014年
- 目的对主产地广东遂溪、福建漳浦及引种栽培地区江苏南京、淮安的不同生长期穿心莲Andrographis paniculata活性成分及关键酶基因表达情况进行分析,研究穿心莲活性成分积累动态,探讨其最佳采收期及分子机制。方法用HPLC法测定穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯量,并用实时荧光定量PCR技术从m RNA水平比较研究不同生长期穿心莲关键酶ent-柯巴基焦磷酸合酶(CPS)基因的表达情况。结果不同产地穿心莲生长过程基本一致,在营养生长时期生长迅速,进入生殖生长后生长趋于平缓。4个产地穿心莲样品中活性成分变化趋势相近,穿心莲内酯量均在始花期达到最高,脱水穿心莲内酯量变化较平缓;穿心莲CPS基因的相对表达量在蕾期至始花期相对较高,与穿心莲内酯量呈显著正相关。4个产地穿心莲的穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯之和均达到《中国药典》2010年版标准。结论穿心莲最佳采收期应以物候期为评判依据,其最佳采收期为始花期。
- 陈娟谷巍段金廒宿树兰邵婧孙红梅耿超
- 关键词：穿心莲穿心莲内酯脱水穿心莲内酯
- 泽泻法呢基焦磷酸合酶原核表达、功能验证及其免疫检测研究被引量：2
- 2018年
- 泽泻法呢基焦磷酸合酶[farnesylpyrophosphatesynthaseofAlismaorientale(Sam.)Juzep.,Ao FPPS]是泽泻原萜烷型三萜生物合成途径中的重要限速酶之一。为进一步研究Ao FPPS基因的表达及其功能,本研究将前期获得的泽泻法呢基焦磷酸合酶基因(accessionNo.HQ724508)插入到原核表达载体,构建重组表达载体p Czn1-Ao FPPS,转化BL21原核宿主菌,经诱导表达获得融合蛋白;利用Ni树脂亲和纯化技术对融合蛋白进行纯化获得高纯度的重组蛋白,并进行体外酶促反应以验证其功能,高效液相色谱结果表明Ao FPPS能够催化法呢基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate, FPP)的合成。为进一步研究其表达规律,将该纯化后的重组蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测抗体具高效价,且Westernblot结果显示该抗体可特异性识别Ao FPPS蛋白,建立了Ao FPPS的快速免疫检测方法。本研究为揭示Ao FPPS在泽泻体内的作用机制及其基因的调控与表达奠定基础,为利用植物基因工程提高泽泻资源性活性成分含量、改善中药材品质提供科学依据。
- 周晨田荣谷巍耿超吴启南徐飞巢建国刘琪王小浩
- 关键词：泽泻原核表达免疫检测
- 基于ITS2序列的建泽泻及其混伪品鉴定研究被引量：3
- 2016年
- 目的利用ITS2条形码鉴别建泽泻及其混伪品。方法提取28份建泽泻及其混伪品基因组DNA,PCR扩增ITS2序列并进行双向测序,测序结果提交至GenBank,同时从GenBank下载泽泻科植物及其混伪品10种17条ITS2序列,对提交与下载的45条序列,应用MEGA 5.1软件进行序列比对,计算种内和种间距离,采用相似性搜索法、最近距离法进行鉴定分析,并构建NJ系统进化树直观反映鉴定结果。结果建泽泻、川泽泻ITS2序列长度均为311bp,存在1个变异位点;建泽泻与泽泻科泽泻属物种距离较近,与泽泻科其他属及其混伪品之间遗传距离较远;NJ树结果显示建泽泻及其混伪品均可明显区分,表现出良好的单系性。结论 ITS2序列作为DNA条形码可以准确快捷地鉴别建泽泻及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了新的技术手段。
- 耿超谷巍吴启南巢建国孙红梅蒋玲韩赟
- 关键词：混伪品ITS2
- 基于cDNA-AFLP技术分析不同种源和地域太子参基因差异表达被引量：3
- 2016年
- 研究不同种源和地域太子参的基因差异表达,分离并鉴定相关差异基因。采用c DNA-AFLP技术分析2个不同种源和地域太子参差异表达基因。筛选6个引物组合进行扩增,从同种源不同地域及同地域不同种源太子参中分别获得44、38条差异表达转录衍生片段(Trivially distributed file system,TDFs),对差异片段进行克隆、序列测定,分别得到27、25个TDFs核苷酸序列。经过BLASTX程序比对,分别有19、16个TDFs有其对应的显著同源序列,其中有7、6个TDFs为已知功能的蛋白,这些蛋白主要参与植物的生长发育、抵御病虫害、提高植物抗非生物胁迫的能力。本研究为揭示太子参药材品质形成的分子机制提供基础资料。
- 华愉教耿超王胜男刘训红谷巍罗益远刘娟秀侯娅马阳
- 关键词：太子参CDNA-AFLP差异表达基因
