穆蕊 作品数:26 被引量:33 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院国家生物医学分析中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
表皮生长因子效应评价细胞模型的建立 2011年 为了筛选表皮生长因子(EGF)信号通路的未知调控分子,利用人正常乳腺上皮细胞系MCF10A建立了EGF效应评价模型,包括细胞增殖、迁移以及细胞周期的进程等。结果显示,EGF能有效促进MCF10A细胞的增殖。饥饿同步化后,EGF能促进细胞从G1期进入S期,开始DNA的合成。此外,Transwell实验显示EGF能明显促进MCF10A细胞的迁移。 陈亮 穆蕊 甄诚 高彦飞 李腾 于鸣 巩伟丽 李爱玲关键词:表皮生长因子 细胞周期 利用Oris技术观察多种因素对人乳腺癌细胞迁移的影响 被引量:2 2011年 为分析细胞生长的表面材质和细胞因子等不同刺激因素对人乳腺癌细胞二维迁移的影响,保证实验的可重复性,使用新型的Oris细胞迁移分析技术分析了Ⅰ型胶原、Matrigd和TNF-α等因素作用下运用动特征的变化,实验结果表明Ⅰ型胶原能够促进MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的迁移,而Matrigel对细胞迁移无明显影响。同时实验证明TNF-α对MDA-MB-231细胞的迁移有明显的促进作用。上述研究结果表明表面材质和细胞因子等刺激因素均能够影响乳腺癌细胞的迁移特性。实验同时表明Oris技术稳定可靠操作简便,具有良好的应用前景。 甄诚 陈亮 穆蕊 巩伟丽 柏兆方 王芊艺 满江红关键词:细胞迁移 TNF-Α 体外反应体系中APC/C活性及相关研究 2011年 为利用体外反应体系研究纯化的细胞周期后期促进复合物(APC/C)相关的分子事件,以其底物泛素化为检测指标,分别从来源细胞裂解液浓度,不同底物间泛素化强度,以及与纺锤体检查点复合物的解离等几方面进行了研究。结果显示,由浓度高的细胞裂解液纯化出的APC/C活性高,其对底物Geminin的泛素化活性较Cyclin B高,在APC/C活性由被抑制到释放过程中,APC/C与Mad2,BubR1结合减少且Cdc20泛素化增强。 高彦飞 李腾 常艳 王玉博 穆蕊 陈亮 甄诚 韩秋影 于鸣 巩伟丽 张维娜 李慧艳关键词:底物 活性 解离 实时无标记肿瘤细胞迁移筛选技术体系的建立 被引量:1 2013年 肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的最主要原因。细胞迁移在多步骤、多阶段的肿瘤转移过程中发挥着重要的作用。尽管有许多迁移相关分子的研究,但细胞迁移的分子机制仍不清楚。研究将xCELLigence细胞分析系统和RNA干扰技术结合,初步建立了实时无标记的肿瘤细胞迁移筛选技术体系。该技术体系的建立将为大规模的肿瘤细胞迁移筛选工作奠定基础,还将有助于发现肿瘤细胞迁移信号通路中新的调控分子,揭示肿瘤转移的分子机制。 赵青 穆蕊 王少鑫 韩秋影 巩伟丽 满江红关键词:肿瘤转移 细胞迁移 RNA干扰 ^(60)Co γ射线诱发人外周血淋巴细胞染色体畸变的剂量率效应 被引量:6 2008年 为准确估算受不同剂量率照射者的生物吸收剂量,分别采用低、中、高三种不同剂量率的60Coγ射线照射离体人血,一步法培养52h收获制片,根据染色体双着丝粒+环畸变率拟合剂量效应曲线。结果表明,相同吸收剂量点不同剂量率诱发的畸变率随剂量率的增加而增加,存在明显的剂量率效应,用低剂量率曲线估算的吸收剂量明显高于用高剂量率曲线估算的吸收剂量。因此,在估算吸收剂量时须考虑剂量率效应,应根据辐照的实际情况尽量选择剂量率相近的刻度曲线进行估算,结果才更为准确。 蒋亚齐 陈英 穆蕊 刘秀林 刘芬菊关键词:电离辐射 染色体畸变 剂量率效应 抗CUEDC2单克隆抗体的制备及小鼠组织CUEDC2表达谱的检测 2009年 目的制备特异性识别CUE结构域蛋白2(CUE domain containing 2,CUEDC2)的单克隆抗体(mAb),并检测CUEDC2蛋白在小鼠组织中的表达。方法在大肠杆菌中融合表达GST-hCUEDC2蛋白,纯化后免疫小鼠,制备mAb。采用Western blot方法检测mAb的特异性以及小鼠组织中CUEDC2蛋白的表达。结果获得了可同时识别人源和鼠源CUEDC2 mAb,利用此mAb检测小鼠组织CUEDC2蛋白的表达水平,发现该蛋白的表达在不同小鼠组织中存在差异。结论制备的CUEDC2 mAb特异性好,并可检测CUEDC2蛋白在小鼠组织中的表达,该mAb的制备为进一步研究CUEDC2的功能奠定了基础。 于鸣 穆蕊 李文龙 王晨辉 李爱玲 郭宁关键词:CUEDC2 单克隆抗体 CUEDC1的克隆表达及其对PRB和ERα转录活性的影响 被引量:3 2009年 为了研究CUEDomain Containing1(CUEDC1)蛋白质功能,构建了pcDNA3.0-Flag-CUEDC1表达载体,并且成功表达Flag-CUEDC1蛋白质。通过双荧光报告系统,对比CUEDC1与CUEDC2对PRB和ERα转录活性的影响。其结果显示,CUEDC2能够抑制PRB和ERα转录活性,而CUEDC1对PRB和ERα转录活性的影响不显著。 穆蕊 赵洁 陈媛 张佩景 李慧艳 周涛 张学敏 李爱玲关键词:CUEDC2 转录活性 EWS蛋白质抑制核因子κB的转录活性 2010年 目的:研究EWS蛋白质是否参与核因子κB(NF-κB)信号通路,以及EWS蛋白质对NF-κB转录活性的影响。方法:在真核细胞中表达Flag-EWS,利用Western印迹检测其表达;通过双萤光素酶光报告系统,研究EWS蛋白质对NF-κB转录活性的影响及其发挥作用的分子水平。结果:Western印迹检测到相对分子质量为95×103的Flag-EWS能够在真核细胞中正确表达,过表达EWS蛋白质能够抑制TNFα、IL-1β及poly(I:C)激活的NF-κB转录活性;EWS蛋白质能够抑制由过表达HA-TRAF2或HA-p65激活的NF-κB转录活性,其抑制NF-κB转录活性发生在p65转录因子水平。结论:过表达EWS能够抑制多种刺激激活的NF-κB转录活性,这种抑制作用发生在p65转录因子水平。 王晨辉 魏传宇 李文龙 穆蕊 方迪峰 陈亮 李慧艳 巩伟丽 周涛 靳宝锋 李爱玲关键词:核因子ΚB 转录活性 Tet-off诱导表达CUEDC2稳定细胞系的建立 2011年 CUEDC2(CUE domain containging protein 2)是近年来发现的一个功能尚未十分明确的蛋白质。实验室前期的研究表明,CUEDC2通过影响孕激素受体PR抑制乳腺癌细胞生长。此外,研究还发现CUEDC2通过招募PP1磷酸酶,促进IKK复合体的去磷酸化,抑制NF-kB信号通路的激活。为了深入研究CUEDC2的功能,构建了CUED2可诱导表达载体(p617-neo-T-CUEDC2-I-tTA4),并通过逆转录病毒系统获得tet-off可诱导表达CUEDC2的稳定细胞系。该诱导表达细胞株的建立为CUEDC2功能基因的研究提供了必要的手段。 徐金敬 王玉博 王芊艺 周杰 梁冰 穆蕊 于鸣 巩伟丽 张维娜关键词:CUEDC2 稳定细胞系 CUEDC2突变体的构建及在原核和昆虫表达系统中的表达 被引量:1 2011年 为构建CUEDC2的突变体并在原核和昆虫表达系统中表达验证,根据人cuedc2序列设计引物,以其突变体质粒为模板PCR扩增目的片段,酶切后连接至pET28a原核表达载体以及pFastBac1-Flag-N和pFastBac-HTA昆虫表达系统的表达载体。转化至DH5α后提取质粒,经菌液PCR、测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)及DH10Bac感受态细胞中。原核表达载体在E.coli中表达后用Ni-NTA亲和纯化,SDS-PAGE检测。昆虫表达载体提取杆粒,转染至昆虫细胞Sf9中表达。最后用western进行鉴定。结果成功构建了CUEDC2的突变体,并在原核和昆虫表达系统中表达。说明在原核和昆虫表达系统中,成功表达的CUEDC2突变体蛋白为CUEDC2的结构和功能研究奠定了基础。 王玉博 高彦飞 李腾 常艳 穆蕊 徐金敬 王芊艺 巩伟丽 于鸣 李慧艳关键词:CUEDC2 昆虫 突变体