王林林
- 作品数:4 被引量:6H指数:2
- 供职机构:沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金:质检公益性行业科研专项项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 委内瑞拉马脑炎病毒重组抗原的制备纯化及其胶体金免疫层析检测方法的建立被引量:3
- 2011年
- 目的:表达委内瑞拉马脑炎病毒E2重组蛋白,并结合胶体金免疫层析技术建立一种简便检测委内瑞拉马脑炎病毒特异性抗体的方法。方法:利用已经构建的表达E2抗原的工程菌,用IPTG诱导,表达蛋白主要以包涵体的形式存在。通过一系列条件的变性、复性、透析,所制抗原用以包被硝酸纤维素膜,利用胶体金标记和免疫层析技术,建立委内瑞拉马脑炎病毒快速检测方法。对该方法的敏感性、特异性和稳定性作出评价。结果:重组工程菌可表达分子质量为40 kDa的目的蛋白,纯化后的蛋白质经SDS-PAGE显示纯度达95%以上。建立的检测方法可在20 min内完成检测。对症状相似及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应。试纸条在37℃下保存2周,检测结果不变。该方法与R&D公司商品化的ELISA试剂盒灵敏度检测无明显差异;对92份阴性血清进行检测,两种检测方法的符合率为96.7%。结论:重组委内瑞拉马脑炎病毒蛋白产生的包涵体变性复性后生具有良好的重复性和稳定性,可作为委内瑞拉马脑炎病毒多种检测方法的抗原原料。胶体金免疫层析法具有快速、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测。
- 王振东王林林杨宇杨永莉王静
- 初步建立胶体金免疫层析法快速检测东部马脑炎抗体被引量:2
- 2011年
- 东部马脑炎病毒(eastern equine encephalitis virus,EEEV,以下简称为东马病毒)是引起东部马脑脊髓炎的病原体。东马病毒主要是通过黑尾脉毛蚊(Culisetamelanura)和环跗库蚊(Culextarsalis)传播,而且可以经含有病毒的气溶胶通过呼吸道感染人类,感染后发病率高,传染性强,致死率高,缺乏有效的预防方法,病愈后多留有后遗症,所以被国际社会列为防制生物恐怖的主要病种之一,备受世界各国关注。
- 王林林杨宇王振东胡健萍王静
- 关键词:胶体金免疫层析法ENCEPHALITIS抗体脑脊髓炎
- 西方马脑炎病毒抗体快速检测试纸条的研制被引量:1
- 2011年
- 目的研制一种快速检测西方马脑炎病毒(WEEV)抗体的试纸条。方法利用胶体金标记和免疫层析技术,用25 nm胶体金标记葡萄球菌A蛋白,并用硝酸纤维膜包被WEEV抗原及羊抗兔IgG作为检测带和质控带,研制出WEEV抗体快速检测试纸条。对该试纸条的敏感性、特异性和稳定性做出评价,并拟合检测曲线进行半定量检测。在健康人血清、兔血清和鼠血清中添加WEEV抗体模拟污染样品,评价该方法的检测能力。结果该试纸条可在20 min内完成定性和半定量检测,灵敏度为120 ng/ml,模拟样品的检测灵敏度也相同。线性范围120~1200 ng/ml。对发病症状相似以及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应。试纸条在37℃下保存1个月,检测结果不变。结论该试纸条具有快速、简便、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测。
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- 关键词:免疫层析技术
- 东部马脑炎病毒胶体金免疫层析检测方法
- 目的:建立胶体金免疫层析快速检测东部马脑炎病毒抗体的方法。方法:利用纳米胶体金标记葡萄球菌A蛋白抗原和免疫层析技术,建立东部马脑炎病毒抗体的快速检测方法,评价其敏感性和特异性,并拟合检测曲线进行定量检测。在健康人血清中添...
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- 关键词:脑炎病毒胶体金免疫层析敏感性特异性