王恒樑 作品数:137 被引量:306 H指数:8 供职机构: 上海海洋大学食品学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
蛋白质TolC在制备免疫制剂及疫苗中的用途 本发明公开了TolC蛋白质的医疗用途,具体地说为该蛋白质在制备免疫制剂及疫苗中的应用。本发明通过实验,用免疫蛋白质组学技术发现TolC具有极强的血清学反应,因其位于胞外,很可能是中和性抗原,可用作痢疾感染的检测诊断制剂或... 王恒樑 黄留玉 应天翼 冯尔玲 苏国富文献传递 驱除侵袭大质粒pINV对福氏2a志贺氏杆菌2457T影响的比较蛋白质组学研究 被引量:1 2005年 将福氏志贺氏杆菌2a 2 4 5 7T及其驱除侵袭大质粒pINV的菌株培养至对数生长中期,制备了全细胞蛋白质。用双向电泳分离两种细胞蛋白质混合物并进行比较,找出差异点,这些点经过胶内酶切后进行MALDI_TOF质谱鉴定。每个蛋白质点的肽指纹图谱都在福氏志贺氏杆菌2a 2 4 5 7T株的蛋白质数据库用Mascot进行检索,共发现了10个差异表达的蛋白质。结果显示驱除大质粒后几个参与核酸代谢途径的酶表达量有所上升。其中胞啶脱氧胞啶脱氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶和尿嘧啶核苷磷酸化酶表达量的上升可能造成尿嘧啶和尿(嘧啶核) 李明珠 应天翼 王恒樑 张部昌 冯尔玲 王军军 黄留玉关键词:比较蛋白质组学 双向电泳 质谱 一种驱除炭疽杆菌毒力大质粒pXO1的方法 本发明公开了一种驱除炭疽杆菌毒力大质粒pXO1的方法。本发明提供了的重组载体,为将DNA分子插入穿梭质粒pKSV7的SmaI位点得到的载体;所述DNA分子的核苷酸序列为序列表中的序列1。本发明的实验证明,本发明根据质粒不... 王恒樑 刘先凯 王东澍 王华贵 冯尔玲文献传递 蜡样芽胞杆菌BC307的分离鉴定及其RsiP蛋白的抗体制备 被引量:2 2021年 蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)是一种常见的食源性致病菌。从食物中毒病人的食物残渣中分离到1株产呕吐毒素的蜡样芽胞杆菌BC307,其对青霉素类抗生素具有较强的抗性。抗SigP因子RsiP是蜡样芽胞杆菌族(Bacillus cereus sensu lato)细菌青霉素耐药的重要调控因子。该实验利用原核系统表达RsiP蛋白并利用亲和层析法进行纯化,免疫小鼠后获得高效价多克隆抗体。结果表明,RsiP蛋白在炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌中高度同源,在Western Blotting实验中RsiP抗血清与这3种菌的全菌蛋白均能发生特异性免疫反应。研究结果为探究RsiP对蜡样芽胞杆菌群细菌的青霉素耐药性调控打下了良好的基础。 郑庆芳 刘丽娜 刘先凯 吕宇飞 王恒樑 王东澍 邱泽武关键词:蜡样芽胞杆菌 青霉素耐药 RSIP 抗体制备 L-天门冬酰胺酶II的表达与纯化 被引量:3 2001年 依据发表的大肠杆菌天门冬酰胺酶II基因序列 ,合成引物 ,利用PCR技术获得天门冬酰胺酶II的结构基因 ,插入高效表达载体pBV2 2 0 ,并转化大肠杆菌菌株DH5α ,获得高效表达天门冬酰胺酶II的基因工程菌株。通过对包涵体的提取与纯化 ,结合离子交换层析获得天门冬酰胺酶II的蛋白质纯品。检测结果表明得到的天门冬酰胺酶II具有较高的比活性 ,与商品化的同类产品比活相近。 韩照中 王恒樑 冯尔玲 苏国富 黄翠芬关键词:纯化 基因序列 福氏志贺菌ipaB基因的克隆及其在酵母细胞中的表达 2003年 ipaB gene amplified from S. flexneri 2a by PCR was cloned into pGBKT7 vector (Named pGBKT-ipaB) and sequencing indicated that the amino encoded by the cloned gene was the same as the reported; The recombination plasmid pGBKT-ipaB was transformed into the yeast strain AH109, in which the fusion expression of IpaB was analyzed with SDS-PAGE and Western blotting. This provided the basis for screening the interacting protein with IpaB by two hybrid system and understanding the function of IpaB in the pathogenesis of S. flexneri further. 姚潇 王恒樑 闫晓宇 杨伯伦 黄留玉关键词:福氏志贺菌 克隆 酵母细胞 志贺氏菌Ⅲ型分泌系统及其致病机理 被引量:6 2010年 志贺氏菌的侵袭能力归功于其具有的特殊武器——Ⅲ型分泌系统,这方面的研究一直以来都是病原微生物领域关注的焦点,本文将对近年来志贺氏菌Ⅲ型分泌系统的研究进展进行简要综述。 朱力 王恒樑关键词:志贺氏菌 致病机理 一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用 本发明公开了一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法,是将重组融合蛋白和脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表达,脑膜炎奈瑟球... 吴军 潘超 孙鹏 王恒樑 刘波 彭哲慧 朱力 唱韶红 巩新 冯尔玲 王斌 曾明文献传递 生物法合成伤寒O-糖蛋白结合疫苗及其免疫原性评估 被引量:3 2015年 伤寒由伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)引发,至今在发展中国家仍是备受关注的重要公共卫生问题。文章通过敲除伤寒菌脂多糖合成途径中O-抗原连接酶基因,转入含脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)蛋白糖基化途径中糖基转移酶的表达载体,以及改构的重组铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)外毒素A(r EPAN29)的表达载体,使细胞内能够诱导合成以伤寒O特异性多糖(O-specific polysaccharides,OPS)为目标抗原、以r EPAN29为载体蛋白的伤寒OPS-r EPAN29糖蛋白复合物,并对纯化所得复合物进行了免疫原性评价。ELISA测定血清抗体滴度表明,r EPAN29作为载体蛋白能有效增加糖链的免疫原性,糖蛋白比单独的多糖能诱导产生更好的免疫应答;3次免疫、间隔3周比间隔2周Ig G滴度稍有提高;而免疫过量的糖蛋白,抗O-多糖的血清抗体效价并无提升。文章为生物法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了新思路,理论上也适用于其他革兰氏阴性菌的疫苗研发。 彭哲慧 潘超 孙鹏 冯尔玲 吴军 朱力 彭清忠 王恒樑关键词:结合疫苗 伤寒沙门氏菌 合成生物学 炭疽芽胞杆菌sigB基因缺失株的构建与研究 2019年 目的构建炭疽芽胞杆菌A16R株sigB基因缺失突变株,通过分析其表型,为后续的炭疽杆菌生命过程展开系统性研究奠定基础。方法采用同源重组技术以sigB为目标缺失基因,利用Golden-gate法构建含同源臂的打靶载体,结合基于I-SceⅠ酶驱动的芽胞菌高效敲除体系,筛选出炭疽杆菌sigB缺失突变株。通过生长曲线绘制、芽胞形成率测定、糖代谢能力比较,以及抗逆性实验等进行表型分析研究。结果成功构建了炭疽杆菌sigB缺失突变株,发现SigB对细菌生长能力、芽胞形成率和糖代谢能力均无显著影响。在抗逆性实验中,经不同浓度H2O2作用下,与野生株相比,sigB缺失突变株抑菌环无明显差异。经过48与55℃处理后,与A16R野生株比较,sigB缺失突变株菌落数减少,说明sigB缺失突变株抗热性减弱。结论成功获得了炭疽杆菌sigB基因缺失突变株。该研究表明SigB不影响芽胞形成,对细菌的抗热性有显著影响。 顾梦恩 陈蒙 王东澍 吕宇飞 王恒樑 刘先凯关键词:SIGB 抗热性 基因缺失