王媛媛 作品数:6 被引量:12 H指数:1 供职机构: 深圳大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
尘螨变应原及其应用 本发明提供了一种尘螨变应原及其应用。本发明提供的粉尘螨变应原属于组织蛋白酶D的同源物,可用于过敏性疾病的诊断、治疗、预防,特别是粉尘螨过敏性疾病,尤其特别的,是用于粉尘螨变应原第34组分引起的过敏性疾病的诊断、治疗、预防... 刘晓宇 林建立 王媛媛 梁志林 邬玉兰 刘志刚文献传递 尘螨变应原及其应用 本发明提供了一种尘螨变应原及其应用。本发明提供的粉尘螨变应原属于组织蛋白酶D的同源物,可用于过敏性疾病的诊断、治疗、预防,特别是粉尘螨过敏性疾病,尤其特别的,是用于粉尘螨变应原第34组分引起的过敏性疾病的诊断、治疗、预防... 刘晓宇 林建立 王媛媛 梁志林 邬玉兰 刘志刚文献传递 芝麻过敏原油质蛋白O leosins单克隆抗体的制备与鉴定 2013年 利用细胞融合技术制备小鼠抗油质蛋白杂交瘤细胞,通过间接ELISA方法筛选稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。获得10株杂交瘤细胞,分别命名为1B2、2D8、2F3、3A4、3D7、3F8、4A10、4F12、6A12、6E7,利用Ig亚类鉴定试剂盒鉴定各单克隆抗体的Ig亚型,除1B2、3D7、3F8为IgG1类外其余均为IgG2a类型。将杂交瘤细胞株注射入小鼠腹腔获取腹水,应用Protein A亲和层析法对腹水进行纯化。单抗效价有9株在2.0×105以上。ELISA和Western blotting分析表明这些单抗均能特异性识别芝麻过敏原油质蛋白。 王媛媛 邹菊 刘志刚关键词:单克隆抗体 空气净化器处理后牛乳β乳球蛋白的免疫反应性研究 2013年 目的通过检测牛乳β乳球蛋白免疫反应性,分析其空间结构的变化,以探讨过敏原免疫反应性下降的可能机制。方法分别取牛乳β乳球蛋白置于空气净化器(接受1、12、24h的作用,实验组)、与实验组相同温度和湿度的环境(12、24h后取样,对照组)、4℃冰箱(正常组)中。用ELISA法检测牛乳β乳球蛋白免疫反应性,采用圆二色谱仪和荧光光谱仪检测空气净化器处理前后的牛乳β乳球蛋白,分析牛乳β乳球蛋白空间结构的变化。结果实验组(作用24h)的光密度值接近0.88,相对于正常组的光密度值1.27和对照组的光密度值1.25,降低了约30%。牛乳β-乳球蛋白在空气净化器作用前后,正常组和对照组的圆二色谱光谱曲线没有发生明显的变化,而实验组处理12h和处理24h负峰值与正常组相比有明显的升高,并且呈现一定的递增趋势。实验组在280nm和295nm处的荧光强度明显强于正常组和对照组,且随着处理时间的增加强度越强。结论经过空气净化器处理之后的牛乳β乳球蛋白免疫反应性有所降低,圆二色谱光谱实验和荧光光谱实验结果表明其空间结构发生了变化,空间结构变化可能是使其免疫反应性改变的原因。 吴莹莹 刘晓宇 马忠校 王媛媛 冉丕鑫 刘志刚关键词:空气净化器 免疫反应性 空间结构 粉尘螨过敏原Der f 13基因克隆表达与免疫原性鉴定 被引量:1 2016年 目的克隆表达粉尘螨过敏原Der f 13,并鉴定其免疫原性。方法提取粉尘螨总RNA,通过RT-PCR获得Der f 13的cDNA片段。根据已知Der f 13序列设计出表达引物,再通过已获得的cDNA和引物进行PCR扩增,将扩增产物连接到T载体上并转入克隆菌Top 10中,涂板、培养,挑选阳性菌落,LB/AMP培养送测序。将测序正确的基因转入表达载体PET32中,经酶切鉴定测序再转入表达菌BL21中,表达Derf 13蛋白,纯化、鉴定所得蛋白,并通过Western-blot等方法检测其免疫学活性。结果 RT-PCR结果显示,Der f 13基因片段大小为410 bp;同源性分析表明:本实验所克隆的Der f 13基因与NCBI数据库的Der f 13基因的同源性为95%;SDS-PAGE结果显示,重组质粒PET32-Der f 13在BL21(DE3)中高效表达,重组蛋白分子质量为35 ku,表达后的重组蛋白主要以可溶性蛋白形式存在,经与尘螨过敏患者血清反应,检测出重组蛋白有较强免疫学活性。结论克隆出Der f 13基因,表达和纯化出目的蛋白,并具有免疫原性,为过敏性疾病的诊断和免疫治疗奠定理论基础。 王媛媛 林建立 黄娜娜 巴金戈 刘志刚 刘晓宇关键词:粉尘螨 蛋白表达 纯化 免疫原性 空气净化器降低室内尘螨过敏原含量及其免疫反应性的实验研究 被引量:11 2013年 目的检测开启空气净化器前后室内空气中粉尘螨主要过敏原的含量,探讨粉尘螨经空气净化器不同作用时间后对其抗原免疫反应性的影响。方法实验分组采样:(1)不开空调和空气净化器;(2)开空调、不开空气净化器;(3)同时开空调和空气净化器;(4)开空气净化器、不开空调。用粉尘采样器分别采集室内空气中尘螨过敏原Der f1和Der f2,运用ELISA方法检测4种环境条件下空气中Der f1、Der f2的含量;通过ELISA和免疫印迹方法检测空气净化器作用不同时间(24h、48h和72h)后粉尘螨过敏原免疫反应性的变化。结果 20个取样房间在开空调之后室内尘螨过敏原的含量都会增高,而在使用空气净化器后,不管是在空调开启或者关闭的情况下室内空气中Der f1和Der f2都会降低(P<0.01);粉尘螨在空气净化器等离子和静电高压场强作用下,死亡的粉尘螨其免疫反应性均较活螨显著降低(P<0.01),免疫组化显示其免疫反应性有所降低。结论本实验使用空气净化器能够显著降低室内空气中的尘螨过敏原Der f1、Der f2的浓度,并且通过空气净化器作用后,死亡的粉尘螨免疫反应性显著降低,提示使用空气净化器对过敏性疾病(如哮喘和过敏性鼻炎)具有重要的预防和干预作用。 马忠校 刘晓宇 杨小猛 王媛媛 吴莹莹 刘志刚关键词:粉尘螨 空气净化器 免疫反应性