牛铭山
- 作品数：22 被引量：19H指数：3
- 供职机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- Tautomycetin对乳腺癌细胞增殖的抑制作用及机制
- Tautomycetin (TMC)最初是从土壤链霉菌中分离得到的具有抗真菌活性的聚酮化合物。近几年又发现,TMC是蛋白磷酸酶PP1特异性抑制剂,具有免疫抑制活性,并且可以特异性抑制结肠癌细胞生长。但是,TMC抑制肿瘤细...
- 牛铭山
- 关键词：磷酸酶抑制剂AKT抗肿瘤活性
- 文献传递
- 嘧啶胺类化合物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用
- 一种嘧啶胺类化合物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用，其中所述的嘧啶胺类化合物具备通式I的结构：<Image file="DDA00001652439800011.GIF" he="168" imgContent="und...
- 杨永亮牛铭山
- 文献传递
- 土木香内酯对RPMI-8226细胞的增殖抑制作用及其相关机制研究被引量：8
- 2015年
- 目的:探讨土木香内酯(alantolactone)对多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:使用浓度为1、2.5、5、7.5及10μmol/L的土木香内酯处理RPMI-8226细胞48 h,应用CCK-8检测细胞活力,并计算其半数抑制浓度(IC50)值;使用浓度为2.5,5及7.5μmol/L的土木香内酯处理RPMI-8226细胞48 h后,应用AnnexinV/PI双标记法分析细胞凋亡;Western blot方法检测呈切割的caspase-3及ERK信号通路的变化;裸鼠荷瘤并给予土木香内酯以进一步验证其对多发性骨髓瘤细胞的促凋亡作用。结果:土木香内酯可抑制RPMI-8226细胞活力,并呈现剂量依赖效应(r=-0.9784,P=0.0007);RPMI-8226细胞48 h的IC50为4.32±0.15μmol/L;流式细胞术分析凋亡结果显示,随着土木香内酯浓度的增高,细胞早期凋亡率显著增加(r=0.9601,P<0.05);Western blot结果显示,土木香内酯处理RPMI-8226细胞后,活化了caspase-3,降低ERK磷酸化水平;体内结果显示,给药组小鼠瘤体积明显小于对照组(P<0.05);免疫组织化学检测结果显示,与对照组相比,实验组瘤内细胞核增殖相关抗原Ki67及p-ERK的水平降低。结论:土木香内酯可有效地抑制多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能是通过抑制ERK信号通路的活性,抑制裸鼠皮下多发性骨髓瘤的生长。
- 姚瑶孙月月夏丹丹牛铭山赵恺李振宇曾令宇徐开林
- 关键词：土木香内酯多发性骨髓瘤ERK通路细胞凋亡
- Piperlongumine抑制ABC型弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖的研究
- 目的探讨piperlongumine对ABC型弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖的抑制作用,并分析其可能的作用机制。方法使用不同浓度梯度的piperlongumine处理ABC型DLBCL细胞系,CCK-8法检测对...
- 牛铭山许小宇曾令宇徐开林
- 文献传递
- 舒尼替尼在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用
- 本发明公开舒尼替尼在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。现有技术中用作抗肿瘤药物的舒尼替尼在本发明所公开的技术方案中被用于制备乙酰胆碱酯酶抑制剂，并用作治疗阿尔兹海默氏病的药物。
- 杨永亮牛铭山毛磊
- 文献传递
- Tautom ycetin与Leptom ycin B联用协同抑制乳腺癌细胞增殖的作用及机制
- 2015年
- 目的研究Tautomycetin(TMC)和Leptomycin B(LMB)联用对乳腺癌细胞增殖的协同抑制作用及机制。方法采用MTT、Western blot和免疫荧光等方法检测TMC和LMB对乳腺癌细胞增殖、Bcl-2家族等蛋白的表达与细胞定位等方面的影响。结果 LMB处理24 h后再加TMC对乳腺癌细胞增殖的协同抑制作用最强。与单独用药相比,采用该方式联合用药,TMC和LMB的用量仅为单独用药时的23.8%和17.7%,即可达到相同的半数抑制效应。TMC与LMB联用可促进Bcl-2蛋白表达的下调;并增强对Bad、Akt和FKHR磷酸化的下调作用,促进FKHR的细胞核聚集。结论 TMC与LMB联用对乳腺癌增殖具有显著的协同抑制作用,其机制可能是促进FKHR细胞核定位。
- 刘雪娇韩焱许小宇沈洋灵牛铭山
- 关键词：乳腺癌
- Tautomycetin诱导乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR的凋亡及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的:研究tautomycetin对乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR增殖及凋亡的影响及其机制。方法:MTT法检测tauto-mycetin对MCF-7/ADR细胞增殖的影响,流式细胞术检测MCF-7/ADR细胞的凋亡,Western blotting法检测tautomycetin对MCF-7/ADR细胞caspase相关蛋白、Bcl-2、Cyto-C、P53蛋白表达和Akt磷酸化的影响。结果:Tautomycetin可剂量(0.01～100μmol/L)依赖性地抑制MCF-7/ADR细胞的增殖(P<0.05),IC50值为(1.26±0.12)μmol/L;与对照组相比,tautomycetin(1μmol/L)可诱导MCF-7/ADR细胞凋亡,早期凋亡比例由(0.67±0.18)%升高至(17.2±3.8)%,晚期凋亡比例由(0.96±0.23)%升高至(28.4±5.7)%(P<0.05)。Tautomycetin可活化MCF-7/ADR细胞中caspase-7和caspase-9,降低Bcl-2蛋白的表达,促进线粒体释放Cyto-C,降低p-Akt的水平,但对caspase-8和P53的表达没有影响。结论:Tautomycetin可阻断Akt活化,以P53非依赖的方式通过Cyto-C介导的通路诱导MCF-7/ADR细胞凋亡。
- 牛铭山孙岩唐莉邱荣国
- 关键词：乳腺癌增殖凋亡CASPASE细胞色素C
- AATF-Che1超家族基因原核表达及其融合蛋白纯化
- 2014年
- 目的 体外构建抗凋亡转录因子（AATF）-Che1重组蛋白原核表达载体pGEx-4T-1-AATF-Che1,优化pGEX-4T-1-AATF-Che1重组载体原核诱导表达条件,并获得可溶性的纯化谷胱甘肽巯基转移酶（GST）融合蛋白.方法 采用聚合酶链反应（PCR）法从pGEX-4T-1-AATF重组质粒扩增出AATF-Che1基因,将其与原核表达载体pGEX-4T-1双酶切后,回收目的基因片段.通过T4连接酶定向连接AATF-Che1基因和线性化原核表达载体pGEX-4T-1,获得重组蛋白AATF-Che1原核表达质粒pGEX-4T-1-AATF-Che1.将构建正确的表达质粒转化入大肠埃希菌感受态细胞BL21,并采用诱导剂异丙基硫代β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白AATF-Che1的表达.考察不同诱导剂IPTG浓度、诱导时间和诱导温度对重组蛋白表达量及表达方式的影响,从而对诱导条件进行优化.采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶珠对可溶形式的GST融合蛋白进行纯化,并采用Western蛋白免疫印记（WB）法鉴定获得的纯化蛋白.结果 原核表达质粒pGEX-4T-1-AATF-Che1的酶切、PCR鉴定结果及测序结果均正确;IPTG诱导蛋白在约65 kD处出现了1条新的蛋白条带,即AATF-Che1与GST的融合蛋白.不同的诱导时间及不同的IPTG浓度条件下,诱导融合蛋白的量均未见明显变化;37℃诱导时,重组蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中,而16℃诱导时,融合蛋白可溶性地存在于上清液中.最终成功获得AATF-Che1可溶性纯化的融合蛋白,且WB法鉴定其抗原性良好.结论 体外成功构建AATF-Che1基因重组蛋白原核表达载体pGEX-4T-1-AATF-Che1,寻找到优化的重组载体原核诱导表达条件,并获得了大量可溶形式纯化的GST融合蛋白,为进一步研究AATF-Che1超家族基因在肿瘤中的作用奠定了基础.
- 周俊曹江孟凡静冯浩潘秀英吴庆运陈翀牛铭山徐开林
- 关键词：原核表达
- MEK抑制剂AZD8330对多发性骨髓瘤抗肿瘤作用的初步研究被引量：2
- 2014年
- 本研究探讨MEK抑制剂AZD8330对多发性骨髓瘤细胞IM9及NCI-H929细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。使用不同浓度AZD8330处理NCI-H929及IM9细胞48 h,用CCK-8检测细胞活力,并计算出48 h的IC50;分别用5、10及100 nmol/L的AZD8330处理上述两种细胞,然后用PI标记流式细胞术分析细胞周期的变化;Western blot方法检测细胞周期相关蛋白cyclin D及cyclin E;分别用10、100、1000及2000 nmol/L的AZD8330处理骨髓瘤细胞,AnnexinV/7-AAD双标记法分析细胞凋亡,并应用Western blot方法检测凋亡相关蛋白caspase-3。结果表明,AZD8330可显著抑制NCI-H929及IM9的细胞活力,且抑制效应呈一定的时间和剂量依赖性,IM9细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为19.88±2.7 nmol/L,NCI-H929细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为29.3±2.03 nmol/L。细胞周期结果显示,两种骨髓瘤细胞均发生G1期阻滞;AZD8330处理后cyclin D水平显著增高,但是cyclin E水平降低,促使细胞发生G1期阻滞。AnnexinV/7-AAD结果显示,随着AZD8330浓度增加,细胞凋亡数量也相应增多,并且活化的caspase-3蛋白水平增高。结论:MEK抑制剂AZD8330可有效抑制骨髓瘤细胞NCI-H929和IM9的增殖,使细胞周期阻滞于G1期,并促进细胞发生凋亡。
- 姚瑶边月平夏丹丹潘彬牛铭山赵恺曾令宇徐开林
- 关键词：MEK抑制剂多发性骨髓瘤细胞凋亡细胞周期
- 嘧啶胺类化合物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用
- 一种嘧啶胺类化合物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用，其中所述的嘧啶胺类化合物具备通式I的结构：<Image file="DDA00001652439800011.GIF" he="168" imgContent="und...
- 杨永亮牛铭山
- 文献传递
