熊浩
- 作品数：9 被引量：16H指数：2
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 山羊原始生殖细胞分离与培养的影响因素被引量：1
- 2010年
- 以本地白山羊胎儿的生殖嵴为试验材料,从原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)中分离培养得到胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EGCs),对其进行体外培养和鉴定等。胎儿生殖嵴在室温(25℃)下消化15 min,使用0.125%胰酶+0.02%EDTA比0.25%胰酶+0.04%EDTA效果好,差异显著(P<0.05);"挑取集落法"和"胰酶消化法"均能将PGCs传至第2代,两种方法差异不显著(P>0.05);以GEF为饲养层,在培养液中添加不同浓度和种类的细胞因子:①LIF:10 ng/mL;②LIF:20 ng/mL;③LIF(10 ng/mL)+SCF(10 ng/mL);④LIF(20 ng/mL)+SCF(20 ng/mL)。4种情况对于原代集落形成率的影响差异不显著(P>0.05),均能得到传至第2代的EGCs;研究不同胎龄胎儿分离培养PGCs的效果,结果发现4例冠臀长小于15 mm的胎儿仅观察到一个原代集落,6例大于30 mm的胎儿没有观察到原代集落。
- 熊浩崔雯王杏龙刘翔
- 关键词：白山羊胚胎干细胞原始生殖细胞
- ^(15)N标记法研究不同精粗比底物对山羊瘤胃内原虫与细菌间蛋白质微循环的影响被引量：2
- 2010年
- 以4头安装永久瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,运用15N稳定性同位素示踪技术,研究了1∶9(A)、3∶7(B)、5∶5(C)、7∶3(D)四种精粗比底物下瘤胃原虫与细菌间蛋白质微循环的影响。结果表明:不同精粗比底物显著影响瘤胃内原虫的吞噬量及微生物蛋白(MCP)的微循环,A、B、C、D四组吞噬N量分别为:18.11×105、21.16×105、20.95×105、30.34×105pg/(mL·h)。每天每头山羊由于原虫的吞噬造成的细菌蛋白循环量分别为:1.09、1.27、1.26、1.82g,其中以C组循环率最大(2.79%),D组蛋白质循环量最高,而B组循环率最低(1.94%),且蛋白质周转量仅为D组的69.78%,可有效减少菌体蛋白循环量。
- 刘翔张红伟董淑红王洪荣熊浩
- 关键词：原虫
- ICR小鼠胚胎干细胞的分离与培养被引量：2
- 2011年
- 为了研究不同条件对ICR小鼠ES细胞的影响，试验以12．5～13．5dICR小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）为饲养层，以3．5dICR小鼠胚胎为试验材料，探讨了血清、生长因子及传代方法对ICR小鼠Es细胞分离培养的影响。结果表明：采用含15％FBS的Es细胞培养液的囊胚贴壁率及ICM增殖率（79．3％，69．0％）均比含15％KSR、5％FBS＋10％KSR的细胞培养液高（42．9％，28．6％；75．0％，54．2％），Es细胞最高传至6代；培养液中添加10．g／m LLIF＋10ng／mLSCF的效果比单独添加1种因子的效果好，最高传至6代，高于单独添加1种因子的传代数（4代，2代）；用3种传代方法进行传代时，采用差异贴壁法传代效果最佳，最高传至8代，酶消化法传至4代，机械加酶消化法传至6代。
- 崔雯熊浩王杏龙
- 关键词：ICR小鼠胚胎干细胞
- 小鼠胚胎成纤维细胞饲养层制备条件的研究被引量：1
- 2009年
- 为了建立活力稳定的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,本实验以13.5～14.5d的ICR小鼠胚胎为实验材料,以MTT法测定细胞活力,探讨了不同浓度的丝裂霉素C、丝裂霉素C不同处理时间及不同的成纤维细胞接种密度对MEF活力的影响。结果表明:10μg/ml的丝裂霉素C处理后的MEF活力比其他浓度(1μg/ml、5μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)丝裂霉素C处理后的MEF活力稳定;用10μg/ml的丝裂霉素C处理2.5h,MEF活力比处理1.5h、3.5h、4.5h稳定;以2.5～3.5×105/ml密度接种于96孔板上,每孔200μl,MEF活力较接种密度为1.5×105/ml、4.5×105/ml、7.5×105/ml稳定。结论:用10μg/ml丝裂霉素C处理MEF2.5h,2.5～3.5×105/ml密度接种于96孔板上,每孔200μl,以10%的胎牛血清培养液培养能得到活力稳定高效的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。
- 崔雯熊浩王杏龙
- 关键词：胚胎成纤维细胞饲养层丝裂霉素C小鼠
- 奶牛妊娠早期血浆孕酮的变化规律被引量：6
- 2009年
- 吕莲贾国慧王亮熊浩王杏龙
- 关键词：血浆孕酮奶牛生产妊娠早期繁殖状态妊娠诊断
- 饲养层和生长因子对山羊类胚胎干细胞的影响被引量：3
- 2011年
- 实验以6-8 d的山羊囊胚为实验材料,采用机械法分离山羊囊胚ICM,分别以小鼠和山羊胚胎成纤维细胞作饲养层,并采用含不同生长因子的培养液进行培养,比较了饲养层和生长因子对分离培养山羊类ES细胞的影响。结果表明：采用MEF饲养层其ICM增殖率优于GEF饲养层;与对照组相比,培养液中添加LIF及SCF或胰岛素对山羊ICM的贴壁增殖及传代都有积极影响;以MEF为饲养层,培养液中同时添加LIF和SCF时,培养山羊类ES细胞的效果最佳,传至3代。
- 崔雯熊浩王杏龙
- 关键词：胚胎干细胞饲养层山羊
- 不同剂量和组合的促性腺激素对小鼠胎儿数的影响
- 2009年
- 熊浩崔雯王杏龙
- 关键词：促性腺激素实验动物自然发情营养水平
- 胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展被引量：1
- 2010年
- 胚胎干细胞(Embryonic stemcells,ES细胞)是从附植前胚胎的内细胞团(ICM)或附植后胎儿的原始生殖细胞(PGCs)经体外抑制分化培养、分离和克隆得到的具有发育全能性的细胞。ES细胞体外诱导分化的研究自从20世纪90年代开始到现在,一直是生命科学和医药工程领域的研究热点,并且近年来这方面的研究也取得了一些突破性的进展。本文简述了胚胎干细胞的诱导原理、方法和定向分化的一些细胞种类以及目前研究存在的问题和困难。
- 熊浩崔雯
- 关键词：胚胎干细胞分化
- 影响制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的因素被引量：1
- 2010年
- 为了建立活力稳定高效的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层，实验以13．5—14．5d的IcR小鼠胚胎为实验材料，以MTr法测定细胞活力，探讨了用丝裂霉素c处理MEF后，含有不同浓度胎牛血清的培养基对MEF活力的影响，以及不同传代次数的MEF对其活力的影响。结果表明：用含10％的胎牛血清培养液培养丝裂霉素c处理后的MEF，其活力比含2％、5％、20％的FBS培养液稳定。对不同传代次数的MEF进行处理后，第1、3代的MEF活力比第5、7代的MEF活力稳定。结论：用丝裂霉素c处理第1到第3代的MEF，以10％的胎牛血清培养液培养能得到活力稳定高效的小鼠胎儿成纤维细胞饲养层。
- 崔雯熊浩王杏龙
- 关键词：胎儿成纤维细胞饲养层胎牛血清小鼠
