段彪
- 作品数：14 被引量：38H指数：4
- 供职机构：内蒙古大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 转fat-1基因克隆绵羊的制备及其启动子区的甲基化分析
- 以转基因技术和体细胞核移植相结合的方法制备转基因动物是目前生产转基因家畜的主要技术手段。针对与肉质改良相关的基因，我们分别构建了CMV和CAG启动子驱动的n-3多不饱和脂肪酸去饱和酶基因表达载体，并转染到绵羊胎儿成纤维细...
- 段彪
- 关键词：克隆绵羊启动子区域甲基化分析
- 牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估被引量：4
- 2012年
- 采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimumLinn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平。以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性。根据GeNorm、NormFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序。结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11>EEF1A2>18S rRNA>RPS15A>GAPDH>HMBS>UXT>ACTB>SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因。稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础。
- 王子东苏建国段彪杨春荣高广琦康峰张荣芳胡晓明扈廷茂李光鹏
- 关键词：实时荧光定量RT-PCR转基因细胞内参基因GENORMNORMFINDER
- EGFP转基因小鼠来源杂种ES细胞的分离与鉴定
- 本研究从EGFP转基因雄鼠和昆明雌鼠来源的杂种囊胚中成功分离出胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESCs)，并进行了形态学观察、核型分析、碱性磷酸酶染色、OCG4染色和SSEA-1染色、类胚体和畸胎瘤...
- 段彪
- 关键词：胚胎干细胞丝裂霉素嵌合体流式细胞ES细胞分化能力
- 文献传递
- EGFP小鼠ES细胞来源的生殖系嵌合小鼠的获得和鉴定被引量：1
- 2007年
- 生殖系嵌合体的获得是实现ES细胞介导的转基因途径的决定步骤,而嵌合体的制作及生殖系嵌合体的获得则是判定ES细胞系是否具有配子分化能力的有效方法。利用一株表达绿色荧光蛋白的杂种ES细胞系制备出嵌合体小鼠,共获得9只表达绿色荧光蛋白的嵌合体小鼠,其中有8只雄性, 1只雌性,目前均发育成健康成年小鼠。流式细胞检测显示了绿色荧光蛋白在嵌合鼠以下器官的表达情况:心(77.96±15.78) %、脾(84.06±3.60) %、肾(42.49±19.79) %、骨髓(52.02±18.78) %。昆明雌鼠与雄性嵌合鼠杂交1代(F1)毛色表型分析显示该株ES细胞具有生殖系嵌合能力。
- 段彪邵华魏著英王凤武旭日干
- 关键词：嵌合体生殖系
- 脱氧胆酸处理对大鼠肌肉卫星细胞的影响被引量：1
- 2010年
- 肌肉卫星细胞是组织特异性干细胞,负责骨骼肌的生长和再生。尽管卫星细胞的发现已有50多年的历史,但肌肉卫星细胞的维持培养仍是一个难以解决的问题。本研究使用脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)处理肌肉卫星细胞,结果发现,50μmol/L脱氧胆酸能显著促进肌肉卫星细胞的增殖。Western blotting检测发现50μmol/L DCA能促进细胞内β-catenin表达水平的持续增加。处理6 d后的细胞仍然保持着肌肉卫星细胞的成肌能力。
- 焦泽华段彪白春玲魏著英李光鹏
- 关键词：卫星细胞
- 内蒙古白绒山羊的体细胞克隆被引量：4
- 2011年
- 内蒙古白绒山羊是具有悠久历史的绒肉兼用的品种,对荒漠和半荒漠环境有较强的适应性.山羊绒是来自绒山羊的细绒毛,具有极高的商业价值.为了扩大优秀绒山羊数量,本试验尝试利用体细胞克隆技术进行绒山羊克隆研究.从一只成年优秀公绒山羊中,取其耳缘组织,培养获得成纤维细胞.从当地屠宰场获得山羊卵巢,抽取卵母细胞并体外培养成熟.然后以绒山羊成纤维细胞为核供体,通过体细胞克隆技术生产克隆胚胎.核移植重构胚的融合率、卵裂率和囊胚发育率分别为75.8%,72.6%和11.6%.将处于1-至2-细胞期的胚胎移植入同期发情受体母山羊输卵管中,于2009年4月30日诞生了一只克隆绒山羊.该克隆羊的生长状态及产绒量与细胞核供体山羊相一致,呈现良好的发育态势,说明体细胞克隆技术可以成为良种绒山羊的扩繁途径.
- 白春玲张立吴侠焦泽华雪莲魏著英程磊段彪康峰王建国旭日干李光鹏
- 关键词：体细胞克隆绒山羊胚胎移植卵母细胞
- 克隆绵羊遇到的问题及其分析被引量：3
- 2011年
- 本研究以体外成熟不同时间的绵羊卵母细胞为胞质受体,对去核、融合、不同激活方法、卵裂率、桑/囊胚率和克隆胚受胎率等作了研究与分析.观察妊娠受体母羊的状态、胎儿体内发育情况,分析影响胎儿发育的原因.结果显示,成熟培养18h、22h、24h卵母细胞的盲吸去核率无显著性差异(84.9%,86.6%,84.3%,p>0.05),但显著高于26h组的去核率(71.7%).离子酶素联合cycloheximide(CHX)对重构胚进行激活,卵裂率显著高于A23187联合6-DMAP的激活方法(84.6%vs 63.2%,p<0.05),但二者处理对桑/囊胚率发育无显著差异(25.5%vs18.7%,p>0.05).作为胞质受体,成熟20h的卵母细胞与成熟24h和26h的卵母细胞相比,不利于重构胚的体外发育,桑/囊胚率差异显著(12.3%vs 25.3%,23.4%,p<0.05).分别以美丽奴、杜泊肉羊的体细胞为供体细胞进行克隆生产,90天以后的妊娠率为10%-17%,发育到期率为10%以上.出生羔羊的体重普遍较大.
- 雪莲程磊张立白春玲吴侠董树华魏著英苏广华焦泽华段彪康峰银凤霞李俊龙李光鹏
- 关键词：细胞核移植胚胎体外发育体内发育
- 藏羚羊成纤维细胞系的建立及其核型分析被引量：2
- 2012年
- 藏羚羊(Pantholops hodgsonii)是我国特有的国家Ⅰ级重点保护野生动物,生存在高海拔低氧环境下,具有高原生物的细胞遗传特性。实验采用组织块贴壁培养法进行原代培养,后经差异贴壁法联合消化排除法纯化,成功构建了藏羚羊成纤维细胞系,并对培养不同代次细胞的形态、生长动力学、染色体核型等进行了研究。结果表明,培养得到的藏羚羊细胞为典型的成纤维细胞,第7、10、15代细胞群体倍增时间分别为26、48、50 h。细胞的生长均为"S"型。染色体中二倍体染色体(2n=60)占主体,所占比例为65%～91%,包括性染色体X、Y在内均为端着丝粒类型,染色体组的总相对长度为193.45,平均相对长度为3.22,未发现随体、次缢痕等特殊标志性特征。
- 刘坤苏广华段彪魏著英吴侠李光鹏
- 关键词：藏羚羊染色体核型
- ω-3转基因克隆绵羊诞生被引量：6
- 2011年
- 我们构建了含有bfat-1表达载体pIE-bF1,通过脂质体介导转染获得转基因细胞系,再以核移植技术获得转基因克隆胚胎。胚胎移植后,于2010年10月27日出生两只克隆羊。经检测均为转ω-3基因克隆绵羊。
- 段彪程磊苏广华刘欣胡晓明刘坤李俊龙李光鹏
- 关键词：克隆绵羊脂质体介导核移植技术克隆胚胎胚胎移植
- 国产丝裂霉素在胚胎干细胞饲养层制备中的应用被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨不同浓度的国产丝裂霉素在不同的作用时间下对小鼠胚胎成纤维细胞体外生长的影响,为国产药品在 ES细胞研究中的应用提供试验依据。方法:采用 MTT 法测定小鼠胚胎成纤维细胞的生长曲线。结果:当丝裂霉素浓度为20μg·mL^(-1)作用4 h 或30μg·mL^(-1)作用2 h、4 h,均可有效抑制细胞的分裂而不影响细胞活力。结论:海正药业生产的丝裂霉素,不仅满足胚胎干细胞饲养层制备的要求,而且价格低廉,大大降低了实验成本。
- 王玲玲邵华茫烈段彪王建国旭日干
- 关键词：成纤维细胞胚胎干细胞MTT法
