梅国勇
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 定位表达于溶酶体、泛素的PrP载体的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建定位于溶酶体、泛素的PrP表达载体，并进行蛋白表达特点及定位的鉴定。方法将泛素基因、溶酶体膜定位信号序列基因和PrP基因连接，克隆至pcDNA3．1载体中，构建表达载体pcDNA3．1-UPrP,pcDNA3．1-PrPL；瞬时转染真核表达细胞，经Western Blot和间接免疫荧光技术检测PrP表达特点。结果构建的各种PrP定位表达载体均可定位表达具有三种类型的糖基化分子的PrP，以双糖基化分子类型最多。带有泛素、溶酶体信号的质粒pcDNA3．1-UPrP、pcDNA3．1-PrPL的PrP表达随着时间的延长蛋白表达量下降，提示泛素、溶酶体信号能加速表达PrP在细胞内的降解。结论成功构建了溶酶体、泛素定位表达的PRNP核酸疫苗载体pcDNA3．1-uPrP、pcDNA3．1-PrPL，为PRNP核酸疫苗的研究奠定了一定的基础。
- 李媛梅国勇姜慧英王桂荣田婵陈操王新王克霞韩俊董小平
- 关键词：朊病毒疫苗DNA
- 山东省青岛市5种蜱携带的优势微生物种群鉴定分析被引量：2
- 2023年
- 目的分析山东省青岛市蜱携带的优势微生物种群差异,构建蜱微生物资源库。方法收集2019年山东省青岛市野生刺猬携带的蜱,通过形态学和16S核糖体RNA测序对蜱进行分类,随后构建RNA文库,并使用Illumina NovaSeq6000进行PE2×150测序。对测序下机数据进行宏基因组分析和微生物分类学分析,并对大别班达病毒开展遗传进化分析。结果经鉴定收集的蜱分别为褐黄血蜱(n=155)、血红扇头蜱(n=62)、中华革蜱(n=67)、长角血蜱(n=77)和铃头血蜱(n=59)。不同蜱的细菌丰度差异性大,从样本中共鉴定出6门19目35科101种细菌。褐黄血蜱和铃头血蜱中相对丰度最高的细菌为微球菌,丰度分别为37.9%和71.5%;血红扇头蜱、中华革蜱和长角血蜱中相对丰度最高的细菌均为假单胞菌,丰度分别为51.9%、49.6%和34.8%。褐黄血蜱、中华革蜱和铃头血蜱病毒种群的丰度为0.28%~2.82%,血红扇头蜱病毒种群丰度为22.98%,长角血蜱病毒种群丰度为59.31%。永嘉蜱病毒和大别山蜱病毒在5种蜱中均检出,其相对丰度分别为12.0%~51.4%和2.4%~12.2%;Nickie病毒、湖北蜱病毒3、温州蜱病毒3和黄陂蜱病毒1仅在褐黄血蜱中检出,湖北蜱样病毒15和大别班达病毒只在长角血蜱中检出。其中大别班达病毒序列的L、M和S片段均属于C2谱系,并与从山东省大别班达病毒感染患者的血清中分离的毒株(KR 706567.1、KR 706566.1)一致性最高,S片段与从山东省莱州市大别班达病毒感染患者的血清中分离的毒株(JQ693006.1)一致性最高。结论山东省青岛市不同蜱携带的微生物谱具有明显差异,研究结果对于构建山东省青岛市蜱微生物资源库和实施蜱传疾病的控制策略提供数据支撑。
- 胡耕姜法春董礼艳梅国勇杜海军韩俊
- 关键词：高通量测序宏基因组分类学
- 病毒学实验室的溢洒现象研究
- 2009年
- 目的研究病毒实验室的实验操作过程中的溢洒现象和病毒液液体跌落后的溅洒范围。方法利用表达绿色荧光蛋白（GFP）的重组腺病毒rADV为模式病毒，通过两组不同工作经验的实验室人员模拟实验室中的常规吸液、移液等操作，通过观察病毒液跌落至96孔细胞培养板是否出现绿色荧光信号来确定实验操作的溢洒情况；我们也将实验常规使用的病毒液量（1ml、1.5ml、4ml、8m1）从实验室可能的两种跌落高度（75cm、110cm）模拟不慎跌落后可能的溅洒范围。结果（1）两组人员使用机械移液装置均未出现溢洒现象；（2）第1组具有5年以上工作经验的实验室人员使用吸管移液等操作，出现因溢洒而导致7孔阳性信号，而2年以内工作经验的第二组人员，在实验操作过程中出现了81孔阳性信号，远大于第1组人员；（3）在两种滴落高度的情况下，1ml、1.5m1、4ml和8ml液体跌落溅撒范围最大半径分别为0.92、1.57、2.63和2.68m。结论生物安全实验室的移液操作过程中实验室人员工作经验非常重要；病毒液不慎跌落的溅撒范围与液体量有关。
- 李媛梅国勇姜慧英王桂荣魏强韩露王雷田婵韩卫芳武桂珍王克霞韩俊
- 关键词：安全管理病毒
- 两种模式病毒灭活风险实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究模式病毒在环境中的存活能力，以及常用消毒液和紫外线对病毒的灭活能力。方法利用表达绿色荧光蛋白（GFP）的重组腺病毒rADV和重组单纯疱疹病毒rHSV作为模式病毒，将滴有病毒的NC膜于室温下、浸于不同稀释度的各消毒液（乙醇、次氯酸钠、来苏尔、新洁尔灭）中，分别于15、30、45、60、75、90、105min，或紫外线连续照射20、40、60、80、100min后，放入细胞表面培养48h，于荧光显微镜下观察。结果（1）rHSV在环境中的平均存活时间不足60min，rAd病毒均高于105min；（2）100％、70％、50％的乙醇，以及5％、2．5％和1．25％次氯酸钠均可灭活两种病毒；（3）0．1％的新洁尔灭15min可灭活rHSV和rADV；0．01％新洁尔灭作用45min可灭活rHSV病毒；0．05％新洁尔灭中作用75min可灭活rADV病毒；而0．01％新洁尔灭则无灭活作用；（4）5％和2．5％的来苏尔可灭活两种病毒；但1．25％来苏尔灭活rADV病毒需75min；（5）紫外线照射大于20min可有效灭活rHSV，但对rADV无灭活作用。结论无包膜病毒与有包膜病毒在环境中的生存能力是不同的；两种模式病毒对各消毒液的抵抗能力也不尽相同，应根据病毒的特点选择不同的灭活方式。
- 李媛梅国勇姜慧英王桂荣田婵韩露韩卫芳魏强周永运武桂珍王克霞韩俊
- 关键词：生物安全消毒剂灭活
- 人tau蛋白外显子2和外显子3特异性抗体的制备
- 2009年
- 目的制备人微管相关蛋白tauN端的外显子2和外显子3特异性多克隆抗体。方法从人外周血DNA中获得tau蛋白外显子2及外显子3序列并连接至原核表达载体pGEX-2T，表达纯化重组融合蛋白GST—E2、GST-E3；以此融合蛋白免疫家兔及小鼠制备抗血清，通过ProteinG／A、偶联GST蛋白的溴化氰（CNBr）活化柱对抗血清进行亲和纯化；用WesternBlot及ELISA方法确定所制备抗体的特异性和敏感性。结果在大肠埃希菌中表达纯化出人tau外显子2和外显子3重组融合蛋白GST-E2和GST-E3，相对分子质量为29×10^3。免疫实验动物后获得抗血清，经系列纯化后WesternBlot和ELISA检测显示，制备的抗人tau蛋白外显子2和外显子3抗体具有良好的特异性和免疫反应效价。结论成功制备了4种人tau外显子2和外显子3特异性抗体，为进行tau蛋白在神经退行性疾病中的作用研究提供了基础。
- 陈操王桂荣石琦张宝云梅国勇李媛王新周瑞敏韩俊赵玉军董小平
- 关键词：蛋白质类外显子抗体病毒朊病毒病
- 朊蛋白与信号蛋白14-3-3β相互作用的研究
- 目的：朊病毒病（prion disease）是一类罕见的致死性神经系统退行性疾病。其致病因子朊病毒是一种可以自我复制的蛋白，其毒性区域在第106-126位氨基酸，主要存在于脑神经细胞中;14-3-3β蛋白是哺乳动物体内普...
- 梅国勇
- 关键词：朊病毒病神经系统退行性疾病信号蛋白克雅氏病
- 文献传递
- 慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的腺病毒感染及基因特征分析被引量：7
- 2022年
- 目的了解慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者的呼吸道病毒感染情况及腺病毒感染特点。方法收集2020年11月至2021年4月安徽省蚌埠市某三甲医院AECOPD住院重症患者咽拭子,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法筛查16种常见呼吸道病毒,对腺病毒(ADV)阳性样本扩增腺病毒六邻体基因,构建进化树。结果AECOPD患者呼吸道样本中呼吸道病毒检出率为38.38%(109/284),其中,ADV检出率最高,为27.81%(79/284)。重症患者ADV感染以C1型为主,同时,有B、C和D等多个亚型存在。结合临床数据,AECOPD患者中,感染ADV的较未感染ADV的病程长、预后差。结论临床应对AECOPD患者的呼吸道病毒感染情况进行有效监测,以提高诊断和治疗效果。
- 陈平徐源佑杨燕清杜海军梅国勇夏志强董鸿铭韩俊陆国玉
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重呼吸道病毒感染腺病毒
- 朊蛋白与信号蛋白14-3-3β的相互作用研究被引量：3
- 2009年
- 为进一步确定PrP蛋白与14-3-3蛋白是否发生分子间的相互作用并确定PrP蛋白与14-3-3蛋白相互作用的区域,利用免疫共沉淀、pull down和能量共振转移(FRET)实验检测PrP蛋白与人14-3-3蛋白是否发生分子间的相互作用及相互作用的部位。结果证明,PrP蛋白与人14-3-3蛋白在体外、组织水平及细胞水平均可以发生相互作用,且证实作用的部位在PrP蛋白的106-126位氨基酸。该结果为进一步研究14-3-3蛋白在Prion疾病中的影响及Prion疾病的发病机制奠定了一定基础。
- 梅国勇李媛王桂荣张宝云田婵陈操周瑞敏王新李晓丽王克霞韩俊董小平
- 关键词：PRP相互作用
- 青岛2020年冬季上呼吸道感染患者中人鼻病毒的分子流行病学特征被引量：10
- 2022年
- 目的:了解2020年冬季青岛地区上呼吸道感染患者的人鼻病毒(human rhinovirus,HRV)流行状况和基因分型特征。方法:采集青岛地区101例上呼吸道感染患者的咽拭子样本,提取核酸,应用荧光定量PCR方法进行15种常见呼吸道病毒的检测。对检测出HRV阳性的样本,应用RT-PCR方法扩增HRV VP4/VP2区并测序,对测序所获得的序列进行系统进化树和同源性分析。结果:101例上呼吸道感染患者样本中,涉及6种常见病毒。检出1种病毒感染的样本34例(34/101,33.66%),检出混合病毒感染的样本2例(2/101,1.98%)。其中HRV的检出率最高,为21.78%(22/101)。扩增出20条HRV VP4/VP2区序列,分别为HRV-A组16株和HRV-C组4株,共涉及14种血清型。结论:鼻病毒是2020年冬季青岛地区上呼吸道感染患者主要的病毒性病原之一,且以A组HRV感染为主。
- 万以秋蔡茹姜法春宗可鑫王瑞芳史冰田宋娟贾静夏冬王衍海梅国勇韩俊
- 关键词：上呼吸道感染系统进化树
- 2020年冬季青岛肺炎患儿人鼻病毒毒株的分离与鉴定被引量：3
- 2022年
- 目的青岛地区2020年儿童肺炎住院患者人鼻病毒(human rhinovims,HRV)的分离与鉴定,为儿童肺炎的预防提供科学数据。方法收集2020年儿童肺炎住院患者的咽拭子样本,共计98份。应用荧光定量RT-PCR方法进行常见呼吸道病毒筛查,鉴定出HRV阳性的样本接种于H1-HeLa细胞,观察细胞病变。荧光定量RT-PCR鉴定后,扩增HRV-VP4/VP2基因并测序,使用MEGA软件构建系统进化树和同源性分析。结果98例肺炎住院患儿咽拭子样本中HRV阳性11例。接种H1-HeLa细胞,两份样本出现典型的细胞病变。经荧光定量RT-PCR鉴定为HRV病毒。VP4/VP2基因测序结果显示,分离的2株毒株的血清型分别为HRV-A28和HRV-A58。HRV-A28分离株与2011年新加坡参考株、2017年突尼斯参考株和2017年肯尼亚的参考株遗传距离较近,同属一个小分支。HRV-A58分离株与2009澳大利亚、2011年委内瑞拉、2011蒙古和2014年的美国的参考株的遗传距离较近,同属一个小分支。结论本研究首次在青岛地区的儿童肺炎患者咽拭子中分离出HRV-A28和HRV-A58毒株。
- 万以秋姜法春宋娟贾静王霞王衍海梅国勇蔡茹韩俊
- 关键词：病毒分离系统进化分析
