杨笛
- 作品数：122 被引量：542H指数：11
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校高新技术产业发展项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 心肌肌钙蛋白I磷酸化及降解与肥厚型心肌病
- 2006年
- 目的:观察心肌肌钙蛋白I在肥厚型心肌病小鼠心肌组织中的磷酸化与降解作用。方法:实验于2005-03/2006-01在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所及南京医科大学动物中心SPF级动物房进行。取4周龄BALB/c雌鼠12只,随机分为模型组6只,正常对照组6只,适应性饲养1周后模型组小鼠转染带有EGFP报告基因的CTnIArg146Trp突变基因。饲养至20周龄时二维超声心动图检测证实模型组小鼠室间隔肥厚,断颈处死两组小鼠后,称取小鼠心脏质量(湿),心尖部心肌组织光镜病理学检查,小鼠心肌组织进行WesternBlotting检测重组蛋白、肌钙蛋白I的磷酸化及降解表达,GAPDH作为内参半定量。结果:12只小鼠进入结果分析。①模型组小鼠心脏明显增大,心脏质量(湿)/体质量比显著高于正常对照组(P<0.01);模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱、间质血管增生、少量炎性细胞浸润;两组血清肌钙蛋白I水平均正常(P>0.05)。②模型组小鼠心肌组织用抗EGFP单克隆抗体在Mr55000,24000检测到突变CTnI-EGFP及其降解片断表达。③模型组在Mr55000,30000,28000分别检测到磷酸化突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000见磷酸化肌钙蛋白I表达,模型组内源性磷酸化肌钙蛋白I表达明显高于对照组(1.18±0.15,0.97±0.15,P<0.05)。④去磷酸化抗肌钙蛋白I单克隆抗体在Mr55000,28000,检测到去磷酸化突变肌钙蛋白I-EGFP、内源性肌钙蛋白I降解片断表达,正常对照组未见去磷酸化肌钙蛋白I表达;用针对不同位点的抗肌钙蛋白I单克隆抗体3E3,2I-14,8I-7,MF4分别在Mr55000,30000,28000检测到突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000,见肌钙蛋白I表达,未见降解片断。结论:AdcCTnIArg146Trp-EGFP突变基因在小鼠体内成功转染心肌组织并有明显表达及降解片断出现,小鼠心脏呈现明显室间隔肥厚;小鼠内�
- 朱春霞吴恒芳马继政朱舒舒陈相健卞智萍徐晋妉杨笛张寄南
- 关键词：肌钙蛋白I心肌
- 无标记纳米化学发光新一代体外诊断技术及其在急性心肌梗死快速诊断中的应用被引量：1
- 2016年
- 急性心肌梗死是目前世界上最常见的疾病死亡原因,尽管近10年来我国诊疗技术有了明显提高,在急性心肌梗死的诊断和治疗等相关领域,国家投入也逐年加大,但死亡率却居高不下,其主要原因之一是缺乏即时诊断的快速检测技术[1]。针对高发病率和高死亡率急性心肌梗死对快速、灵敏、低成本体外诊断技术的迫切需求,项目开展无标记纳米化学发光新一代体外诊断技术及其在急性心肌梗死快速诊断中的应用研究,发展高敏感性、高特异性的急性心肌梗死快速诊断新方法，将急性心肌梗死确诊时间缩短至发病3h以内。
- 崔华邵元华徐国宝杨笛
- 关键词：急性心肌梗死化学发光体外诊断高特异性高敏感性
- 妊娠相关血浆蛋白-A的纯化与鉴定
- 2007年
- 目的:建立人妊娠血浆相关蛋白A(PAPP-A)的纯化与鉴定方法。方法:利用DEAE-Sephadex CL-6B离子交换和Heparin-sepharose CL-6B亲和层析进行分离纯化,变性SDS-PAGE测定其相对分子质量为200kD,Western blotting鉴定其特异性。结果:获得相对分子质量为200kD的蛋白条带,此条带可与妊娠血浆相关蛋白A单克隆抗体发生特异性反应。结论:成功地从孕妇血清中分离得到妊娠血浆相关蛋白A。
- 顾荣花孙丽洲陈湘健顾春荣卞智萍徐晋丹杨笛张寄南
- 关键词：纯化
- 黄芪甲苷逆转血管紧张素Ⅱ引起的主动脉平滑肌细胞线粒体功能障碍被引量：5
- 2015年
- 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、AngⅡ24 h处理组、48 h对照组、AngⅡ48 h处理组、As-Ⅳ治疗组。24 h对照组和AngⅡ24 h处理组使用线粒体呼吸功能检测仪进行线粒体呼吸功能检测,线粒体ATP含量检测;48 h对照组、AngⅡ48 h处理组和As-Ⅳ治疗组进行线粒体呼吸功能检测、线粒体ATP含量检测、电镜观察线粒体结构变化,共聚焦显微镜检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和Mn-SOD活性检测。结果:AngⅡ24 h处理组与24 h对照组相比,线粒体耗氧率(oxygen consumption rates,OCRs)出现下降,线粒体ATP含量减少(P≤0.05);AngⅡ48 h处理组与48 h对照组相比,线粒体OCRs显著下降,线粒体ATP含量明显减少(P<0.05),线粒体出现嵴模糊、肿胀、空泡,线粒体内ROS水平升高(P<0.05),Mn-SOD活性下降(P≤0.05);As-Ⅳ治疗组较AngⅡ48 h处理组线粒体OCRs和线粒体ATP含量明显回升(P<0.05),线粒体形态结构损伤减轻,线粒体内ROS水平降低(P<0.05),Mn-SOD活性升高(P≤0.05)。结论 :As-Ⅳ可以通过增强线粒体Mn-SOD活性,降低线粒体内ROS水平,进一步减轻线粒体结构损伤并提高线粒体OCRs和ATP含量,从而逆转AngⅡ引起的线粒体功能障碍。
- 路遥徐晋妉卞智萍吴恒芳顾春荣陈相健杨笛
- 关键词：黄芪甲苷线粒体功能障碍活性氧平滑肌细胞
- Documentation of existence of endothelium-derived contracting factor(s) in the aorta of spontaneously hypertensive rat
- 英文文摘
- 杨笛
- 关键词：BIOASSAYCYCLOOXYGENASEENDOPEROXIDES
- C反应蛋白基因多态性C+1444T与UAP相关性研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨中国苏皖地区汉族人群C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)基因C+1444T多态性与不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)的相关性。方法:以142例UAP患者和307例非冠心病者(对照组)作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测CRP基因C+1444T多态性。结果:CC、CT和TT基因型频率在UAP组和对照组的分布无统计学差异(P值分别为0.117、0.061和0.131)。C等位基因频率在UAP组和对照组分别为90.5%和92.86%,2组间差异无统计学意义(P=0.221)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因+1444C/T多态性与UAP的发病无明显相关。
- 何国平沈丹丹戚猛高磊杨进戴健金鸣锋戚传平杨笛张寄南
- 关键词：C反应蛋白基因多态性不稳定性心绞痛
- C反应蛋白基因启动子T-757C多态性与急性心肌梗死的相关性被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨中国苏皖地区汉族人群C反应蛋白(CRP)基因启动子T-757C多态性与急性心肌梗死(AMI)的相关性。方法:以303例AMI患者(AMI组)和282例非冠心病者(对照组)作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测CRP基因T-757C多态性。结果:与对照组相比,AMI组的TC基因型频率明显增高(31.2%∶41.3%,P<0.05),TT和CC基因型以及T等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。在调整冠心病相关危险因素并经多元logistic回归分析显示,CRP基因T-757C多态性TC基因型与AMI的发生仍呈显著性相关(OR=1.650,95%CI:1.031～2.640,P<0.05)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因启动子T-757C多态性与AMI的发病密切相关。
- 何国平戚猛高磊杨进戴健沈丹丹金鸣锋杨笛张寄南
- 关键词：心肌梗死C反应蛋白基因多态性
- 黄芪甲苷改善过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激损伤的研究被引量：11
- 2017年
- 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_2O_2损伤组细胞经H_2O_2(400μmol/L)持续损伤36 h,AS-Ⅳ治疗组细胞经H_2O_2损伤12 h后加入含50μg/m L AS-Ⅳ的培养基继续干预处理24 h。观察AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤及线粒体功能损伤的修复作用。结果:H_2O_2损伤后HAECs丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶活性及线粒体活性氧(ROS)水平显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及线粒体膜电位显著降低;H_2O_2损伤的HAECs经AS-IV治疗后,HAECs的MDA含量、NADPH氧化酶活性及线粒体ROS含量明显降低,SOD和Mn-SOD活性及线粒体膜电位显著增高。结论:AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤具有保护作用,提高线粒体的抗氧化功能是其可能的机制之一。
- 陈宇琼孙东岳吴恒芳卞智萍陈相健杨笛
- 关键词：黄芪甲苷线粒体过氧化氢
- 血小板反应素-1基因G1678A多态性与急性冠脉综合征的相关性研究
- 2007年
- 目的探讨血小板反应素-1 (thrombospondin-1, TSP-1)基因G1678A (Ala523Thr)多态性与中国汉族人群急性冠脉综合征(ACS)的可能关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测412例ACS患者和319例年龄及性别相匹配的非冠心病者的TSP-1 G1678A多态性。结果ACS患者TSP-1 G1678A多态性从基因型频率(49．5％)明显高于对照组(40．4％,P=0．015)。GA和GG基因型在ACS组和对照组分布的差异无统计学意义(GA:39．3％比46．1％,P=0．070;GG:11．2％比13．5％,P=0．340)。A等位基因频率在ACS组和对照组分别为69．2％、63．5％,两组间差异有统计学意义(P=0．022)。多元logistic回归分析显示,TSP-1基因从基因型与ACS的发生呈显著相关(OR=1．52;95％CI:1．11-2．08;P= 0．010)。结论TSP-1基因G1678A多态性与中国汉族人群ACS密切相关,从基因型可能是ACS遗传易感性的基因标记之一。
- 高磊何国平马继政杨国英戚传平卞智萍杨笛张寄南
- 关键词：急性冠脉综合征多态性反应素中国汉族人群等位基因频率基因标记
- 实时荧光定量PCR检测血浆结核分枝杆菌DNA的初步临床应用被引量：9
- 2007年
- 目的评价实时荧光定量PCR技术检测血浆(或血清)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)DNA的技术。方法建立实时荧光定期量PCR方法测定血浆MTBDNA,分别检测临床确诊的55例结核病患者血清43份,血浆25份以及非结核肺部疾病患者血清18份,健康体检血清18份和健康体检者血浆11份的MTBDNA含量。结果18例非结核肺疾病患者血清、18例健康体检者血清以及11例健康体检者血浆MTBDNA全部阴性。55例初诊结核患者中10例(18.2%)治疗前血浆(或血清)MTBDNA阳性,在痰涂片阴性的18例结核患者中,血浆(或血清)MTBDNA阳性检出率为27.8%(5/18),其特异性达100%。结论本研究证实了结核患者血浆(或血清)循环MTBDNA的存在,其定量检测对痰涂片阴性及无痰患者的结核病诊断有重要参考价值。
- 严子禾潘世扬陈丹高丽谢而付黄佩珺戎国栋杨笛童明庆张寄南
- 关键词：结核分枝杆菌血浆DNA荧光定量PCR
