genistein对人卵巢癌细胞系SKOV_3及其裸鼠移植瘤中表皮生长因子受体介导的信号转导通路的影响 被引量:3 2004年 目的 通过 genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 及其裸鼠移植瘤中表皮生长因子受体(EGFR)介导的肿瘤信号转导系统的影响 ,探讨其抑制增殖作用的机制。方法 应用免疫细胞化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法检测c erbB 2蛋白的表达 ;Western印迹检测细胞c jun和c fos蛋白的表达 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测c erbB 2 ,c raf 1,c jun和c fosmRNA的表达。结果 2 0 μmol/Lgenistein处理组c erbB 2、c raf 1及其下游基因c jun、c fosmRNA表达减弱。2 0 μmol/Lgenistein处理SKOV3 细胞 4 8h后 ,c erbB 2蛋白表达减弱 ,平均吸光度 (A)值减低 ,为0 4 2± 0 0 2 (P <0 0 5 )。Western印迹检测结果表明 :2 0 μmol/Lgenistein处理SKOV3 细胞 12~ 72h后 ,c jun、c fos蛋白表达水平逐渐减弱。结论 genistein下调SKOV3 中EGFR介导的肿瘤信号转导通路中两个关键基因c erbB 2和c raf 1之mRNA及蛋白及其下游核转录因子c jun和c fos的mRNA及蛋白的表达水平 ,提示genistein干预EGFR介导的肿瘤信号转导系统中主要信号分子的表达可能是其抑制卵巢癌增殖的分子基础。 李昱 米粲 吴永忠 杨素芬 杨正钦关键词:SKOV3 裸鼠移植瘤 人卵巢癌细胞系 信号转导通路 蜕皮甾酮对H_2O_2诱导的PC12细胞毒的保护作用(英文) 被引量:3 2006年 目的观察蜕皮甾酮(ecdysterone,ECR)对H2O2作用不同时间诱导PC12毒的保护作用。方法通过MTT(3-4,5-d im ethylth iazolyl-2,5-d iphenyltetrazolium brom ide,MTT)法检测H2O2对PC12的毒性及ECR的保护作用。PC12细胞的形态学改变通过荧光显微镜观察(acrid ine orange/eth id ium brom ide染色,AO/EB),完整无损的PC12细胞呈绿色,受损或死亡细胞呈橘黄色和红色。结果1、25、50和100μmol.L-1ECR与PC12细胞分别作用6h,12hand 24h时,PC12细胞的MTT吸光值无明显改变;50、100、200μmol.L-1H2O2分别与PC12作用6h,12h,24h时,PC12细胞的MTT吸光值明显降低(P<0.05,P<0.01 andP<0.01);如果用不同浓度的ECR(1、25、50 and100μmol.L-1)预处理PC12细胞0.5 h后,再加入H2O2(100μmol.L-1)并分别作用6h,12h,24h,则PC12细胞的MTT吸光值相对增加(P<0.05 at 50μmol.L-1,P<0.01 at 100μmol.L-1)。AO/EB染色后荧光显微镜下观察,ECR对H2O2引起的PC12细胞损伤有保护作用。结论ECR能够相对增加PC12细胞的存活率,对H2O2的PC12细胞毒性有保护作用。 杨正钦 吴芹 陆远富 杨素芬 石京山 李少林关键词:蜕皮甾酮 H2O2 PC12细胞 姜黄素抑制C6胶质瘤细胞增殖\诱导其凋亡的分子机制 被引量:2 2006年 PTEN基因是近年来发现的、继P53之后又一重要的抑癌基因,其突变率在胶质细胞瘤中约占40%。姜黄素(Cureumin)是否可以通过诱导野生型PTEN基因的表达而抑制脑胶质瘤细胞增殖和/或促进其凋亡,目前国内外尚无报道。目的观察Cureumin是否上调胶质瘤细胞野生型PTEN基因的表达而抑制脑胶质瘤细胞增殖和/或促进其凋亡并探讨其分子机制。方法采用大鼠胶质瘤细胞株(C6细胞):MTT观察Curcumin对C6细胞存活增殖的影响;通过荧光标记的BrdU抗体,品微镜下观察Curcumin对C6细胞分裂增殖的影响;碘化丙啶(propldium iodide,PI)经流式细胞仪测定Curcumin对C6细胞周期的阻滞;用荧光染料AnnexinV—PE和7-AAD借助于流式细胞仪观察Curcumin对C6细胞早期凋亡的影响;DCFDA荧光探针检测Curcumin诱导的细胞内活性氧的产生; 杨正钦关键词:姜黄素 PTEN基因 脑胶质瘤细胞 细胞增殖 分子机制 蜕皮甾酮对Aβ25-35诱导PC12细胞毒的保护作用 2005年 杨素芬 吴忠均 杨正钦 吴芹 龚其海 周岐新 石京山关键词:蜕皮甾酮 细胞毒 AΒ25-35 MTT法检测 阳性对照组 存活情况 蜕皮甾酮体外抑制β-淀粉样蛋白的纤维形成及神经毒性(英文) 被引量:3 2003年 目的 处于聚集及纤维丝状态的 β 淀粉样蛋白片段 1 - 4 2 (Aβ1 -4 2 )具有神经毒作用 ,可导致阿尔茨海默病 (AD)。本文观察蜕皮甾酮体外对Aβ1 -4 2 的聚集、纤维丝形成及其神经元毒性的影响 ,旨在为蜕皮甾酮防治AD提供依据。方法 透射电镜观察蜕皮甾酮及维生素E(VitE)对试管内Aβ1 -4 2 聚集和纤维丝形成的影响 ;MTT法及乳酸脱氢酶 (LDH)活性法检测培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元存活率及神经元受损情况。结果 ① 1 0 0 μmol·L-1 Aβ1 -4 2 分别与磷酸盐缓冲液 (PBS)、1 0 0 μmol·L-1 蜕皮甾酮和 1 0 0 μmol·L-1 VitE孵育 3d时 ,各组均无纤维丝形成 ;孵育 7d时 ,各组均见纤维丝形成 ,但蜕皮甾酮和VitE组的纤维丝形成较PBS组明显减少 ,尤以蜕皮甾酮组更明显。2 0 μmol·L-1 的蜕皮甾酮和 2 0 μmol·L-1 VitE对Aβ1 -4 2 的聚集及纤维丝形成无明显影响。② 1 0 0μmol·L-1 的Aβ1 -4 2 作用 2 4h ,神经元存活率明显下降。蜕皮甾酮或VitE 1 0~ 1 0 0 μmol·L-1 预处理 30min,再与 1 0 0 μmol·L-1 的Aβ1 -4 2 作用 2 4h ,神经元的存活率呈剂量依赖性增加 ,LDH活性呈剂量依赖性降低。结论 离体条件下 ,蜕皮甾酮可直接抑制Aβ1 -4 2 的聚集及纤维丝形成 ,减轻Aβ1 -4 2 对神经元的毒性 ,? 杨素芬 杨正钦 吴芹 陆远富 周岐新 黄燮南 孙安盛 石京山关键词:蜕皮甾酮 Β-淀粉样蛋白 神经元 纤维形成 神经毒性 体外抑制 Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响 被引量:3 2004年 目的 观察PTK抑制剂Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法 对 3 0例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,共分为 5组 :对照组 (含 0 0 4%DMSO的生理盐水 ) 0 2mg kg ,Genistein治疗组 0 4mg kgGenistein治疗组 (皮下注射 ) ,Cisplatin( 4mg kg ,静脉推注 )治疗组 ,Genistein与Cisplatin联合治疗组。观察不同药物治疗后第 7、14、2 1、2 8d各组裸鼠皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化 ,并进行病理组织学检查。结果 0 .4mg kgGenistein皮下注射 ,对SKOV3裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用 ,与对照组相比 ,瘤体重量降低 ,肿瘤体积减小 ,坏死面积显著增加 ,但对裸鼠体重无明显影响。应用 0 4mg kgGenistein与 4mg kgCisplatin(静脉推注 )联合处理SKOV3裸鼠移植瘤有增强抑制作用。结论 Genistein具有抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 ; 李昱 米粲 吴永忠 杨正钦关键词:GENISTEIN 卵巢肿瘤 肿瘤移植 EGb防治PD的实验研究 被引量:7 2001年 目的 观察银杏叶提取物 (Ginkgobilobaleaves ,EGb)在 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3 ,6 四氢吡啶 ( 1 methyl 4 phenyl 1,2 ,3 ,6 tetrahyropyridine ,MPTP )诱导的帕金森氏病 (PD)模型中对旋转症状及纹状体中多巴胺 (dopamine,DA )含量的影响。方法 腹腔注射EGb连续 2 0d ,采用大脑立体定位仪向大鼠黑质内注射MPTP诱导旋转 ,观察大鼠旋转情况 ,测定大鼠相关脑区中DA含量的变化。结果 EGb相对增加了纹状体中DA的含量 ,改善了PD的旋转症状。 杨素芬 杨正钦 吴芹 石京山 孙安盛关键词:帕金森氏病 银杏叶提取物 EGb对MPP^+诱导的PC12细胞凋亡的影响 被引量:1 2001年 目的 观察EGb对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响。 方法 MPP+诱导PC12细胞凋亡 ,AO/EB染色 ,荧光显微镜下观察凋亡细胞。结果 EGb5 0、10 0 μg/ml在 6h、12h、2 4h可抑制细胞凋亡 ,而EGb2 5 μg/ml则无效。结论 EGb在 6h、12h、2 4h时呈剂量依赖性降低细胞凋亡率 。 杨正钦 杨素芬 吴芹 石京山 孙安盛关键词:MPP^+ PC12细胞 银杏叶提取物 细胞凋亡 RNAi技术的特征及应用前景 被引量:10 2004年 杨正钦 李少林关键词:RNAI技术 病毒感染 基因沉默 脑胶质瘤治疗的新希望——肿瘤DC疫苗 被引量:1 2005年 肿瘤疫苗是目前医学研究的一大热点,肿瘤疫苗研制中存在的一个主要问题便是大多数肿瘤的免疫原性很弱。树突状细胞(DC)是体内功能最强的抗原递呈细胞,由DC激活的T细胞免疫在抗肿瘤过程中起着主导作用。因此,DC肿瘤疫苗的兴起及其临床应用的结果均显示出DC疫苗在恶性肿瘤治疗中巨大应用前景,尤其是对于手术效果差、易复发的脑内胶质瘤来讲,具有更为重要的意义。本文就此作一综述。 杨正钦 李晓辉 李少林关键词:脑胶质瘤