李鸿钧
- 作品数:142 被引量:272H指数:7
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省应用基础研究计划面上项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 轮状病毒P[2]G3株和P[8]G1株在KMB17细胞上适应培养方法和免疫原性
- 轮状病毒P[2]G3株和P[8]G1株在KMB17细胞上适应性培养和免疫原性,属于病毒培养方法。本发明将两株轮状病毒在KMB17细胞上连续10代适应培养,使细胞病变随病毒代次逐渐增快,感染性滴度递增并稳定在较高水平。病毒...
- 孙茂盛李鸿钧易山马应霞张光明吴晋元
- 甲/戊型肝炎病毒重组抗原基因的克隆及表达被引量:1
- 2008年
- 将甲肝病毒vp1编码基因(aa 24-171)和戊型肝炎病毒ORF2基因(aa 431-615)通过一段编码柔性甘氨酸链(Gly4 Ser Gly4)的基因片断连接,获得编码HAV/HEV融合蛋白基因(AEAg342).将该融合基因插入质粒pBV220,构建表达质粒pBV220-AEAg342.将pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL21中进行表达,表达量约占菌体总量的20%,经离子交换层析纯化,目的蛋白纯度达90%以上.Western blot证实该蛋白能与甲肝及戊肝患者阳性血清发生特异性反映,为进一步开发双价疫苗和联合诊断试剂奠定了一定基础.
- 奎翔李鸿钧谢天宏张光明刘馨易山杨芳彭梅马开利孙茂盛
- 关键词:甲型肝炎病毒戊型肝炎病毒基因克隆
- 微创法联合导入骨髓间充质干细胞及碱性成纤维细胞生长因子基因对急性心肌梗死心功能的影响被引量:1
- 2008年
- 目的观察经冠脉联合导入骨髓间充质干细胞(MSCs)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因对急性心梗心功能的影响。方法开胸结扎法制作小猪急性心肌梗塞模型(11只),1周后行冠状动脉造影,随机分为对照组和实验组,分别经冠脉导入生理盐水10ml,含1×107MSCs的生理盐水10ml和pcDNA3-bFGF2000ug。于心梗前、心梗后1周以及心梗后5周行心脏超声检查,心梗后5周再次测定左室舒张末压。结果所有动物均成功建立急性心肌梗死模型,心梗后1周左室射血分数明显下降,5周后实验组心功能较对照组改善。结论联合导入骨髓间充质干细胞及碱性成纤维细胞生长因子基因可改善急性心肌梗死的心功能。
- 李易李绍龙卢竞前杨锋李鸿钧张玲刘屹张荣华李建美
- 关键词:急性心肌梗死骨髓间充质干细胞成纤维细胞生长因子心功能
- Ad-NTN-TH联合干细胞治疗帕金森氏病模型猴的研究
- 李鸿钧周艳孙茂盛吴晋元和占龙尹娜鲁帅尧
- 帕金森氏病(PD)是一种中老年常见的慢性神经系统退行性疾病。中国帕金森病患者总人数约在170万-200万之间。现在临床治疗方法在一定时间内可改善症状,但不能从根本上去除病因,也不能延缓疾病的进程。因此,寻找一种有效的治疗...
- 关键词:
- 关键词:帕金森氏病干细胞治疗细胞移植治疗神经系统退行性疾病
- 重组Neurturin对大鼠面神经损伤模型中面神经元的保护作用被引量:2
- 2005年
- 目的 建立大鼠面神经损伤实验动物模型 ,观察重组Neurturin对面神经元的营养与保护作用。方法 以切断面神经总干的方法 ,造成大鼠两侧面神经损伤模型 ,在右侧面神经损伤处给予重组Neurturin ,左侧作为对照侧 ,给予PBS ,分别于手术后 7、14、2 8和 4 2d ,取脑组织行双侧面神经核切片 ,甲苯胺兰染色 ,观察面神经元形态 ,分别计数两侧面神经元数量。结果 给予重组Neurturin的一侧大鼠面神经核大部分细胞仍保持正常形态 ,对照侧面神经核神经细胞多呈空泡样变性、坏死 ,部分正常形态已消失 ;手术后 7及 14d ,给药一侧存活的神经元数量明显比对照侧多 ,2 8和 4 2d差异无显著意义。结论 重组Neurturin对损伤的大鼠面神经核神经元细胞具有营养和保护作用。
- 李鸿钧苏婷马雁冰魏海刚戴长柏孙茂盛
- 关键词:面神经元面神经损伤面神经核营养
- 羟胺切割Neurturin融合蛋白表达载体的构建、表达产物纯化及生物活性被引量:7
- 2001年
- Neurturin (NTN)是新近发现的一种神经营养因子 ,是 GDNF家族的成员之一 .将 5′端引入了羟胺切割位点的 h NTN基因克隆到硫氧还蛋白融合表达载体 p Thio His A,在宿主菌 BL2 1中获得了稳定、高效表达 ,表达产物以包涵体形式存在 .在变性条件下经羟胺切割、柱层析纯化后复性 ,获得纯度达 90 %以上的 rh NTN.经鸡胚背根神经节 (DRG)培养法测定具有生物学活性 .
- 李鸿钧马雁冰戴长柏孙茂盛
- 关键词:NEURTURIN融合蛋白纯化生物活性
- 树鼩Retn基因的克隆及序列测定
- 目的:克隆树鼩(Tupaia belangeri)Retn基因,为在树鼩中开展Retn相关研究提供实验资料。方法:在树晌脂肪组织中抽提总RNA,用RT-PCR进行基因扩增,通过基因克隆、重组质粒的酶切鉴定,对Rein克隆...
- 鲁帅尧和占龙禹文海赵远陈瑜李鸿钧
- 关键词:抵抗素基因基因克隆
- 表达神经营养因子Neurturin的骨髓间充质干细胞的构建及体外活性检测被引量:1
- 2012年
- 研究神经营养因子Neurturin(NTN)在由于神经元损伤而造成的神经退行性疾病中对神经元的保护和修复作用。利用重组腺病毒载体将NTN基因转入恒河猴骨髓间充质干细胞(rMSC),通过RT-PCR、IF及Western blot方法检测NTN的转录和表达,并采用鸡胚背根神经节体外培养实验和胚胎大鼠中脑多巴胺能神经元存活实验对NTN进行体外活性检测。结果表明NTN在rMSC中稳定表达和分泌,并具有体外生物学活性,为由于神经元损伤造成的神经退行性疾病的干细胞移植治疗奠定了一定的基础。
- 王晚璞孙茂盛李鸿钧谢天宏严敏周艳尹娜
- 关键词:重组腺病毒神经营养因子NEURTURIN活性检测
- 神经营养因子Neurturin在Vero细胞中的表达及其生物学活性研究
- 2009年
- 目的探讨Neurturin(NTN)基因转染Vero细胞后的表达情况,为恒河猴帕金森病(PD)基因治疗打下基础。方法将表达载体pcDNA3-hNTN转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对表达的人NTN蛋白进行了体外生物学活性测定。结果pcDNA3-hNTN质粒转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆且有目的蛋白hNTN表达,表达的hNTN在体外能够促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,并能促进体外培养的胚胎中脑多巴胺能神经元的存活。结论获得了能稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,其表达的hNTN对体外培养的中脑多巴胺能神经元具有保护作用,为移植并进行PD猴基因治疗动物实验打下了基础。
- 谢天宏马开利尹娜施锐王晚璞王文举严敏孙茂盛李鸿钧
- 关键词:NEURTURINVERO细胞生物学活性帕金森氏病
- SHH/Lmx1a信号通路调控NTN修饰的rASCs分化多巴胺能神经元的方法
- SHH/Lmx1a信号通路调控NTN修饰的rASCs分化多巴胺能神经元的方法,属于生物医学方法。本发明通过PCR分别获得Lmx1a基因和嵌合NTN基因的编码序列,经同源重组在HEK-293细胞中分别包装重组腺病毒Ad-L...
- 李鸿钧周艳孙茂盛严敏吴晋元
- 文献传递