李震
- 作品数：161 被引量：525H指数：12
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目国家自然科学基金上海市农科院青年科技发展基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- ORF3蛋白促进猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上的增殖被引量：6
- 2018年
- 【背景】猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染猪而引起的一种急性肠道传染病,常导致病猪水样腹泻、呕吐、脱水。自2010年起,其大规模的暴发给养猪业造成巨大的经济损失。由于对PEDV免疫机理及侵入机制知之甚少,至今仍缺乏有效的PED防治措施。【目的】研究orf3对PEDV体外增殖的影响。【方法】利用基于RNA同源重组的PEDV反向遗传学操作技术拯救一系列携带不同orf3基因及orf3基因缺失的重组PEDV;将获得的重组PEDV以MOI 0.1感染Vero细胞,分别于感染的第8、16、24、32、40、48 h测定其TCID_(50)并绘制病毒生长曲线;分别在感染25 h和36 h利用全自动细胞计数分析仪对6孔板内的细胞进行计数,并于感染后的第12、24、36、48 h用CCK-8试剂盒对其细胞活力进行测定。【结果】RT-PCR结果及细胞病变观察证明成功拯救到了携带不同orf3基因或orf3基因缺失的重组PEDV;进一步的免疫组化分析结果证实PEDV的ORF3蛋白可以在Vero细胞中合成。SPSS软件分析表明携带orf3基因的重组PEDV的滴度(TCID_(50))显著高于缺失orf3基因的重组PEDV的滴度;带有orf3基因的重组PEDV感染Vero细胞25 h和36 h时的活细胞数显著高于缺失orf3基因的重组病毒感染相同时间时的活细胞数;而且重组PEDV感染Vero细胞24 h后,带有orf3基因的重组PEDV的细胞活性显著高于缺失orf3基因的重组病毒。【结论】ORF3蛋白对于PEDV在Vero细胞中的增殖具有促进作用,该作用是通过延缓或减少感染细胞的死亡实现的。本研究为揭示PEDV orf3基因的功能和PEDV复制机制的研究提供理论基础。
- 胡晓霞于瑞嵩司伏生司伏生董世娟陈冰清李震
- 关键词：ORF3猪流行性腹泻病毒体外增殖
- 猪流行性腹泻疫苗研究进展被引量：4
- 2021年
- 猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前困扰养猪业发展的重要病原之一,可造成猪群暴发流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)和初生仔猪大量死亡,给养猪业带来重大经济损失。目前PED的主要防控手段是疫苗免疫,包括全群普免以及疫苗接种母猪的跟胎免疫,但市场疫苗的免疫效果往往不理想。得益于病毒生物学研究和技术的进步,近年来PED疫苗研究取得长足进展,不仅灭活疫苗和弱毒疫苗的研制方法得到不断更新和完善,病毒载体疫苗、核酸疫苗以及亚单位疫苗研究也都取得突破性进展。本文综述了不同种类PED疫苗的特点及其研究进展,指出不同种类疫苗需要着力突破的技术环节,并对未来PED疫苗发展和PED防控作简要展望。
- 李震陈冰清董世娟
- 关键词：弱毒疫苗亚单位疫苗核酸疫苗
- 大肠杆菌表达重组牛IL-2复性技术的研究(英文)
- 2006年
- 研究了重组牛白介素2复性条件,如pH,蛋白浓度,DTT浓度,氧化剂(GSSG)和还原剂(GSH)的比例,Cu2+及L-Arg,低浓度的盐酸胍的添加,复性方法等。结果表明,复性液中添加20 mmol/mL DTT可以提高rBoIL-2的复性效率;利用尿浓度梯度复性法3.5 mg/mL的rBoIL-2蛋白溶液复性率可达50%以上,测定活性效价达9.6×104IU/mL。
- 黄建珍于瑞嵩沈秋姑李祥瑞李震
- 关键词：包含体复性
- 尿素浓度梯度复性重组牛白细胞介素-2被引量：4
- 2006年
- 尿素浓度梯度已成功用于多种重组蛋白的复性,对尿素浓度梯度复性rbIL-2进行研究,结果表明:调整变性rbIL-2的浓度在4 mg/mL左右,添加DTT使其达到10 mmol/L,4℃搅拌过夜,4℃分别对4、3、2、1 mol/L尿素,50 mmol/L Tris.Cl,pH 8.5透析12 h,然后再对pH 8.5的PBS透析12 h,可成功对rbIL-2复性,复性率达70%左右。生物活性测定表明得到了具有较高生物活性的rbIL-2。
- 于瑞嵩黄建珍李震
- 关键词：复性生物活性
- 经基因改造的小反刍兽疫N基因、其改造方法及化学合成
- 提供了一种改造的小反刍兽疫病毒N蛋白的编码核酸，其为SEQ ID NO：41的序列，以及其PCR扩增方法和用于该方法的试剂盒。
- 张国瑞李震雷志海董世娟朱玉敏于瑞嵩沈世缘王茜张西营叶小飞
- 重组牛白细胞介素-2对猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的免疫增强试验
- 为确定重组牛白细胞介素-2(rbIL-2)对猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)疫苗的免疫增强作用,分别利用巴马小型猪和杜长上杂交肉猪(断奶初期)进行了猪蓝耳病弱毒疫苗接种时的牛IL-2注射试验.试验证明:rbIL-2制品对蓝...
- 李震周宗清于瑞嵩黄建珍孙景元赵磊刘惠莉李祥瑞
- 关键词：猪繁殖呼吸综合征猪蓝耳病免疫增强
- 文献传递
- 应用灰色系统GM(1,1)模型预测猪场中猪戊型肝炎的流行趋势被引量：1
- 2012年
- 为研究猪戊型肝炎的流行趋势及其预测,应用灰色系统理论对上海市2005-2010年的猪戊型肝炎资料进行分析,建立了灰色系统GM(1,1)模型,并进行了模型评价。结果表明:GM(1,1)模型精度检验结果为优,能精确地模拟猪戊型肝炎的流行趋势。应用该模型预测上海市2011年、2012年猪戊型肝炎的感染率分别为19.25%和18.34%。
- 董世娟黄芬芬施标朱于敏于瑞嵩司伏生李震
- 关键词：病害预测
- 猪戊型肝炎病毒防控及研究策略分析
- 戊型肝炎为新发现人畜共患病,戊肝病毒可以感染猪、鼠、鸡、熊、鹿等动物,但猪感染带毒率最高,因此被看作是主要的戊肝病毒储库。我们2006年在我国猪场新发现基因3型戊肝病毒存在,并发现同一地点或同一猪场存在3型或/和4型两种...
- 李震陆海平董世娟朱与敏
- 关键词：戊型肝炎防控策略
- 文献传递
- 上海郊区猪戊型肝炎病毒分子流行病学调查被引量：2
- 2022年
- 为了解上海郊区猪场戊型肝炎病毒(HEV)的感染情况,从3个猪场随机采集180份新鲜粪便样本,用逆转录巢式聚合酶链反应对HEV ORF2部分基因片段进行扩增、克隆及测序。结果表明:HEV RNA的PCR检测总阳性率为15.6%,个别猪场HEV RNA检出率达30%,且存在基因3型和4型同时检出的情况。经NCBI数据库BLAST比对分析,23份样本为基因4型,5份样本为基因3型。遗传进化分析显示,基因3型和4型毒株与来源于上海地区的参考毒株遗传关系最近,核苷酸同源性分别为97.9%和96.3%。研究表明,上海郊区某些猪场HEV感染率仍较高,且存在基因3型与4型共感染的现象,应注意加强防控。
- 周佳明陈冈司伏生于瑞嵩陈冰清谢春芳李震董世娟
- 关键词：猪戊型肝炎病毒ORF2基因分子流行病学遗传进化分析
- 重组猪α-干扰素的纯化及其抗病毒活性测定被引量：1
- 2014年
- 分别采用PEG6000沉淀法和Sephadex G-50凝胶色谱法纯化毕赤酵母分泌表达的重组猪α-干扰素（PolFN-α）。正交试验结果显示：PEG6000沉淀法最佳分离条件为pH6．0、NaCl0．2mol／L、PEG60000．1g／mL，蛋白回收率约80％；纯化后蛋白效价为2．9×105IU／mL，比活为1．04x105IU／mg。通过SephadexG．50凝胶色谱纯化，重组PolFN-α的回收率为60％左右，纯度达到90％；纯化后蛋白效价为8×103IU／mL，比活为6．7×103IU／mg。
- 肖长峰叶小飞董世娟朱于敏李震于瑞嵩
- 关键词：纯化抗病毒活性
