曾韦锟
- 作品数:104 被引量:145H指数:6
- 供职机构:昆明学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省应用基础研究计划面上项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 具有增强蛋白质表达活性序列ER3的筛选及其功能区域的初步鉴定
- 2015年
- 目的:利用构建的增强子样序列筛选载体,筛选在大肠杆菌中增强外源蛋白质表达的序列,并利用删除突变体初步鉴定其功能区域.方法:以氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因序列与人乳头瘤病毒(HPV)主要衣壳蛋白基因 L1 的截短序列L11连接作为报告基因,从采集的样品中筛选增强子样序列,通过蛋白质表达来检测其增强活性,并通过构建删除突变体来初步鉴定其功能区域.结果: 成功筛选到一条增强子样序列,可使检测载体氯霉素抗体提高11倍,融合蛋白表达水平提高2.26倍,其功能区域主要集中在1~265bp.结论:从收集的样品中成功筛选出一个增强子序列,能提高外源基因在大肠杆菌中的表达.
- 崔成成毕艳红王应明李攀杨思达黄芬曾韦锟井申荣
- 提高外源蛋白表达的增强子样基因及其应用
- 本发明公开了一种能够在原核细胞提高外源蛋白表达的原核增强子样基因,该基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列或其截短序列;通过构建融合表达报告基因重组载体筛选出该基因,融合报告基因由人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白L1基...
- 井申荣闫沁男王应明曾韦锟黄芬
- 文献传递
- 抗菌药物跨生物膜传递方式的研究进展
- 2016年
- 生物膜是指单一或混合微生物附着于生物或者合成的表面具有一定组织结构的微生物聚集体,其组成成分包括微生物自身及其分泌的多糖基质、纤维蛋白及脂质蛋白。生物膜除了能够帮助细菌耐受多种环境压力,例如紫外线、噬菌体等,更为重要的是它能够阻碍抗生素进入和扩散,是病原菌耐药性形成的重要机制之一。因此,在治疗病原体感染的过程中,选择一种有效的抗菌药物是必要的,但对于形成生物膜的微生物如何将抗菌药物有效地传递至生物膜从而彻底治愈成膜病原菌感染是至关重要的,所以本文就抗菌药物传递至生物膜的运输方式进行综述。
- 冯梦蝶曾韦锟
- 关键词:抗菌药物生物膜
- 幽门螺杆菌粘膜核酸疫苗的制备及免疫学效应研究
- 目的: 幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)在人群中呈现高感染率,严重危害人类健康。用Hp核酸疫苗预防Hp感染的报道不多,且效果不甚理想。本研究拟构建壳聚糖包裹的Hp粘膜核酸疫苗,采用与抗原共表达细胞...
- 曾韦锟
- 关键词:幽门螺杆菌DNA疫苗IL4佐剂
- 文献传递
- ^(125)Ⅰ标记rLTB-UreB及口服BALB/c小鼠示踪实验研究
- 2003年
- 目的 观察^(125)Ⅰ标记基因重组融合蛋白LTB-UreB灌喂BALB/c小鼠后的体内分布。方法 采用氯胺T氧化法标记rLTB-UreB,Sephadex-G25凝胶过滤纯化,纸层析鉴定放射化学纯度及比活度。将BALB/c小鼠随机分为PBS口服空白对照组、Na^(125) Ⅰ口服对照组和^(125)Ⅰ-rLTB-UreB实验组,于不同时间采集标本,γ放射计数器检测CPM(每分钟计数值),SPSS分析结果。结果 纯化后的标记蛋白纯度>90%。实验组PP结和肠系膜淋巴结CPM升高,与对照组比较差异有非常显著意义。结论 ^(125)Ⅰ标记融合蛋白口服后可在肠道粘膜下淋巴组织沉积,为融合蛋白作为幽门螺杆菌口服疫苗候选抗原提供重要实验依据。
- 郭桐生邹全明曾韦锟郭刚高志刚
- 关键词:重组融合蛋白幽门螺杆菌
- 昆明市孕妇人群戊型肝炎病毒血清学调查被引量:4
- 2012年
- 目的调查昆明市孕妇人群戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)感染情况。方法采用ELISA法检测昆明市不同妊娠阶段孕妇血清标本(149例)中抗HEV IgG抗体。结果昆明市孕妇人群HEV IgG抗体阳性率为10.07%(15/149),其中20~25岁孕妇HEV IgG阳性率为12.07%(7/58),26~29岁孕妇人群HEV IgG抗体阳性率为13.46%(7/52),30岁以上孕妇人群阳性率最低为2.56%(1/39)。妊娠早期孕妇HEV IgG抗体阳性率为6.25%,妊娠中期为10.75%,妊娠晚期为10%。经统计分析,不同年龄阶段、不同妊娠时期的孕妇人群中HEV IgG抗体阳性率差异不显著(P>0.05)。结论昆明市孕妇人群中HEV感染主要以散发病例形式存在,鉴于HEV对孕妇极高的致死率,急需加强妊娠期间孕妇的HEV检测,以便进行及时有效的治疗。
- 李丽马天武曾韦锟黄芬井申荣
- 关键词:戊型肝炎病毒孕妇血清学调查
- 增强外源蛋白表达的增强子样基因及其应用
- 本发明公开了一种能够在原核细胞增强外源蛋白表达的增强子样基因ER1,该基因具有如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列或其截短序列,该基因序列通过构建融合表达报告基因重组载体筛选,融合报告基因由人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白L1基...
- 井申荣王应明曾韦锟黄芬
- 文献传递
- 甲型副伤寒沙门菌噬菌体的分离及其生物学特性的分析被引量:8
- 2014年
- 目的分离甲型副伤寒沙门菌(副甲菌)噬菌体(副甲噬菌体),并分析其生物学特性。方法从昆明某医院污水中分离副甲噬菌体,并采用噬斑形成法检测其滴度;透射电镜下观察浓缩纯化后的副甲噬菌体形态;分析副甲噬菌体对不同pH(1~12)和不同温度(40、50、60、70、80℃)作用的敏感性;培养副甲菌和副甲噬菌体,以不同培养时间为横坐标,对应的噬菌体滴度为纵坐标,绘制一步生长曲线,并测定爆发量、最佳MOI及副甲菌突变率;提取副甲噬菌体基因组,酶切分析副甲噬菌体核酸,SDS-PAGE分析副甲噬菌体外壳蛋白;采用热酚法提取脂多糖(1ipopolysac-chafide,LPS),采用苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfnnvl fluoride,PMSF)法提取外膜蛋白(outer membrane protein,OMP),初步分析副甲噬菌体的受体。结果在医院的污水中分离出的副甲噬菌体,经双层平板计数可见大小不一、透明的噬斑,滴度在109.10mPFU之间,透射电镜观察可见长尾和一个头部;副甲噬菌体在pH值3~10之间滴度较高,40℃以上,随温度上升滴度明显降低,在80℃几乎无活性副甲噬菌体存在;副甲噬菌体感染潜伏期为20min,爆发期为50min,爆发量129,最佳MOI为0.2,副甲菌突变率为5.8×10^-7~2.2×10^-6;副甲噬菌体基因组的单酶切产物均可见33bp的特异条带,SDS-PAGE分析可见4条主带;LPS、OMP能与副甲噬菌体结合,是副甲噬菌体的受体。结论副甲噬菌体为长尾噬菌体,基因组为dsDNA,大小为33bp,最佳MOI为0.2,受体位点为LPS和OMP。
- 毛普加冯金洪愉黄芬井申荣曾韦锟
- 关键词:沙门菌甲型副伤寒细菌噬菌体生物学特性
- 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位W/O/W型复乳剂的研制被引量:2
- 2003年
- 目的 制备重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(rUreB)复乳剂,研究其物理性质及免疫效率。方法 设计处方采用二步法制备复乳,显微镜观察乳滴结构及粒径分布,以电导法测定包封率,以经典法、离心法及电导法观察复乳的稳定性,免疫印迹观察抗原制备成复乳剂后免疫反应性的变化,以动物实验观察rUreB复乳的免疫效率。结果 制备的rUreB复乳性质稳定、包封率98.3%、粒径大小主要在2~10μm,免疫印迹及小鼠口服免疫后特异性抗体测定结果表明,该复乳具有良好的免疫原性,剂量小、免疫效率高。结论 将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位制备成复乳剂可得到高效、廉价、使用方便的疫苗,复乳是一个很有潜力的黏膜疫苗传送系统。
- 高志刚邹全明郭刚郭桐生曾韦锟
- 关键词:幽门螺杆菌尿素酶B亚单位复乳
- 电穿孔转染重组杆状病毒到昆虫细胞的研究
- 2013年
- 目前转染细胞时常用阳离子脂质体如Cellfectin,这种方法成本高,效果不稳定,而用电穿孔转染外源基因到昆虫细胞的文献报道极为少见.构建重组杆状病毒基因组GFP/BAC,用电穿孔法和脂质体法转染到昆虫细胞Sf9中,比较两种方法的转染效率.研究发现,两者转染效率分别为86.14%和86.53%.两种转染方法的子代重组杆状病毒能够继续转染Sf9细胞,荧光强度无明显差异.电穿孔转染效率与脂质体转染接近,但电穿孔法操作简便,周期较短,成本很低.
- 陈卫东杨靖佳井申荣曾韦锟黄芬
- 关键词:电穿孔转染效率重组杆状病毒昆虫细胞