徐方
- 作品数:76 被引量:146H指数:6
- 供职机构:宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 基于代谢组学的红细胞贮存损伤相关研究新进展被引量:2
- 2022年
- 组学技术是通过超高通量定量跟踪标记底物的实验研究方法,从整体角度出发分析人类组织器官功能和代谢的状态。代谢组学定量研究了在外界不同刺激情况下红细胞代谢物的生理和病理变化,不同代谢物的代谢调节通路。本文深入探究红细胞在体外贮存期间氨基酸、铁、一氧化氮、糖和脂质代谢等能量代谢和氧化损伤的变化,扩大了对于代谢贮存损伤机制的理解,明确红细胞代谢物与机体生理、病理变化的相对潜在关系,为个性化体外红细胞贮存如定制添加剂、研发不同的红细胞贮存液提供思路。
- 王欢徐方郭建荣
- 关键词:输血代谢
- DNA聚合酶ζ的研究概况被引量:1
- 2002年
- 金彩霞徐方
- 关键词:编码基因真核细胞
- REV7基因对人结肠癌细胞周期及凋亡的影响
- 2018年
- 目的探讨下调REV7基因对人结肠癌细胞HCT116、SW620细胞周期及凋亡的影响。方法通过体外培养人结肠癌细胞株HCT116、SW620,用REV7基因的特异性si RNA片段转染细胞,运用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹技术检测转染后细胞系的REV7基因干扰效率。选择REV7低表达具有统计学意义的上述细胞系作为实验组细胞,同时将加入转染试剂的HCT116、SW620细胞作为空白对照组,转染阴性RNA oligo干扰片段的HCT116、SW620细胞作为阴性对照组。采用流式细胞术测定各组细胞的细胞凋亡情况。通过Western blot法检测各组细胞抑癌蛋白P53、细胞周期蛋白P21、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、细胞凋亡蛋白BAK、BCL-XL表达水平。结果实时荧光定量PCR结果显示,HCT116、SW620细胞中si REV7干扰效率均高于60%(P<0.01);Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡结果显示,实验组与阴性对照相比,REV7下调促进HCT116、SW620细胞凋亡(P<0.05);Western blot结果显示,低表达REV7可下调HCT116、SW620细胞抗凋亡蛋白BCL-XL、细胞周期蛋白P21蛋白表达水平(P<0.01),上调促凋亡蛋白BAK、肿瘤抑制蛋白P53、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4蛋白表达水平(P<0.01)。结论下调REV7可以阻滞结肠癌细胞HCT116、SW620细胞周期并促进细胞凋亡,其机制可能与下调REV7后,引起抑癌蛋白P53、蛋白细胞周期蛋白CDK4、P21及细胞凋亡蛋白的BAK、BCL-XL的表达变化有关。
- 孙昊彤马璐赵晓鹏李昕隋御徐方
- 关键词:结肠癌细胞周期细胞凋亡DNA损伤修复
- 遗传性小脑-橄榄萎缩(Holmes型)一家系4例
- 1995年
- 遗传性小脑-橄榄萎缩(Holmes型)一家系4例宁夏医学院生物学教研室(750004)徐方,陈银涛,彭亮,墙克信病例与家系先证者(Ⅱ7),男,26岁。已婚,生有一男孩,已往体健,但近一年来自感双下肢无力,步履不稳,双手微颤,讲话较以前不清,症状日渐加...
- 徐方陈银涛彭亮墙克信
- 关键词:小脑家系遗传性自感步态
- 化学致癌物暴露后哺乳动物细胞内及培养上清中核型dUTP焦磷酸酶的表达分析
- 2008年
- 目的:研究不同化学致癌物暴露后核型dUTP焦磷酸酶(DUT-N)在哺乳动物细胞内及培养上清中的表达情况。方法:分别用N-亚硝胺类烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)和多环芳烃类致癌物苯并[a]芘在体内的终致癌物7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(BPDE)处理人羊膜上皮FL细胞、人肝癌HepG2细胞和人宫颈癌HeLa细胞。采用SDS-PAGE和免疫印迹法检测细胞培养上清中DUT-N蛋白的分泌及细胞内该蛋白的表达情况。结果:低浓度MNNG(0.25μmol/L)和BPDE(5nmol/L)暴露后都可引起DUT-N出现在FL细胞的培养上清中,而对HeLa细胞均无此影响;两者对HepG2细胞的影响不同,前者使DUT-N在细胞外出现,而后者却没有改变。同时,尽管MNNG与BPDE都可引起FL细胞胞外DUT-N的出现,但MNNG暴露后胞内DUT-N的表达dUTP下调,而BPDE暴露后却dUTP上调。结论:化学致癌物暴露后核型dUTP焦磷酸酶在细胞培养上清中出现的现象不具有化合物的特异性,但对特定细胞系(如FL细胞)可能存在化学致癌剂或DNA损伤剂的共性。同时,不同致癌物引起DUT-N出现的细胞反应可能是不同的。
- 锁慧萍沈静吴美萍徐方余应年
- 关键词:FL细胞
- TNF-α激活Wnt信号通路促进人结肠癌干细胞侵袭被引量:10
- 2018年
- 目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理CD44+CD133+HT29细胞建立炎症细胞模型,噻唑蓝(MTT)实验筛选TNF-α作用的最适剂量及最佳作用时间; Wnt信号通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)作用于CD44+CD133+HT29炎症细胞,实验分为空白组、TNF-α处理组、加DKK1的TNF-α处理组。MTT实验检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测Wnt信号通路中相关蛋白β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、c-Myc及上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达情况,TranswellTM侵袭实验检测各组细胞侵袭情况。结果流式细胞分选术成功分选出结肠癌CD44+CD133+HT29干细胞。MTT实验筛选出TNF-α作用的最适剂量为10 ng/m L,最佳作用时间为48 h。与空白组相比,TNF-α处理组中CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率增加,TranswellTM穿膜的细胞数增加,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达升高,E-cadherin表达降低、vimentin表达升高;与TNF-α处理组相比,加DKK1的TNF-α处理组CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率降低,TranswellTM穿膜细胞数减少,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达降低,E-cadherin表达升高、vimentin表达降低。结论TNF-α通过激活Wnt信号通路促进结肠癌干细胞的侵袭能力。
- 魏笑李昕孔飞飞马璐隋御陈冬梅徐方
- 关键词:结肠癌干细胞WNT信号通路HT29细胞
- 抗病毒免疫因子Viperin的研究进展被引量:4
- 2015年
- 先天免疫因子Viperin是一种功能与内质网相关的抗病毒蛋白,可被干扰素、多种病毒、细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)和poly(I:C)等诱导表达。Viperin通过与病毒蛋白和某些细胞内蛋白的相互作用抑制病毒增殖,具有广谱抗病毒活性。在与宿主相互作用的长期进化过程中,某些病毒能够抑制细胞内Viperin的表达,逃逸其抗病毒功能。除抗病毒作用外,Viperin还具有其他一些生物学功能。近年来有关Viperin的研究,特别是在其抗病毒机理方面,进展较快,本文结合自身研究体会,就其基本特性和研究状况做一介绍。
- 朱春辉汤艳东徐方周建华
- 关键词:抗病毒蛋白细胞膜宿主蛋白相互作用
- 着色性干皮病临床遗传学研究及患者DNA损伤修复能力的测定和杂合子检出
- 1998年
- 着色性干皮病(XP)是一种遗传性疾病。患者皮肤对日光过度敏感,皮肤干燥脱屑,雀斑样色素沉着和光化癌等是本病的主要临床特征。目前认为,患者DNA损伤修复功能缺陷或降低是引起本病一系列临床症状包括皮肤癌变的主要原因。
- 墙克信喻昭吴德丰霍正浩徐方赵巍徐平焦海燕吴旻
- 关键词:着色性干皮病皮肤癌家系遗传性疾病
- 1298例遗传咨询者淋巴细胞染色体分析被引量:1
- 2003年
- 目的 :探讨染色体异常与相关疾病的关系。为遗传咨询者提供优生知识。方法 :应用常规外周血淋巴细胞染色体标本制备G显带、C显带标本。结果 :12 98例遗传咨询者中检出异常核型 16 2例 ,占 12 4 8% ,其中数目异常 12 7例 ,占9 78% ,结构异常 30例 ,占 2 31% ,(其中 1例经鉴定为世界首报 ) ,嵌合体 5例 ,占 0 39%。结论 :对相关疾病进行细胞遗传学分析是临床诊断必不可少的一种手段。对于不明原因的反复流产、死胎、畸胎史的患者及智力低下、不育、不孕症和原发闭经患者都应进行染色体检查 ,从而为遗传咨询以及指导优生优育提供科学的理论依据。
- 陈银涛彭亮赵巍焦海燕霍正浩钟慧军徐方墙克信
- 关键词:淋巴细胞染色体细胞遗传学分析G显带异常核型
- RA和cAMP诱导神经干细胞离子通道的表达
- 2009年
- 目的比较RA(retinoid acid)和cAMP诱导神经干细胞表达离子通道亚型的区别。方法用RA和cAMP两种方法体外诱导神经干细胞成为神经元,然后用RT-PCR和定量PCR方法对离子通道亚型进行筛选;用膜片钳记录Na+离子电流;用共聚焦记录Ca2+内流。结果RA可以显著上调L-Ca2+通道表达;而cAMP则上调Na+离子通道β-亚基(SCN1B、SCN2B、SCN3B)的表达。cAMP诱导的神经细胞可以记录到特征性的Na+内流而RA没有;RA诱导的神经细胞对神经递质Ach有较强的Ca2+内流应答,而cAMP较弱。结论RA和cAMP诱导神经干细胞表达不同的离子通道亚型。
- 扈启宽李美育徐方孙涛
- 关键词:RACAMP神经干细胞