张清勇
- 作品数：109 被引量：268H指数：8
- 供职机构：郑州大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 食管腺癌组织中碳酸酐酶Ⅸ蛋白的表达被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)在食管腺癌中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法和RT-PCR检测45例食管腺癌组织、癌旁不典型增生组织、正常食管组织中CAⅨ的阳性表达及其CAⅨm RNA的相对表达量情况。结果:CAⅨ蛋白在食管腺癌组织、癌旁不典型增生和正常食管组织中的阳性表达率依次为66.7%(30/45),24.4%(11/45),4.4%(2/45),三者两两比较差异具有统计学意义(χ2=41.845,P=0.001)。食管腺癌组织中CAⅨ蛋白的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、分化程度及临床分期有关(P=0.001),与性别年龄无关(P=0.664)。RT-PCR结果显示CAⅨ基因在食管不同组织中均有表达,分别为0.217±0.017,0.436±0.03,0.544±0.043,差异有统计学意义(χ2=60.614,P=0.001)。结论:CAⅨ蛋白可能促使食管腺癌的发生,检测CAⅨ有助于食管腺癌诊断治疗以及预后判断。
- 王恒张清勇吉庆春崔新征吉文仲辛慰
- 关键词：食管肿瘤不典型增生
- 重症肌无力增生型胸腺组织11KD差异蛋白带双向电泳图谱的建立被引量：1
- 2008年
- 目的建立分辨率高和重复性好的重症肌无力(MG)增生型胸腺组织11KD差异(异常)蛋白带的二维凝胶电泳图谱。方法首先采用SDS-PAGE电泳筛选出含有11KD差异(异常)蛋白条带的MG增生型胸腺组织,然后富集11KD蛋白条带。以17cm pH3-10固相pH梯度胶条(immobilized pH gradient,IPG)做第一向等电聚焦(IEF),12%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳(2-DE),PD Quest 7.1软件分析电泳图谱。结果11KD差异(异常)蛋白条带的出现率为72.2%;通过双向电泳,建立分辨率高和重复性好的重症肌无力(MG)增生型胸腺组织11KD差异蛋白带的双向凝胶电泳图谱,进一步分离11KD差异(异常)蛋白带,共得到(30±6)个蛋白点。结论通过蛋白质组技术快速建立重症肌无力11KD差异(异常)蛋白表达图谱,为进一步研究差异表达蛋白的功能提供实验基础。
- 李静孟高峰方华崔新征张建立刘素娜张清勇
- 关键词：重症肌无力胸腺双向电泳
- 帕瑞昔布钠对大鼠肺缺血再灌注损伤炎性反应的影响被引量：7
- 2015年
- 目的 观察帕瑞昔布钠对肺缺血再灌注大鼠肺部炎性反应的影响.方法 健康雄性SD大鼠72只,体质量250 ～ 300 g,随机分为3组（n=24）：假手术组（S组）、肺缺血再灌注组（I/R组）、肺缺血再灌注＋帕瑞昔布钠组（P组）.阻断右肺门60 min后再灌注120 min制备大鼠肺缺血再灌注模型,P组在夹闭右肺门前30 min腹腔注射帕瑞昔布钠5 mg/kg,S组和I/R组给予等容量生理盐水.于右肺门再灌注2h后处死大鼠.计算肺湿干重比,测定血清丙二醛（MDA）以及超氧化物歧化酶（SOD）含量;检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞比例,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定灌洗液上清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量.结果 I/R组和P组肺组织湿干重比值分别为6.34±0.19和5.28 ±0.17（P＜0.05）、血清MDA含量分别为（9.26±1.85） mol/L和（5.45±1.12） mol/L（P＜0.05）,SOD含量分别为（98.1±12.6）U/ml和（155.8±14.4）U/ml （P＜0.05）,BALF中性粒细胞比例分别为（57.6±8.1）％和（32.6±5.8）％（P＜0.05）,BALF上清中TNF-α水平分别为（425.2±41.8） ng/L和（335.4 ±33.2） ng/L （P＜0.05）,IL-1β水平分别为（178.1±22.6）ng/L和（105.4±15.9） ng/L （P＜0.05）.结论 帕瑞昔布钠可减少肺缺血再灌注大鼠炎性细胞因子的表达,减轻缺血再灌注导致的急性肺损伤.
- 吕帅国卢锡华董铁立张清勇李廷坤杨现会
- 关键词：再灌注损伤白细胞介素-1
- 重症肌无力患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达
- 2012年
- 目的:检测重症肌无力(MG)患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达。方法:以正常胸腺组织为对照,采用RT-PCR法检测胸腺增生(14例)、胸腺萎缩(5例)和胸腺瘤(6例)组织中B7-H1mRNA的表达,流式细胞仪分析胸腺组织中B7-H1蛋白的表达情况,免疫组化染色方法观察胸腺组织中B7-H1蛋白的分布。结果:不同类型胸腺组织中BH-H1mRNA和蛋白表达差异有统计学意义(FmRNA=5.152,P=0.005;F蛋白=116.049,P<0.001)。免疫组化染色结果显示,B7-H1蛋白阳性信号主要定位于胸腺组织的皮髓质交界处和髓质胸腺细胞膜上,胸腺增生组织中B7-H1蛋白阳性胸腺细胞数量较多,分布密集,信号强度高。结论:B7-H1mRNA和蛋白的高表达可能与MG胸腺组织异常增生有关。
- 高峰李立张俊杰方华刘素娜杜英关兵峰张清勇
- 关键词：B7-H1胸腺组织重症肌无力
- 重症肌无力患者胸腺增生组织中11000条带的蛋白质组学分析被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11000差异(异常)条带的蛋白质组成。方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫组化法比较20例MG胸腺增生组织和10例正常对照组织中4.1R蛋白的表达水平。结果:MG患者胸腺增生组织中目标条带的阳性率为72.7%(8/11),该条带由(30±6)个蛋白点组成,质谱分析显示有16个高表达差异蛋白点,其中3个蛋白得到鉴定,分别为4.1R蛋白、自整合抑制因子1和胆碱乙酰转移酶。免疫组化结果显示,与正常对照组的(0.98±0.18)相比,MG患者胸腺增生组织中4.1R蛋白表达水平为(1.55±0.46)明显增高(t=3.054,P=0.016)。结论:MG胸腺增生组织11000条带由多个蛋白点构成,这些蛋白主要功能涉及细胞骨架的组成、细胞内信息传递和乙酰胆碱合成等。
- 李永丽李立李静孟朱利伟崔新征方华杨鲲鹏张清勇高峰
- 关键词：重症肌无力蛋白质组学双向电泳
- 重症肌无力患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库的构建及分析被引量：1
- 2012年
- 目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列分析。应用实时荧光定量PCR检测20例MG患者、10例正常对照胸腺组织中GSTM3和KPNA5 mRNA的表达。结果:共获得125个阳性克隆;Blast同源性检索共得到27个差异表达基因;MG患者GSTM3、KPNA5基因表达量(0.671±0.097和0.712±0.080)高于正常对照胸腺(0.582±0.047和0.571±0.018),差异有统计学意义(tGSTM3=5.458,P<0.001;tKPNA5=2.755,P=0.010),与消减文库结果一致。结论:成功建立了MG胸腺组织抑制性消减cDNA文库。
- 杨俊红崔新征方华关兵峰赵国强张清勇高峰
- 关键词：重症肌无力差异基因CDNA文库胸腺
- 重症肌无力患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶和烟碱型乙酰胆碱受体的表达被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶(CHAT)和烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的表达。方法:采用免疫组化方法检测胸腺增生(20例)、胸腺瘤(10例)、胸腺萎缩(10例)及10例正常胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达情况。结果:不同胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达差异有统计学意义(F=16.271,15.083,P<0.001)。与正常胸腺和胸腺萎缩组织相比,胸腺瘤和胸腺增生组织中CHAT蛋白的表达增高(P<0.05);胸腺瘤组织中nAChR蛋白表达低于胸腺增生组织(P<0.05);胸腺萎缩组织中nAChR蛋白的表达也低于正常对照组(P<0.05)。结论:胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白表达水平的改变可能是MG的发病机制之一。
- 关兵峰崔新征方华张迎娜赵莹张清勇高峰
- 关键词：重症肌无力胆碱乙酰转移酶胸腺
- 新的重症肌无力外科临床分型和分期的应用被引量：3
- 2012年
- 目的:总结作者提出的新的重症肌无力(MG)临床分型和分期方法在外科治疗中的应用价值。方法:收集1998年1月至2007年12月收治的410例MG患者的病历资料,分3组,分别按作者提出的临床分型和分期方法(观察组,280例)、Osserman分型(对照1组,60例)和美国重症肌无力协会临床分型(对照2组,70例)进行术前分型,按所选分型方法指导手术适应证及时机的选择,均行胸腺(瘤)切除并前纵隔脂肪清扫术,比较术后肌无力危象的发生率以及手术死亡率,比较发生肌无力危象患者的术前分型和分期。结果:观察组术后危象的发生率为8.6%,对照1组为20.0%,对照2组为18.6%,与对照1、2组比较,观察组术后危象发生率明显降低(χ2=6.817和5.923,P均<0.05)。观察组发作/进展期患者肌无力危象发生率为23.2%(22/95),远高于稳定/缓解期的1.1%(2/185),差异有统计学意义(χ2=39.037,P<0.001)。3组患者手术死亡率均为0。结论:作者提出的MG临床分型和分期方法可指导手术适应证及时机的选择,有效降低术后肌无力危象的发生率。
- 崔新征李立杨鲲鹏吉庆春兰红张清勇
- 关键词：重症肌无力临床分型
- 胚胎大鼠神经干细胞的培养及鉴定被引量：15
- 2003年
- 目的:探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法。方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测及姬姆萨染色进行细胞鉴定。结果:成功培养出了胚胎大鼠神经干细胞,培养出的细胞具有自我更新能力和增殖能力,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞。结论:胚胎大鼠神经干细胞在体外适宜的培养条件下具有自我更新、增殖和多向分化潜能。
- 张清勇杨波赵新利宋来君李红伟冯祖荫王树凯何炜
- 关键词：神经干细胞细胞培养碱性成纤维细胞生长因子
- 不同脑区来源的成体大鼠神经干细胞体外增殖特性被引量：3
- 2003年
- 目的:探讨成年大鼠神经干细胞的脑内分布及体外培养条件、增殖特性,为自体神经干细胞移植修复神经损伤提供理论依据。方法:分离成年大鼠纹状体、室区(VZ)和室下区(SVZ)的细胞,利用无血清培养技术培养并观察神经干细胞的生长规律,采用SABC法进行神经上皮干细胞蛋白(Nestin)、增殖细胞核抗原(PCNA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测,并作姬姆萨染色,对细胞进行鉴定。结果:由成年大鼠纹状体、VZ和SVZ区获得的细胞群,均可在体外分裂增殖形成神经球,Nestin阳性,进一步分化后分别呈现NSE和GFAP阳性。结论:成年大鼠脑内特定区域具有存在神经干细胞。
- 杜英阮丽荣赵新利杨波宋来君李红伟张清勇
- 关键词：神经干细胞体外增殖体外培养
