周琦
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：咸宁学院医学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 唾液富组蛋白5克隆载体的构建被引量：1
- 2007年
- 目的将唾液富组蛋白5(histatin5)的cDNA克隆至T载体,获取大量酶切后的目的片段。方法选用大肠杆菌偏爱密码子编码histatin 5氨基酸,设计5′端带酶切位点、3′端互补的两条引物,通过overlap PCR获取histatin 5的cDNA,将cDNA与T载体连接后转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,PCR、酶切、测序鉴定。酶切重组T载体,获取目的片段。结果Histatin 5的cDNA正确克隆至T载体,无突变。结论克隆载体构建成功,有利于目的片段的酶切和回收。
- 金科华周琦罗德生王彪程新潮段海瑞
- 关键词：克隆T载体
- 唾液富组蛋白5表达载体的构建
- 2008年
- 目的将唾液富组蛋白5 cDNA克隆至表达载体pGEX-4T-1。方法EcoRⅠ+SalⅠ双酶切克隆载体pMD19-T-hrp5及pGEX-4T-1,回收目的片段hrp5及双酶切载体pGEX-4T-1,将二者连接后转化大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素筛选阳性菌落,PCR、酶切、测序鉴定重组质粒。结果唾液富组蛋白5的cDNA正确克隆至表达载体pGEX-4T-1,无突变。结论重组载体pGEX-4T-1-hrp5构建成功。
- 周琦金科华罗德生王彪程新潮王梅娟段海瑞
- 关键词：克隆
