周波
- 作品数:47 被引量:292H指数:10
- 供职机构:东北林业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学文化科学更多>>
- 以木糖异构酶基因xylA为选择标记的Gateway系统植物表达载体的构建被引量:4
- 2010年
- 目的:构建以木糖异构酶基因xylA为筛选标记的无抗生素标记Gateway系统植物表达载体。方法:克隆大肠杆菌木糖异构酶基因xylA并用其替换植物表达载体pCAMBIA1301中的hpt基因,利用载体中的多克隆位点将Gateway Binary Vector(pH7WG2D)中酶切位点XbaⅠ和HindⅢ之间包括P35S、T35S、attR1、attR2和CmR-ccdB的片段重组入表达载体pCAMBIA1301中,构建表达载体pCAMBIA1301-xylA-GW,利用含有津田芜菁HY5基因片段的BP反应产物与载体进行LR反应,获得含有目的基因的植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5,并导入根癌农杆菌LBA4404中。结果:抗生素筛选及酶切和PCR鉴定表明成功构建了以xylA为筛选标记的无抗生素标记植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-HY5。结论:利用木糖异构酶基因xylA结合Gateway克隆技术构建无抗生素标记植物表达载体,可简化、方便植物转基因表达载体构建。
- 阎淑滑周波赵霞李玉花
- 关键词:GATEWAY技术木糖异构酶基因植物表达载体
- 基于ITS2序列和形态学特征对泰山杜鹃属植物系统发育关系的分析被引量:3
- 2017年
- 为明确泰山现有照山白、迎红杜鹃、满山红、杜鹃、羊踯躅的系统分类,同时探讨杜鹃属(Rhododendron)内各亚属的系统发育关系,本研究以泰山现有杜鹃属的4个亚属5个种8个样本为研究对象,借助Gen Bank数据库,以扫帚岩须和吊钟花为外类群,分析了杜鹃属9个亚属92个种的内转录间隔区(ITS2)序列并构建分子系统发育树;同时选取其中18个代表种24个形态性状进行分析及表型性状分支分析树构建。结果表明:杜鹃属是一个多系类群,各亚属进化程度基本平衡。在泰山现有杜鹃属5个种中,照山白、迎红杜鹃、杜鹃、羊踯躅均聚在以各自亚属种为主的大支中,满山红未能聚在映山红亚属分支中。基于形态学特征的数量聚类结果显示,距离系数为18的水平线可作为亚属的划分界线。在分子聚类中,马银花亚属的长蕊组和马银花组与常绿杜鹃亚属的常绿杜鹃组分别得到较高的支持度,但常绿杜鹃组下的亚组间区分不明显,羊踯躅亚属和叶状苞亚属均位于系统发育树基部,符合形态学分类结果。
- 蔡洪月邢树堂何蓉蓉周波赵飞
- 关键词:杜鹃属ITS2系统发育DNA条码
- 津田芜菁隐花色素CRY1 RNA干涉载体的构建
- 2013年
- 隐花色素CRY1在拟南芥光形态建成及光信号转导中起重要作用,在津田芜菁(Brassica rapaL. subsp. rapa ‘Tsuda’)中是否起相同作用尚未报道。本研究利用实验室已克隆得到的津田芜菁CRY1基因的cDNA全长序列,在NCBI进行序列比对,选取特异的片段。同时根据Gateway克隆技术特点,设计含有attB接头的引物。利用高保真的LA Taq DNA聚合酶,通过PCR方法在目的片段的两端加上attB序列。通过BP反应和LR反应将CRY1基因片段克隆到pH7GWIWG2(I)双元干涉载体。对重组载体pH7GWIWG2(I)-CRY1的鉴定结果表明成功构建了CRY1基因的干涉载体。利用Gateway克隆技术构建植物干涉表达载体简便易行,该结果为遗传转化研究其功能奠定了基础。
- 孙梅周波马光刘明雪李玉花
- 关键词:芜菁CRY1RNA干涉
- 芜菁SSR引物的开发及多态性分析被引量:8
- 2012年
- 目的:用于芜菁的简单序列重复(SSR)标记数量有限,初步探索多态性较好SSR的结构特性,开发更多的SSR引物,有助于芜菁的研究。方法:开发680对新的SSR引物,以2个芜菁品种为模板进行多态性扩增,筛选出多态性较好的引物。结果:565(83.1%)对引物在2种芜菁之间能够有效扩增,有多态性的引物有141对(20.7%);SSR的长度与其多态性水平之间没有直接的线性关系,但SSR基序碱基数与重复次数和多态性水平之间存在一定的联系,即3碱基为基序、7次重复的SSR多态性较好。结论:SSR的类型与引物的多态性之间有一定的联系。
- 罗丹吴委林周波李玉花
- 关键词:芜菁简单序列重复多态性分析
- microRNA参与植物次生代谢与非生物胁迫的调控被引量:3
- 2022年
- 微RNA(microRNA,miRNA)为广泛存在于真核生物中的约16~29个核苷酸长度的内源非编码单链RNA分子,在植物中参与细胞增殖、分化、代谢、器官形成以及抵御盐、温度、干旱、重金属胁迫等方面的调节。植物miRNA主要通过对靶基因降解或抑制靶基因的表达,影响植物的生长发育。目前对miRNA的产生与调控方式的研究较为清晰,且miRNA在植物次生代谢和响应非生物胁迫方面的具体作用和调控网络也得到了鉴定,这为充分理解miRNA的分子调控作用奠定了基础。为了更好地理解miRNA的表达调控特性,解读miRNA在植物次生代谢与非生物胁迫反应中的调控网络,本文综述了植物miRNA参与的次生代谢产物生物合成(黄酮类、萜类、生物碱)和响应环境压力(盐、高温、低温、干旱、重金属胁迫)的分子调控机制,总结了miRNA在次生代谢与非生物胁迫中基因表达的调控作用,这为理解环境压力与植物机体代谢之间的联系,深入研究miRNA维持植物机体稳态的调控机制、培育优良作物品种提供了可借鉴的参考。
- 李可欣田同同周波
- 关键词:微RNA靶基因植物代谢
- 芜菁原生质体的分离及绿色荧光蛋白的瞬时表达被引量:7
- 2008年
- 目的:分离芜菁叶片原生质体,建立蛋白质在芜菁原生质体的瞬时表达系统。方法:以津田芜菁成叶为试材,酶解分离原生质体;通过PEG介导的转化,将编码绿色荧光蛋白(GFP)的瞬时表达载体转入原生质体中,用激光扫描共聚焦显微镜检测原生质体中GFP的表达情况。结果:分离出大量的津田芜菁原生质体,并获得了较高的转化效率,GFP在整个原生质体中都有表达。结论:建立了津田芜菁原生质体瞬时表达系统。
- 周波聂玉哲张晓磊李玉花
- 关键词:芜菁原生质体绿色荧光蛋白
- 筛选G-box结合蛋白的酵母单杂交文库的构建被引量:3
- 2012年
- 目的:筛选花青素合成中的关键基因查尔酮合成酶基因CHS启动子中G-box的结合蛋白,从而找到调节CHS表达的转录因子。方法:采用Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System,将CHS启动子G-box序列串联后整合入酵母染色体,构建诱饵菌株;采用SMART技术合成芜菁幼苗下胚轴cDNA,将该cDNA与pGADT7-Rec表达载体共同转化诱饵菌株,通过同源重组在酵母细胞内同步进行cDNA文库的构建和筛选;用酵母菌落PCR法获得阳性克隆中的cDNA插入片段,测序后在NCBI网站进行Blast分析。结果:共筛选了2.52×106个酵母克隆,得到94个阳性克隆,菌落PCR获得了长度为0.4~2.0 kb的cDNA插入片段,并通过Blast推测了其编码蛋白。结论:实验结果证明酵母单杂交文库构建成功,初步筛选获得了G-box结合蛋白的候选蛋白,为研究CHS的表达调控奠定了基础。
- 杨鹏程周波李玉花
- 关键词:花青素查尔酮合成酶G-BOX酵母单杂交转录因子
- 一种指示Nrf2‑Keap1相互作用的BiFC细胞内检测方法及系统
- 本发明公开了一种指示Nrf2‑Keap1相互作用的BiFC细胞内检测方法及系统,提供了与eGFP N端158位氨基酸融合的Nrf2蛋白和与eGFP C端159位氨基酸融合的Keap1蛋白编码基因重组的表达载体,同时转染细...
- 周波
- 文献传递
- T-DNA插入突变在植物功能基因组学中的应用被引量:12
- 2009年
- T-DNA插入突变在植物功能基因组学研究中发挥着重要作用,广泛应用于大规模植物基因功能分析,是分离新基因、研究基因功能的有效工具。我们简单介绍了T-DNA插入突变的原理,详细论述了3种T-DNA插入突变载体的应用,并综述了利用T-DNA插入突变克隆新基因的方法,同时指出了T-DNA插入突变存在的问题及其发展方向。
- 赵霞周波李玉花
- 关键词:T-DNA插入突变植物功能基因组学
- “分子生物学”课程思政教学探索被引量:54
- 2019年
- 课堂教学是大学实施学术立教、学德树人的主阵地,应践行习近平新时代教育思想,将学科资源、学术资源转化为育人资源,实施融“知识传授、能力培养与价值引领”为一体的课程思政,以培养社会主义事业合格的建设者和可靠的接班人。“分子生物学”是生物类专业的主干课程,文章从课程目标、思政元素挖掘及实施路径等方面探索了“分子生物学”课程思政的教学改革思路,以期实现德业双修与德才兼备的人才培养目标。
- 徐启江周波闫海芳
- 关键词:分子生物学