吴贤斌
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法
- 本发明涉及一种以革兰氏阴性菌外膜蛋白为靶点筛选药物的方法，尤其是涉及一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法，旨在为了解决现有技术的药物筛选方法可靠性差、效率低的不足，所述方法包括下列步骤：（1）基因的克隆及...
- 潘建义吴贤斌邹海杰
- 文献传递
- 大肠埃希氏菌外膜蛋白OmpW抗先天性免疫研究
- 根据革兰氏染色我们将细菌分为革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。革兰氏阳性细菌的外壁主要为肽聚糖，其蛋白质含量是很低的；但是革兰氏阴性细菌的外壁比较复杂，除细胞质膜外还包括周质空间和外膜。历史上爆发的许多大规模传染病都是由革...
- 吴贤斌
- 关键词：RED重组补体先天性免疫
- 文献传递
- 大肠杆菌外膜蛋白ompW基因敲除菌的构建及其对两种抗生素的敏感性被引量：7
- 2012年
- 探讨大肠杆菌ompW基因敲除后,硫酸新霉素和氨苄青霉素对敲除菌最低抑菌浓度(MIC)和生存率的影响,进而分析OmpW的功能。【方法】运用Red重组技术将大肠杆菌K12染色体上基因ompW敲除,构建缺陷株ΔompW。然后分别测定硫酸新霉素和氨苄青霉素对正常菌和ΔompW菌的最小抑菌浓度(MIC)及次抑菌浓度(1/2 MIC)下K12和ΔompW菌的生存率。【结果】经PCR鉴定和通过提取膜蛋白进行western blot分析表明,成功获得ompW敲除菌。抗生素分析表明,K12菌对硫酸新霉素的MIC为8.0μg/mL,生存率为98.0%;ΔompW菌对新霉素的MIC为1.7μg/mL,而其生存率仅为39.0%。而k12对氨苄新霉素的MIC为16.0μg/mL,ΔompW为3.3μg/mL;1/2 MIC下K12生存率为70.4%,而ΔompW为30.3%。【结论】ompW基因缺陷株对两抗生素的敏感性大大增强,表明ompW在细菌抗性方面起着关键作用。
- 吴贤斌邹海杰田丽花潘建义赵辅昆
- 关键词：RED同源重组外膜蛋白最小抑菌浓度生存率
- 一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法
- 本发明涉及一种以革兰氏阴性菌外膜蛋白为靶点筛选药物的方法，尤其是涉及一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法，旨在为了解决现有技术的药物筛选方法可靠性差、效率低的不足，所述方法包括下列步骤：（1）基因的克隆及...
- 潘建义吴贤斌邹海杰
- 文献传递
- 大肠杆菌外膜蛋白OmpW的克隆及在外膜上高表达被引量：4
- 2011年
- 目的:利用表达载体pLLP-OmpA实现大肠杆菌K12外膜蛋白OmpW在外膜上高表达。方法:PCR扩增ompW基因,构建重组表达载体pLLP-OmpA-ompW,然后转化大肠杆菌K12,得到在外膜上高表达的菌株。提取该菌外膜蛋白,利用免疫小鼠制备得到的抗血清进行Western blot分析验证高表达的OmpW是否定位于外膜。结果:成功构建了重组表达载体,经转化后成功筛选到高表达菌株,并经Western blot证实高表达的OmpW定位在外膜上。结论:首次成功获得OmpW在外膜上的高表达,该高表达菌株可为深入研究OmpW在细菌致病机制中的作用及其它功能提供研究基础。
- 邹海杰吴贤斌潘建义赵辅昆
- 关键词：抗血清制备
