吴恺 作品数:123 被引量:695 H指数:15 供职机构: 上海交通大学 更多>> 发文基金: 上海市科学技术发展基金 上海市青年科技启明星计划 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 电子电信 生物学 语言文字 更多>>
高脂血症性急性胰腺炎脂蛋白脂酶基因多态性研究 被引量:5 2008年 目的探讨三酰甘油分解代谢酶脂蛋白脂酶(LPL)的表达和基因多态性与高脂血症性急性胰腺炎(HLP)的相关性。方法2005年5月至2006年12月HLP住院患者20例,急性胰腺炎患者50例,另选取血脂正常患其他疾病者50例为对照。测定血清三酰甘油(TG)、胆固醇(Ch)、游离脂肪酸(FFA)、脂蛋白数值、血清LPL/肝脂酶(HL)活性;RT-PCR检测LPL mRNA表达;聚合酶链-限制性酶切片段多态性分析(PCR—RFLP)法分析LPL基因内含子8 Hind Ⅲ基因多态性变化。结果HLP组血清TG、胆固醇(Ch)和FFA测定值均显著高于AP组和对照组,差异均有统计学意义(P值均〈0.05);HLP组ApoE值显著高于AP组和对照组(P〈0.05);HLP组高密度脂蛋白(HDL)显著低于对照组(P〈0.05)。HLP组LPL值为(5.98±2.28)U/L,均显著高于AP组和对照组[(1.97±0.76)U/L和(1.04±0.53)U/L,P值分别=0,046和0.031];HLP组HL值为(8.15±2.86)U/L,均显著高于AP组和对照组[(1.64±0.59)U/L和(0.86±0.39)U/L.P值分别=0.002和0.001]。HLP组LPL mRNA表达高于AP组,差异有统计学意义(P=0.0325)。LPL基因内含子8 Hind Ⅲ分析,H2等位基因频率HLP组显著高于对照组(0.90比0.72,P〈0.05);H1等位基因频率在HLP和AP组均显著低于对照组(0.10比0.28和0.14比0.28,P〈0.05)。HLP组H2H2基因型患者TG和ApoE值均显著高于H2HI/H1H1基因型(P值分别=0.043和0.046);AP组H2H2基因型患者TG值显著高于H2H1/H1H1基因型(P=0.032)。结论HLP患者LPI。HindⅢH2等位基因频率显著高于正常人群,主要与高三酰甘油血症(HTG)相关,而与胰腺炎无关;且H2H2基因型的HLP患者血清TG、ApoE值高于其他基因型者。HTG可引起LPL基因和蛋白表达活性增高,加速TG大量分解代谢和FFA等分解产物蓄积,是诱发和加重HLP的中心环节和� 徐铭益 王兴鹏 吴恺关键词:急性坏死性胰腺炎 脂蛋白脂酶 基因多态性 埃罗替尼对胰腺癌细胞BxPC3生长的影响及其机制 被引量:1 2009年 目的观察表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂埃罗替尼对体外培养的胰腺癌细胞BxPC3生长的影响,并探讨其作用机制。方法应用MTT法检测埃罗替尼作用后BxPC3细胞的增殖情况;用流式细胞分析、透射电镜和原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡和细胞周期的变化;RT—PCR法检测细胞bcl-2、bax、bcl-xl、bak mRNA表达。结果埃罗替尼呈剂量和时间依赖性抑制BxPC3细胞生长。72h后,1、100μmol/L的埃罗替尼处理组细胞存活率分别为(90.25±2.62)%和(40.75±2.98)%。两者比较具有统计学意义(P〈0.01)。50μmol/L埃罗替尼处理BxPC3后24、96h的细胞存活率分别为(74.0±4.08)%和(49.50±1.29)%,两者比较也具有统计学意义(P〈0.01)。50μmol/L埃罗替尼处理组的细胞凋亡率为(11.0±1.1)%,显著高于对照组的(6.2±1.1)%(P〈0.01);G0/G1细胞占(73.4±1.3)%,也显著高于对照组的(63.3±1.0)%;透射电镜可见细胞呈现明显凋亡形态,并见凋亡小体形成。埃罗替尼处理组细胞bcl-2、bcl—xl mRNA表达下调,bax mRNA表达轻微上调,bak mRNA的表达不受影响。结论EGFR抑制剂埃罗替尼体外可抑制胰腺癌细胞系BxPC3的生长,其机制可能与阻滞细胞周期,上调促凋亡蛋白和下调凋亡抑制蛋白有关. 陆颖影 靖大道 王兴鹏 吴恺关键词:胰腺肿瘤 受体 表皮生长因子 埃罗替尼 急性胰腺炎患者胃肠动力的变化及其机制研究 被引量:52 2002年 目的 本研究通过观察急性胰腺炎 (AP)患者结肠转运时间 (CTT) ,同时测定血清胃动素(MTL)、胆囊收缩素 (CCK)和血管活性肠肽 (VIP)的变化 ,旨探讨急性胰腺炎患者胃肠动力紊乱以及胃肠激素的作用。方法 研究对象包括 2 4例AP和 2 5例正常对照者。AP的诊断依据临床特征、生化指标和影像学。采用APACHEⅡ评分系统及BalthazarCT分级评分系统对AP患者入院时的病情严重程度进行回顾性评分。根据Metcalf改良简化技术应用不透X线的标志物 (SITZMARKS )测定AP患者和正常人全结肠及各节段结肠CTT。放射免疫法测定血清MTL和CCK浓度 ,ELISA法测定血清VIP浓度。结果 14例轻型急性胰腺炎 (MAP)和 10例重症急性胰腺炎 (SAP)患者全结肠及各节段CTT (主要是右、左半结肠 )均较正常对照者显著延长 (P <0 0 5 )。而且 ,SAP患者的全结肠和各节段结肠CTT均较MAP患者显著延长 (P <0 0 5 )。MAP、SAP患者血清MTL、CCK浓度均较正常对照值显著下降 (P <0 0 1) ,但MAP患者与SAP患者的血清MTL、CCK浓度无差异。另外 ,MAP、SAP患者血清VIP浓度与正常值相比呈增高趋势 ,SAP患者血清VIP浓度较MAP患者显著升高 (P <0 0 5 )。结论 AP患者尤其是SAP患者常存在胃肠动力障碍 ,其可能的机制是血清中胃肠激素 (MTL、CCK、VIP) 徐敏 王兴鹏 袁耀宗 龚自华 吴恺 王冰娴 许斌 曾悦 徐刚 汪佩文关键词:急性胰腺炎 胃肠动力 脂多糖结合蛋白在实验性急性坏死型胰腺炎发生中的作用 被引量:23 2003年 目的 探讨抗脂多糖 (LPS)结合蛋白 (LBP)抗体对小鼠实验性急性坏死型胰腺炎 (ANP)的影响 ,了解LBP在ANP发生中的作用。方法 6 0只BALB/c小鼠分为 4组 :ANP组 (n =18)、ANPLBP抗体处理组 (n =18)、LBP抗体单独处理组 (n =18)和正常对照组 (n =6 )。于第 9、12、2 4h分批处死小鼠并收取标本。测定血清淀粉酶和乳酸脱氢酶 (LDH)活性 ;对胰腺组织HE染色进行病理评分 ;RT PCR检测胰腺组织炎性介质肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)、细胞黏附分子(ICAM 1)和E 选择素mRNA表达变化 ;应用免疫组化和Western印迹检测核因子 κB(NF κB)蛋白表达的改变 ;酶组织化学法检测中性粒细胞髓过氧化物酶 (MPO)的活性改变。结果 与ANP组相比 ,ANPLBP抗体处理组血清淀粉酶活性于 9h和 12h显著升高 ,LDH活性于 2 4h显著升高。病理学评分结果显示 ,ANPLBP抗体处理组胰腺组织水肿程度于 9h、12h加重 ,而炎性细胞浸润和坏死则于 2 4h明显加重。反映中性粒细胞活化程度的胰腺组织MPO活性于 12h和 2 4h明显升高 ,胰腺组织内炎性介质TNF α、IL 1β、ICAM 1和E 选择素mRNA的表达呈不同程度的上调。免疫组化和Western印迹显示NF κB的表达明显上调。而LBP抗体单独处理组血清生化指标和病理学评分结果与正常对照? 王兴鹏 吴丽颖 吴恺 张汝玲 董育玮关键词:脂多糖结合蛋白 内毒素类 病理 RT-PCR 早期肠内营养联合肠道去污对犬急性坏死性胰腺炎肠屏障的影响 被引量:13 2006年 我们通过对犬急性坏死性胰腺炎(ANP)进行早期肠内营养联合肠道去污治疗以观察光镜下各肠段绒毛高度、黏膜厚度,外周血内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO),尿乳果糖/甘露醇(L/M)值及肠道内的菌群谱变化,了解早期肠内营养联合肠道去污治疗对犬ANP肠屏障的影响。 刘丕 王兴鹏 吕农华 陈洁 吴恺 徐敏关键词:急性坏死性胰腺炎 早期肠内营养 肠道内 肠屏障 二胺氧化酶 血内毒素 AMD3100对胰腺癌细胞AsPC-1及其移植瘤血管生成的影响 被引量:2 2010年 目的探讨非肽类特异性CXCR4拮抗剂AMD3100对胰腺癌细胞株AsPC-1细胞增殖及其移植瘤生长的影响。方法AsPC-1细胞分为对照组、基质细胞衍生因子-1(SDF-1α)处理组、AMD3100处理组和SDF-1α+AMD3100处理组,MTT法检测细胞增殖,Westernblotting检测血管内皮生长因子(VEGF)表达。建立AsPC-1细胞裸鼠移植瘤模型,应用AMD3100瘤内及瘤周注射,观察移植瘤的生长,免疫组化法检测裸鼠移植瘤的微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果SDF-1a可明显促进AsPC-1细胞增殖(1.430±0.122对1.002±0.001,P〈0.05),而同时应用AMD3100处理能抑制这种增殖反应(0.983±0.068对1.430±0.122,P〈0.05);SDF-1仅亦可促进AsPC-1细胞VEGF的表达(0.565±0.047对0.439±0.034,P〈0.05),而同时用AMD3100处理可抑制这种效应(0.450±0.071对0.565±0.047,P〈0.05)。AMD3100可抑制AsPC-1细胞皮下移植瘤的生长,第24天的抑瘤率达59.5%,移植瘤的MVD显著减少(28.56±6.94对98.75±20.60,P〈0.01)。结论AMD3100在体外和体内均可抑制AsPC-1细胞增殖及其移植瘤的血管生成。 高振军 孔庆云 吴恺 王兴鹏关键词:胰腺肿瘤 AMD3100 血管生成 环氧合酶2在胰腺癌中表达及其抑制剂对肿瘤生长的抑制作用 被引量:9 2003年 目的 研究胰腺癌组织中环氧合酶 2 (COX 2 )的表达及其与临床分期的关系 ;探讨选择性COX 2抑制剂对胰腺癌生长的体内外抑制作用。方法 分别应用免疫组织 (细胞 )化学染色、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和Westernblot等研究胰腺癌组织和细胞株PC 3及PANC 1中COX 2表达。分析胰腺癌组织COX 2表达与临床TNM分期的关系。应用四唑氮蓝还原法 (MTT)研究选择性COX 2抑制剂Celebrex和NS 3 98对胰腺癌细胞生长的体外抑制作用。观察Celebrex对裸鼠移植瘤 (接种PC 3细胞 )生长的体内抑制作用。结果 COX 2免疫组织 (细胞 )化学染色结果显示 :2 4例胰腺癌组织阴性 3例 ,弱阳性 10例 ,强阳性 11例 ,阳性率 87 5% ;3例慢性胰腺炎组织 1例弱阳性 ,2例阴性 ;胰腺癌细胞株PC 3和PANC 1均为阳性。RT PCR结果显示两株胰腺癌细胞株和胰腺癌组织COX 2mRNA的表达较正常胰腺组织明显上调。Westernblot显示胰腺癌细胞株PC 3、PANC 1中COX 2蛋白表达阳性。胰腺癌组织COX 2表达程度与临床TNM分期呈正相关 (P <0 0 5)。NS3 98和Celebrex体外均呈剂量依赖性地抑制胰腺癌细胞株PC 3的增殖 ,以Celebrex的抑制作用较为显著。而Celebrex体内抑瘤率达 51 6%。结论 COX 2在胰腺癌中表达显著上调 ,其表达程度与胰腺癌临床TNM分期有关。? 王兴鹏 徐选福 王冰娴 谢传高 吴恺 董育玮关键词:环氧合酶2 胰腺癌 环氧合酶2抑制剂 肿瘤生长 梗阻性黄疸对兔网状内皮系统功能的抑制 被引量:2 1995年 作者应用大肠杆菌研究梗阻性黄疸兔的网状内皮系统(RES)功能状况,提示胆总管结扎(CBDL)1周后兔清除大肠杆菌的能力低于模拟手术组(P<0.05),校正吞噬指数也降低(P<0.01)。CBDL3周后,实验兔清除大肠杆菌的能力和校正吞噬指数未见进一步下降,说明梗阻性黄疸时间延长并不进行性加重RES功能的抑制。肝枯否细胞和肺泡巨噬细胞的分布和超微结构各组间无明显差异,表明梗阻性黄疸对巨噬细胞的结构无明显影响,RES功能抑制可能是细胞吞噬和溶解细菌的速度减慢所致。 裘正军 李宝华 张延龄 花天放 张云根 钟福全 吴恺关键词:黄疸 网状内皮系统 大肠杆菌 巨噬细胞 齐留通在急性坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡中的作用 2009年 5-脂氧合酶(5-Lipoxygenase,5-LOX)是脂肪酸氧化代谢的重要酶类,近年的大量研究已经证实,5-LOX在许多肿瘤的发生和发展中都起到重要作用。而关于急性胰腺炎(AP)时,5-LOX在胰腺腺泡细胞凋亡中作用的研究却鲜有报道。本文旨在探讨5-LOX抑制剂与AP腺泡细胞凋亡的关系和意义。 陈敬涵 徐敏 吴恺 王兴鹏关键词:胰腺腺泡细胞凋亡 急性坏死性胰腺炎 齐留通 5-LOX 氧化代谢 血管紧张素Ⅱ对大鼠胰腺纤维化过程中细胞凋亡的调节作用 被引量:1 2004年 目的 探讨洛沙坦对TNBS诱导大鼠实验性胰腺纤维化形成过程中胰腺腺泡细胞凋亡的影响及可能机制。方法 雄性SD大鼠 10 0只随机分为正常组、对照组、治疗组 ,采用胰管内注射 2 %三硝基苯磺酸 (TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型。治疗组每天给予洛沙坦 (10mg/kg)灌胃 ;对照组给予等容积的无菌蒸馏水。观察胰腺组织病理改变 ;TUNEL法原位检测凋亡胰腺腺泡细胞密度 ;透射电镜观察胰腺组织细胞形态学变化 ;逆转录 -多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测Bcl 2凋亡相关基因家族成员Bcl 2、Bcl XL、Bak、BaxmRNA表达。结果 洛沙坦治疗可逆转胰腺组织炎症细胞浸润、腺泡萎缩等异常改变。对照组大鼠胰腺腺泡细胞凋亡较正常大鼠明显增加 ,胰腺组织Bax、BakmRNA表达较正常增加 ,Bcl 2mRNA表达降低 ,Bcl XLmRNA不表达 ;洛沙坦治疗后凋亡减少 ,洛沙坦治疗组Bax、Bcl 2mRNA表达及Bax/Bcl 2较对照组降低 ,Bak、Bcl XLmRNA不表达。结论 TNBS诱导大鼠胰腺纤维化形成过程中胰腺腺泡细胞凋亡增加 ;洛沙坦阻断 1型血管紧张素Ⅱ受体 (AT1R)可抑制其凋亡 ,其机制可能与调控bcl 2凋亡相关基因表达有关。由此可见 。 张汝玲 王兴鹏 吴恺 吴丽颖 董育玮关键词:胰腺 纤维化 细胞凋亡