叶妙水
- 作品数:8 被引量:80H指数:4
- 供职机构:中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:海南省自然科学基金海南省教育厅科研基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 北美海蓬子Na+/H+逆向运输蛋白基因的克隆及转化分析
- 植物Na+/H+逆向运输蛋白在植物耐盐性方面起着极为重要的作用。根据同源序列设计引物, 通过RT-PCR方法从真盐生植物北美海蓬子(Salicornia bigelovii)中克隆出包括1 683bp的完整编码区在内的2...
- 叶妙水钟克亚张桂和胡新文郭建春
- 关键词:北美海蓬子转基因
- 文献传递
- 双向凝胶电泳的实验操作及进展被引量:6
- 2006年
- 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳是研究蛋白质组的核心技术,本文重点介绍了双向凝胶电泳的原理、实验操作过程中的具体步骤以及近年来在实验过程中发展的一些新方法和进展。
- 叶妙水钟克亚胡新文郭建春
- 关键词:双向凝胶电泳蛋白质组等电聚焦
- 北美海蓬子盐胁迫条件下抑制差减文库构建与分析被引量:3
- 2007年
- 北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)是一种耐盐性极强的真盐生植物,在200mmol/L的Na+浓度下生长,其高度和含汁量是5mmol/LNa+浓度下生长的2倍和2.5倍。为了研究北美海蓬子耐盐的机理和分离耐盐新基因,我们构建了在盐胁迫条件下北美海蓬子基因表达差异的SSH文库。以北美海蓬子种子播种于0mmol/LNaCl MS液体培养基上幼苗(0号材料)的总RNA为Driver,200mmol/LNaCl诱导24h幼苗(2号材料)的总RNA为Tester,运用SMART PCR cDNA合成技术分别合成全长cDNA。将两种cDNA群体进行抑制差减杂交,用T/A法分别构建了盐胁迫相关基因的正向差减文库(205个克隆子)和反向差减文库(235个克隆子)。通过PCR和反式NorthernDot-Blot消除假阳性和重复克隆子,得到在盐胁迫下特异表达的阳性克隆85个。对测序结果正常的81个克隆进行BLASTn分析,其中有70个cDNA序列与已经报道的其它物种的核酸序列具有较高的同源性;另外11个cDNA序列未找到有较高相似性的已知序列。81个cDNA序列中没有与北美海蓬子中已报道的核酸序列有较高的相似性,因此,所有81个克隆序列都是北美海蓬子中的新基因。
- 李吉涛龙建琪叶妙水张桂和郭建春
- 关键词:盐胁迫
- 盐生经济作物北美海蓬子与盐渍地生态环境改造被引量:18
- 2006年
- 北美海蓬子Salicornia bigelovii属于藜科海蓬子属植物,是一种耐盐性极强的真盐生植物,它最佳生长的Na+浓度范围很广,同时又是一种极具开发潜力的经济作物。大面积种植北美海蓬子不但可以恢复和改造海岸带生态环境、治理沙漠化、充分利用盐碱地、实现资源的可持续利用,而且由于北美海蓬子本身所具有的巨大经济价值,将为农民发展生态产业脱贫致富创造极好的机会。为此就北美海蓬子经济价值,北美海蓬子种植技术、耐盐机理和分子生物学方面的研究进展,北美海蓬子开发前景作一综述。
- 叶妙水钟克亚张桂和胡新文郭建春
- 关键词:北美海蓬子经济作物海水农业盐渍地
- 转海蓬子Na^+/H^+逆向运输蛋白基因番茄的耐盐性研究被引量:4
- 2007年
- 以转海蓬子Na+/H+逆向运输蛋白基因(Nhap)的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)阳性植株和对照植株为材料,测定叶片相对含水量、质膜透性、K+/Na+比值和叶绿素含量4项耐盐指标.结果表明:在盐胁迫条件下,转基因植株的相对含水量、K+/Na+比值和叶绿素含量明显高于对照植株,而叶片质膜透性明显低于对照植株,说明Nhap基因已经在番茄转化植株体内表达,提高了转基因植株的耐盐性.
- 张桂和郭建春叶妙水
- 关键词:转基因番茄耐盐指标
- 北美海蓬子Na^+/H^+逆向运输蛋白基因的克隆及拟南芥转化分析被引量:11
- 2007年
- Na+/H+逆向运输蛋白在植物耐盐性方面起着极为重要的作用。根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从真盐生植物北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)中克隆出包括有1683bp的完整编码区在内的2591bp(GenBank登陆号为DQ157454)的Na+/H+逆向运输蛋白基因(SbNHX1)cDNA序列。将该基因编码区序列构建到植物表达载体pVKH-35S-pA上,并通过农杆菌介导转化到模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,得到T3代转入单基因种子。200mmol/L的NaCl胁迫培养结果显示,转基因拟南芥在200mmol/L的NaCl胁迫条件下生长状况好于野生型植株,植物表现有一定的耐盐性。
- 肖前谷叶妙水钟克亚胡新文郭建春
- 关键词:北美海蓬子转基因拟南芥耐盐性
- 转录因子CBF在植物抗寒中的重要作用被引量:35
- 2006年
- 低温能够诱导植物许多基因的表达,从而使植物具有抗寒性,这种现象称为冷驯化。对于植物冷驯化的分子机理,目前研究得最多的是CBF转录因子调控的信号转导途径,其作用途径可归纳为:CBF(CrepeatBindingFactor)转录因子→CRT/DRE(Crepeat/DehydrationResponsiveElement)基序→COR基因表达→植物抗寒性增加。研究CBF转录因子在抗寒中的作用机制,能为提高植物的抗寒性,培育抗寒作物品种提供新方向。
- 钟克亚叶妙水胡新文郭建春
- 关键词:CBF转录因子植物抗寒
- 与拟南芥抗寒性相关的CBF3和AtGolS3基因克隆及其表达载体的构建被引量:3
- 2006年
- 用RT-PCR技术从拟南芥(Arabidopsisthaliana)中克隆到抗寒相关基因CBF3、AtGolS3,序列分析后用BLAST软件作同源序列分析的结果显示,它们的核苷酸序列与GenBank中登录的拟南芥CBF3(AF074602)、AtGolS3(AB062850)核苷酸序列完全相同。CBF3和AtGolS3基因分别与植物表达载体pVKH相连构建pVKH-35S-CBF3-pA、pVKH-35S-AtGolS3-pA以及通过中间载体pRT101,将AtGolS3连接到pVKH-35S-CBF3-pA上,成为各自带有35S启动子及PolyA终止子的双价植物表达载体pVKH-35S-CBF3-pA-35S-AtGolS3-pA。
- 钟克亚叶妙水胡新文符少萍郭建春