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刘正飞: 作品数：106 被引量：687H指数：14; 供职机构：华中农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

合作作者

规模化猪场戊型肝炎病毒感染状况的调查与分析: 调查规模化猪场中戊型肝炎病毒(HEV)感染和流行特征。首先在4个猪场采集血样80份，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗-HEV IgG抗体。在此基础上，2007-2009年作者采集规模化猪场肛拭子样品415份，及规模...; 张厚勇陈东升张懿伍宜权吴斌何启盖刘正飞; 关键词：规模化猪场戊型肝炎病毒阳性率人畜共患病

应用在大肠杆菌中表达的猪2型圆环病毒ORF2蛋白建立一种ELISA诊断方法: 根据GenBank发布的猪2型圆环病毒(PCV2)序列(AY035820),设计一对引物,并以包含PCV2全基因组的重组质粒pT-PCV为模板,扩增出含ORF2全基因的片段(709bp),回收PCR产物,将其克隆入pMD...; 琚春梅陈焕春刘正飞曹胜波何启盖; 关键词：圆环病毒原核表达基因克隆; 文献传递

用于构建布鲁氏菌突变株的质粒pZF17‑30及其构建方法和应用: 本发明提供了一种用于构建布鲁氏菌突变株的质粒pZF17‑30及其构建方法和应用，构建过程主要包括从商业化质粒pCMV‑BE3中扩增rAPOBEC1‑nCas9‑UGI片段，并将该片段与含有泛宿主复制子pBBR1‑MCS‑...; 刘正飞郑可汪洋李娜

用多重PCR鉴别猪伪狂犬病野毒与疫苗毒的研究被引量：41: 2005年; 根据基因库中的猪伪狂犬病病毒(PRV)各基因的序列,设计了与PRV的 gB、gD、gE基因序列互补的3对引物。对样品中的PRV DNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为549 bp(gB)、429 bp(gD)、366 bp(gE)。用这3对引物对三基因缺失疫苗毒的样品DNA模板进行多次多重 PCR扩增,均能稳定得到与设计相符合的2条特异性条带。敏感性试验结果表明,多重 PCR可以检测到 106 pg三基因缺失疫苗毒或756 pg PRV野毒的核酸模板量。特异性试验结果表明,以正常对照细胞及猪圆环病毒和猪细小病毒DNA为模板进行多重PCR扩增,均无任何条带。; 刘丽娜何启盖陈焕春刘正飞张松林汪招雄; 关键词：猪伪狂犬病基因缺失疫苗 PRV GE基因酸模

猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验被引量：12: 2005年; 为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK-/gG-/LacZ+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测;同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明,疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为105.0TCID50;10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的,免疫猪能抵抗强毒的攻击;疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明,4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效,并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。; 何启盖方六荣吴斌刘正飞吴美洲肖少波金梅林陈焕春; 关键词：安全性免疫原性

牛疱疹病毒1型复制非必需基因UL0.5的鉴定: 2013年; 牛疱疹病毒1型(BHV-1)和5型(BHV-5)为同源性最高的两种α疱疹病毒亚科成员,分别引起牛的呼吸道和神经症状。序列比较显示,BHV-1基因组中具有一个独特的UL0.5基因。为研究该基因的功能,本研究构建BHV-1 UL0.5基因缺失转移质粒,与野生型基因组共转染MDBK细胞,通过空斑纯化获得UL0.5基因缺失突变株(rBHV-1ΔUL0.5);PCR和western blot鉴定结果表明,重组病毒形成的空斑大小及一步法生长曲线与野生型基本相同;家兔接种试验表明,突变株与野生型在急性感染期、潜伏感染期及再激活期病毒排毒量无明显变化;Real time PCR检测3个时期三叉神经节中病毒基因组的拷贝数也无明显差别。综上所述,UL0.5基因是BHV-1的复制非必需基因,该基因缺失后对家兔致病性无显著影响。; 尹贻鑫何宁宇张瑞竹张炜陈兴江陈焕春刘正飞

一种伪狂犬病TK－/gE－/gI－基因缺失标志活疫苗及制备方法: 本发明公开了一种三基因缺失的重组伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PrV)毒株的构建、用该毒株制备的疫苗、构建该毒株的方法以及制备该疫苗方法，所说的重组伪狂犬病毒株缺失了TK、gE、gI基因，且不含外源基...; 陈焕春刘正飞吴斌金梅林方六荣何启盖周复春; 文献传递

集贸市场肉样中伪狂犬病病毒携带状况的初步调查被引量：1: 2006年; 从集贸市场随机采集97头份猪肉样本、53头份羊肉样本、50头份牛肉样本,应用双抗体夹心ELISA和PCR方法,平行检测样本可能含有的伪狂犬病病毒。结果97头份猪肉样中,双抗体夹心ELISA方法检出伪狂犬病病毒19份(19.6%),PCR检出25份(25.6%);牛肉样本中ELISA阳性数为0,PCR阳性2份(4%);羊肉样本中两种方法均为阴性。这两种方法均为阳性和阴性的份数为12和170,总符合率为89.2%。结果说明猪伪狂犬病的控制对提高肉食品品质具有重要作用。; 汪招雄何启盖刘正飞陈焕春; 关键词：伪狂犬病病毒动物组织酶联

1猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及其重组伪狂犬病毒中间转移质粒的构建: 猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)是近年来兽医界广泛关注的新发现的病毒之一。该病毒基因组为环状单链DNA,大小约为1.7kb,病毒粒子无囊膜,呈二十面体对称,直径约为17nm。1995年,国际病毒...; 琚春梅陈焕春郗鑫刘正飞曹胜波; 文献传递

伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白基因gL的克隆和序列分析: 2002年; 根据已发表的基因序列设计了 1对PCR引物 ,以伪狂犬病病毒Ea株 (pseudorabiesvirusEa ,PRVEa)基因组DNA为模板 ,扩增出一大小为 5 11bp的片段。通过酶切和测序证实 ,该基因为伪狂犬病病毒Ea株的又一糖蛋白基因 ,即gL基因。Blast软件分析表明 ,该基因与Kaplan株核苷酸序列的同源性为 94% ,氨基酸序列的同源性为 95 %。将测序结果输入GenBank ,获得登录号AF44 845 6。; 刘正飞陈焕春琚春梅吴斌何启盖; 关键词：伪狂犬病病毒EA株克隆糖蛋白基因