刘朝霞
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪细小病毒BQ--C株VP2蛋白的原核表达与抗体检测的间接ELISA方法建立
- 刘朝霞
- 文献传递
- 非洲猪瘟快速检测方法的建立及主要免疫原基因P54的原核表达
- 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、发热性、高度接触传染性疾病。世界动物卫生组织将其列为A类动物疫病，我国也将其列为一类动物疫病。本研究通过对非洲猪瘟主要免疫原基因P54基因序列进行分析，查找出P54蛋白的跨膜区在3...
- 王晓玲蔺文成胡峰王朝刘朝霞周顺毕克东刘业兵崔尚金
- 关键词：非洲猪瘟原核表达
- 猪细小病毒BQ-C毒株VP2基因的鉴定及表达
- 2013年
- 本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C。对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100%。为获得该毒株结构蛋白VP2基因的表达产物,将VP2基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+),得到表达重组质粒。经双酶切和测序鉴定,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE结果表明,获得的重组蛋白分子质量约为71.5ku,与预期大小相符。Western blotting结果显示获得的重组蛋白能与PPV阳性血清特异性结合,表明重组蛋白具有良好的反应原性。结果表明,本研究成功分离了1株PPV BQ-C株,且表达的VP2重组蛋白可用于PPV血清学诊断和疫苗的研发。
- 刘朝霞刘永刚毕可东周顺崔尚金
- 关键词：猪细小病毒原核表达反应原性
- 猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2012年
- 为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于10%,表明具有较好的重复性。利用建立的方法对633份临床样品进行检测,阳性率是88.10%。选取58份临床样品与间接免疫荧光方法作比对试验,两者的符合率是94.80%。
- 胡峰刘杉杉蔺文成王晓玲张超范王朝刘朝霞胡泉博崔尚金
- 关键词：猪捷申病毒原核表达间接ELISA
