刘光快
- 作品数:3 被引量:20H指数:2
- 供职机构:浙江大学农业与生物技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默载体构建及其转基因后代的高温结实特性分析被引量:3
- 2013年
- 采用RT-PCR法亚克隆了PDI基因保守区内450bp的靶标序列作为干扰区段,构建了含有内含子hpRNA(ihpRNA)的双元表达载体pTCK303-RiOsPDI,经农杆菌介导转化日本晴,获得转基因植株;通过在T0代对其潮霉素(Hyg)抗性基因的PCR鉴定,确定携带有干扰片段的T-DNA区已整合到水稻基因组中,且在转基因T1代符合3∶1的分离模式。半定量PCR和荧光定量PCR的检测结果表明,PDI基因沉默转基因阳性植株不同器官中的PDI表达量均显著降低,尤其是其籽粒中表达量较微,几乎能引起靶基因80%左右沉默。对转基因T2代植株的高温结实特性和籽粒理化品质的检测结果,PDI基因沉默会引起高温胁迫处理下结实率的大幅度降低,耐热性显著下降,但其在常温处理下的结实率与对照之间无显著差异。此外,PDI基因沉默后,稻米的透明度下降、垩白度增加,但对籽粒粗蛋白总量和直链淀粉含量的影响不甚明显。
- 刘光快曹珍珍韦克苏潘刚苏达张春娇程方民
- 关键词:基因沉默RNAI载体构建高温胁迫
- 蛋白二硫键异构酶和淀粉合成酶基因沉默对水稻耐热及结实特性的影响
- 高温胁迫是制约水稻产量潜力发挥和品质稳定的主要逆境因素之一,它对水稻产量和品质形成的影响作用,与水稻“库”、“源”器官中的碳、氮代谢过程存在着密切联系。本实验室的前期研究工作表明,蛋白二硫键异构酶基因(PDI)、可溶性淀...
- 刘光快
- 关键词:水稻RNA干扰高温胁迫淀粉合成酶
- 文献传递
- 水稻籽粒氮代谢几个关键酶对花后高温胁迫的响应及其与贮藏蛋白积累关系被引量:17
- 2012年
- 以早籼水稻嘉935和嘉353为材料,利用人工气候箱设高温(32℃)和适温(22℃)处理,探讨了高温对水稻籽粒氮代谢关键酶活性的影响及其与籽粒粗蛋白含量和各种氨基酸组成间的关系,并结合荧光定量PCR对水稻籽粒谷氨酰胺合成酶(GS)2个同工型基因的表达及其温度响应进行了检测分析。结果表明,花后高温处理对谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)的影响基本一致,均表现灌浆前期升高、后期下降的趋势,但花后高温处理下水稻籽粒中粗蛋白总量和各类氨基酸含量的增加,并不一定是其籽粒氮素物质的转运能力和蛋白质合成能力的增强所致;谷氨酰胺合成酶(GS)在高温处理下的生理活性普遍高于其相应时期的低温处理,其中,GS2是GS基因在水稻胚乳中高表达的一种同工型,在水稻灌浆后期的表达量甚至超过GS1,高温胁迫处理会通过改变GS1和GS2基因在籽粒中的转录水平,从而对水稻籽粒灌浆中后期的GS活性产生调控。
- 曹珍珍张其芳韦克苏杨卫丽刘光快程方民
- 关键词:水稻高温氮代谢酶活性