余韵 作品数:12 被引量:84 H指数:5 供职机构: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市青年科技启明星计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
血液肿瘤细胞对氧化砷的敏感性与其抗氧化能力的关系 被引量:10 2000年 目的 探讨血液肿瘤细胞对三氧化二砷 (As2 O3 )的敏感性和细胞抗氧化能力的关系。方法 应用 9个血液肿瘤细胞系 ,通过细胞活力、形态学和流式细胞仪检测细胞凋亡 ,并测定细胞系的谷胱甘肽 (GSH)含量和 4种抗氧化酶的活性。结果 除了HL 6 0、U937、K5 6 2和Jurkat细胞外 ,其他5个细胞对As2 O3 诱导的凋亡敏感。与敏感细胞系比较 ,As2 O3 耐受细胞系存在较高的GSH含量和(或 )过氧化氢酶活性。谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽S转移酶和超氧化物歧化酶活性与细胞对As2 O3 诱导凋亡效应敏感性无明显相关。结论 细胞内GSH水平和过氧化氢酶的活性是决定血液肿瘤细胞对As2 O3 敏感性的重要因素。 朱琦 陈国强 黄莺 沈玉雷 蔡循 贾培敏 周励 余韵 沈志祥 王振义 陈竺关键词:三氧化二砷 敏感性 抗氧化能力 酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B促肿瘤机制的体外研究 2018年 目的:探讨酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)促进肿瘤发生、发展的分子机制,为其可能作为治疗靶点提供理论依据。方法:利用免疫沉淀联合质谱技术寻找和验证ANP32B相互作用蛋白;免疫荧光技术检测ANP32B和核浆转运蛋白α6(karyopherinα6,KPNA6)在细胞内的定位;采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)沉默KPNA6的表达;行GST-pulldown实验明确ANP32B与KPNA6直接结合及相互作用的区域。结果:通过免疫沉淀和质谱鉴定发现,ANP32B与KPNA6间存在相互作用,两者的结合不依赖ANP32B N端1~161氨基酸序列。体外GST-pulldown实验证实,KPNA6与ANP32B间存在直接的相互作用,且两者结合依赖ANP32B的核定位信号。利用sh RNA抑制KPNA6的表达后,并不影响ANP32B的核内定位。结论:ANP32B通过核定位信号序列与KPNA6结合,两者在细胞核中有明显的共定位,而敲除KPNA6并不影响ANP32B的核内定位。 朱晓娜 杨烁 何平 张辉林 冯茹 余韵一种蛋白质类泛素化修饰位点鉴定方法 本发明涉及一种蛋白质类泛素化修饰位点鉴定方法,该特异性富集标记鉴定方法首先是对纯化后的类泛素化修饰蛋白质进行酶解,通过特异性类泛素化抗体富集类泛素化修饰的酶切肽段,随后利用化学标记对所富集肽段中的非修饰化的赖氨酸氨基残基... 王立顺 汪彤丹 余韵 韩冰文献传递 一种蛋白质类泛素化修饰位点鉴定方法 本发明涉及一种蛋白质类泛素化修饰位点鉴定方法,该特异性富集标记鉴定方法首先是对纯化后的类泛素化修饰蛋白质进行酶解,通过特异性类泛素化抗体富集类泛素化修饰的酶切肽段,随后利用化学标记对所富集肽段中的非修饰化的赖氨酸氨基残基... 王立顺 汪彤丹 余韵 韩冰文献传递 三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞凋亡机制研究 被引量:37 2001年 目的 了解三氧化二砷 (As2 O3 )诱导多发性骨髓瘤细胞 (MM)凋亡的可能机制及其与维甲酸和干扰素的相互作用。方法 联合应用As2 O3 和巯基还原剂 (DTT)、谷胱甘肽耗竭剂 (BSO)、全反式维甲酸 (ATRA)或干扰素 (IFN α)处理MM细胞系RPMI82 2 6和U2 6 6细胞 ;应用台盼蓝拒染法计数细胞活力 ,经细胞形态学和流式细胞仪等判定细胞凋亡的程度 ;通过测定细胞内荧光染料Rhodamine 12 3的色强度分析线粒体跨膜电位 (ΔΨm)。结果 BSO可加强As2 O3 诱导的RPMI82 2 6和U2 6 6细胞线粒体ΔΨm下降和凋亡 ,而DTT则有部分拮抗的作用。ATRA诱导RPMI82 2 6细胞凋亡 ,但它和As2 O3 之间无协同效应。ATRA并不诱导U2 6 6细胞凋亡。此外 ,IFN α既不抑制RPMI82 2 6和U2 6 6细胞的生长和活力 ,也不改变As2 O3 对这些细胞的作用。结论 As2 O3 诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和巯基有关 ,但ATRA或干扰素和As2 O3 无协同效应。 周宇红 黄晓珺 蔡循 沈玉雷 贾培敏 余韵 周励 袁弥满 张学光 陈国强关键词:三氧化二砷 细胞凋亡 维甲酸 干扰素 酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B在肝癌组织表达增强并促进肝癌细胞生长的研究 被引量:2 2019年 目的 :检测酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肝细胞肝癌组织中的表达水平,并探讨其在肝癌细胞生长中的作用。方法:利用国际权威公共数据库,分析肝细胞肝癌组织中ANP32B mRNA的表达及其与患者生存期间的关系;用蛋白免疫印迹法检测患者肝癌组织样本和敲除ANP32B的肝癌细胞系中的ANP32B蛋白表达水平;并用RNA干扰技术在肝癌细胞系中沉默ANP32B的表达,通过计数检测细胞生长及克隆形成,用流式细胞仪检测其细胞周期和细胞凋亡。结果:通过数据库及肝癌组织样本分析发现,肝癌组织中的ANP32B mRNA表达值(9.763±0.04)相较于癌旁组织(9.293±0.03)明显升高,蛋白表达升高1.78倍,且ANP32B高表达的肝癌患者与ANP32B低表达的患者相比,5年总生存率明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。体外实验发现,2组敲除ANP32B的肝癌细胞和对照组肝癌细胞相比,细胞生长速度明显减慢(29.9×10~5比23.2×10~5,15.5×10~5),克隆形成数目减少(300个比146个比135个),细胞周期发生S期阻滞(47.9%比61.5%比57.1%),细胞凋亡数略有增加(1.8%比7.3%比4.9%)。结论:ANP32B在肝癌组织中高表达,在肝癌细胞系中沉默ANP32B表达后可明显抑制细胞生长,细胞周期发生阻滞,细胞凋亡增加。 朱迪 朱晓娜 杨烁 何平 沈少明 余韵关键词:肝癌 细胞生长 Fbxo22基因敲除小鼠模型的建立和表型研究 被引量:1 2019年 目的·分析Fbxo22基因敲除小鼠的表型,为探索FBXO22的生物学功能提供理论依据。方法·利用CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR associated protein 9)技术成功构建Fbxo22全身敲除小鼠,观察胚胎和小鼠的外观,测定其数量和质量,并分析小鼠的进食量和存活时间。结果·Fbxo22敲除小鼠胚胎期17.5/18.5 d的胚胎数量符合孟德尔遗传定律,外观未见异常,但是多数Fbxo22敲除小鼠在出生后48 h内死亡。少数存活小鼠体型偏小,进食减少,存活时间缩短。结论·FBXO22对于小鼠出生后早期存活和正常发育有重要作用。 张辉林 朱晓娜 杨烁 刘朦迪 朱迪 余韵氧化酚砷诱导急性早幼粒细胞性白血病细胞凋亡的研究 被引量:12 1999年 目的:了解氧化酚砷(phenylarsineoxide,PAO)对急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞系NB4细胞的可能作用。方法:在台盼蓝排除法计数活细胞和细胞活力的基础上,通过细胞形态学和流式细胞仪检测细胞凋亡。通过对细胞进行Rhodamine(Rh)123和碘化丙啶双重染色,并应用流式细胞仪检测其荧光强度,以反映细胞线粒体跨膜电位(△Ψm)。结果和结论:低浓度(005和0.1μmol/L)的PAO明显抑制NB4细胞的生长,并显著降低其细胞活力。进一步地,细胞形态学观察和流式细胞仪分析显示,这些浓度的PAO诱导NB4细胞凋亡。该效应可能与△Ψm下降密切相关。 孙岳平 陈国强 蔡循 黄莺 沈水源 贾培敏 沈玉雷 余韵 陈赛娟 王振义 陈竺关键词:细胞凋亡 急性 早幼粒细胞性 白血病 FBXO22调控凋亡诱导因子的分子机制及其在肿瘤细胞凋亡中的作用 被引量:4 2021年 目的·挖掘F-box蛋白22(F-box only protein 22,FBXO22)的底物并明确其作用机制,进一步探讨FBXO22在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法·利用免疫沉淀联合质谱分析寻找并验证FBXO22的相互作用蛋白凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)。采用变性条件下泛素化修饰实验检测FBXO22对AIF泛素化修饰的影响。通过短发夹RNA敲低FBXO22、过表达FBXO22检测AIF的表达水平。利用流式细胞仪检测FBXO22敲低或过表达对结肠癌细胞凋亡的影响。结果·免疫沉淀联合质谱分析显示FBXO22可与AIF结合,变性条件下泛素化修饰实验显示FBXO22可介导AIF的泛素化修饰。敲低FBXO22可上调AIF水平,过表达FBXO22可下调AIF水平。流式细胞术结果显示,敲低FBXO22可促进由甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)等诱导的结肠癌细胞凋亡,过表达FBXO22则可抑制MNNG等诱导的结肠癌细胞凋亡。结论·FBXO22通过泛素化修饰降解AIF进而调控由AIF介导的结肠癌细胞凋亡。 刘朦迪 潘漪莲 朱晓娜 杨烁 杨茜 余韵关键词:凋亡诱导因子 泛素化修饰 细胞凋亡 氧化酚砷对血液肿瘤细胞系的体外效应 被引量:6 2000年 目的:了解氧化酚砷(Phenylarsine oxide, PAO)对血液肿瘤细胞系的影响。方法: 8种血液肿瘤系经0.01μmol/L、0.05μmol/L和0.1μmol/L的PAO处理达一定时间后,经台盼蓝排除法计数细胞活力和应用流式细胞仪检测细胞DNA含量分布。结果和结论:在生长抑制和诱导凋亡方面,PAO对血液肿瘤细胞的效应谱相对较广,0.05μmol/L和0.1μmol/L的PAO能抑制某些血液肿瘤细胞的生长,并诱导其凋亡。但是,不同来源的血液肿瘤细胞系对PAO的敏感性不完全相同。 孙岳平 贾培敏 蔡循 黄莺 杨洁 沈玉雷 余韵 王振义 陈国强关键词:血液肿瘤 细胞凋亡 体外效应