余晓玲 作品数:18 被引量:61 H指数:5 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 化学工程 更多>>
雌激素对颏舌肌成肌细胞钙离子水平影响的实验研究 被引量:3 2013年 目的:探讨不同浓度雌激素对颏舌肌成肌细胞胞内钙离子浓度的影响。方法:体外培养大鼠颏舌肌成肌细胞,缓冲液孵育颏舌肌成肌细胞使其处于正常与微酸环境下,激光共聚焦显微镜观察不同浓度雌激素作用下成肌细胞胞内钙离子的变化。结果:正常环境下,不同浓度雌激素对颏舌肌成肌细胞胞内钙离子影响不大。在微酸环境下,雌激素能够迅速下调成肌细胞胞浆钙离子强度,并在低水平重新形成新的平衡。结论:在一定条件下,雌激素能够下调颏舌肌成肌细胞胞内钙离子水平,维持肌细胞活性,从而减少肌肉的疲劳与损伤。这可能是雌激素对OSAHS起保护作用的原因之一。 郭涛 刘文佳 余晓玲 丁寅关键词:雌激素 钙离子 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症 扩张柱床吸附层析与固定柱床层析纯化单克隆抗体的比较 被引量:1 2003年 为满足Ⅰ类新药二期临床的药品需求量 ,单抗生产由实验室规模扩大到中试规模 ,在目标产品的下游纯化工艺中 ,采用扩张柱床吸附技术代替一期临床实验室规模方法中的澄清、浓缩、和最初的疏水层析 ,其后的纯化步骤保持不变。由于采用新的纯化路线 ,使得制备周期缩短 2 3,处理能力由 1 0 0ml小鼠腹水扩大至 1 8~ 5 0L杂交瘤细胞培养液 ,回收率提高2 0 %以上 ,并很容易根据需要线性放大规模 ,为单抗的的产业化提供了更为简便和高效的下游纯化模式。 余晓玲 米力 姚西英 陈志南关键词:纯化 单克隆抗体 中试规模 单克隆抗体F(ab’)_2片段的制备与质量控制 被引量:5 1999年 本文在F(ab’) 2 片段抗体的制备工艺上 ,采用HPLC疏水色谱法 ,用高性能的疏水色谱柱 ,经 2次纯化后的F(ab’) 2 纯度可大于 98% ,回收率大于 5 0 % ,整个过程控制无菌无热原 ,纯化后产品经检定完全符合有关人用鼠源性单抗质量控制标准 ,适宜做大规模生产。 米力 陈志南 余晓玲 冯强 边惠洁 徐力青关键词:单克隆抗体 检定 不同雌激素水平下大鼠颏舌肌肌电反应的研究 被引量:1 2013年 目的:通过比较不同雌激素水平下大鼠颏舌肌的肌电反应,探讨雌激素在预防及降低阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)发病过程中的作用机制。方法:选择30只6周龄SD大鼠建立不同雌激素水平模型,用电子称评估术前、术后和雌激素替代治疗后大鼠的体重变化;放射免疫法检测血清雌激素水平;电生理方法检测不同雌激素水平颏舌肌的肌电反应。结果:与假手术组(SHAM)相比,去势组(OVX)大鼠术后6周体重明显增加(P<0.01),雌激素替代治疗组(OVX+E2)与SHAM组体重相当。血清雌激素检测结果显示OVX组雌激素水平最低,与SHAM组相比具有显著差异(P<0.01);OVX+E2组雌激素水平高于OVX组(P<0.01),但仍未恢复到SHAM组水平。电生理检测结果显示,与SHAM组相比,OVX组颏舌肌肌电强度最低(P<0.05),OVX+E2组颏舌肌的肌电强度显著高于OVX组(P<0.05),但仍低于SHAM组。结论:血清雌激素水平可以直接影响大鼠颏舌肌肌电强度,这可能是雌激素保护OSAHS的原因之一。 郭涛 刘文佳 余晓玲 曹猛 丁寅关键词:雌激素 颏舌肌 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 片段抗体纯化工艺的优化 2000年 余晓玲 米力 陈志南 黄子才 冯强关键词:纯化工艺 扩张柱床吸附层析回收纯化灌流培养生产的单克隆抗体 被引量:1 2004年 用扩张柱床吸附层析技术 ,一步回收纯化连续灌流培养的单克隆抗体。用StreamlineSP阳离子交换介质在固定床柱XK16 2 0上进行条件摸索 ,扩张床柱Streamline 2 5和 50分别用于小规模条件优化和中试规模放大。培养液中的低浓度单抗经此步处理 ,浓缩 10倍以上 ,纯度提高 5~ 7倍 ,回收率 >90 % ,制备周期比固定柱床层析缩短一半以上。根据培养液中单抗浓度的不同 ,一次处理量为 18~ 50L ,纯化规模由实验室水平 (40 0mg)扩大至中试水平(2g) ,生产成本和工艺复杂性大为降低。应用扩张柱床吸附层析技术 ,建立单克隆抗体回收纯化工艺 ,具有经济、简便。 余晓玲 米力 姚西英 陈志南关键词:纯化工艺 单克隆抗体 培养液 抗人肝癌mAb HAb18F(ab′)_2半成品的制备与质量控制 被引量:1 2000年 目的制备符合人用标准的抗人肝癌mAbHAb18F(ab′)2 片段。方法用胃蛋白酶消化经硫酸铵盐析的腹水抗体 ,然后在快速蛋白液相色谱(FPLC)上用Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化并进行质检。结果经Phenyl SepharoseHP疏水柱纯化后 ,F(ab′)2 片段的纯度可达98.8% ;回收率大于50 % ;免疫活性为1∶8000;细菌、热原质检测均呈阴性。结论本制备工艺周期短、易于质控 ,适宜进行中试放大及半成品生产。 余晓玲 米力 陈志南 冯强关键词:抗人肝癌 单克隆抗体 连续灌流培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体 被引量:10 2002年 Hybridoma cells were cultured by continuous perfusion in Fibra-Cel of 5L packed-bed bioreactor for 22 days in low serum or serum-free media.The corresponded amino acids were fed and serum concentration was decreased by analyzing glucose concentration, oxygen uptake rate, secretary antibody amount and amino acids concentration in culture supernatant. Comparing with continuous perfusion culture that amino acids were not fed, antibody amunt of production was increased about 2~3 times. The inoculated cell density was 2.5×10 5 cells/mL,while the final cell density was 8.79×10 8cells/mL. Antibody production was reached 295mg/L/d at average level, and the highest level was reached 532mg/L/d.These results provided a primary mode of enlarge culture for monoclonal antibody industrilization. 米力 李玲 冯强 余晓玲 陈志南关键词:杂交瘤细胞 单克隆抗体 鼠源性单克隆抗体F(ab′)_(2)片段制备工艺 被引量:4 2000年 目的 制备符合临床应用质量标准的鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段 .方法 采用胃蛋白酶消化小鼠腹水抗体 ,疏水作用色谱法纯化 F(ab′) 2 片段的新工艺 ,替代原有的木瓜蛋白酶消化 Ig G,阴离子交换色谱法纯化的旧工艺 .结果 新工艺所制备的 F(ab′) 2 片段经 SDS- PAGE检测纯度达 98%以上 ,ABC免疫组化法测定免疫活性为 1∶ 80 0 0 ,回收率大于 5 0 % ,核酸含量及热原均合格 ,整个工艺流程可在 48h内完成 .结论 新工艺制备人用鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段更简便高效、安全实用 。 余晓玲 米力 陈志南 边惠洁疏水作用FPLC一步法制备级纯化抗人肝癌单抗HAb18F(ab')_2片段 被引量:10 2000年 目的 制备符合人用标准的肝癌单抗 HAb1 8F(ab') 2 片段 .方法 用胃蛋白酶消化经硫酸铵盐析的腹水抗体 ,胃蛋白酶与抗体在 p H3.5 0 .1 mol· L- 1柠檬酸条件下 ,经不同反应时间 ,收集样品 ,上 FPL C(快速蛋白液相色谱 )Phenyl- Sepharose HP疏水柱纯化并进行质检 .结果 按上述条件消化 2 h,95 %以上的 Ig G裂解为 F(ab') 2 片段 ,经Phenyl- Sepharose HP疏水柱纯化后 F(ab') 2 片段纯度可达98.8% .纯化时间仅 5 0 m in,一次制备量可达 5 0 0 mg,回收率>5 0 % ,免疫活性为 1∶ 80 0 0 ,细菌、热原质检测结果为阴性 .结论 该法操作简便 ,周期短 ,易于质控 ,是大量、快速、高产率制备 F(ab') 2 片段的有效方法 . 余晓玲 米力 陈志南关键词:纯化 FPLC 胃蛋白酶