余同
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学自然科学总论更多>>
- 牛小肠碱性磷酸酶部分性质研究被引量：8
- 2009年
- 用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶(BIAP).提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE呈现单一条带,且不含DNA核酸酶.该酶催化对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)水解反应的最适pH值为9.7,pH小于6.5大于11.5均不稳定;最适温度为45℃,高于50℃不稳定.45℃,pH 9.7时K_m值为0.29mmol/L,最大反应速度(V_(max))为4.6μmol/(L·min).利用SDS-PAGE测定酶亚基的分子量为66 kD.Mg^(2+)、Mn^(2+)和Ca^(2+)对酶有不同程度的激活作用,Zn^(2+)和EDTA对酶有抑制作用.随着Mg^(2+)、Zn^(2+)和EDTA浓度增加,270nm处紫外吸收值增加.
- 余同张营赵欣平高举杨梅强Xin-PingMei-Qiang
- 关键词：ALKALINEPHOSPHATASESDS-PAGEOPTIMUMSEPHADEXOPTIMUM最适温度
- 鲫鱼酸性磷酸酶酶学特性及不同效应物对酶活力的影响被引量：9
- 2010年
- 经NaAc-HAc缓冲液(pH5.0)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀,DEAE-32离子交换层析,SephadexG-150凝胶过滤纯化,从鲫鱼内脏中分离纯化出电泳纯的酸性磷酸酶。该酶提纯倍数为30.82,比活力195.06U/mg。研究表明,该酶催化对硝基苯磷酸二钠水解反应,最适pH4.8,pH小于4和大于7时不稳定;最适温度45℃,温度高于50℃不稳定;米氏常数为0.23mmol/L,利用SDS-PAGE测定酶亚基分子量为33.3kD。化学修饰剂SUAN、PMSF、DTT、NBS对该酶活力影响不大,BrAc和IAc有明显抑制作用。金属离子对该酶催化活力有不同影响,Na+、K+、Ni2+、Co2+影响不显著,Mg2+、Ca2+、Ba2+、Mn2+有激活作用,Ag+、Cu2+、Pb2+、Cd2+有抑制作用,其中Mg2+、Ca2+、Pb2+、Cd2对鲫鱼酸性磷酸酶荧光光谱的影响表明金属离子对酶活力的影响与酶构象改变有关。
- 高举赵欣平詹付凤张营余同
- 关键词：酸性磷酸酶化学修饰鲫鱼
- 金属离子对牛小肠碱性磷酸酶的影响被引量：3
- 2009年
- 经Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级分离沉淀,2次DEAE-32柱层析和SephadexG-150凝胶过滤,从牛小肠中得到碱性磷酸酶(ALP),提纯倍数为50.69倍,比活为48.87U/mg,酶液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测呈现单一条带。该酶催化底物对硝基苯磷酸二钠(pNPP)水解反应的最适pH值为9.7,最适温度为45℃。研究了多种金属离子对牛小肠碱性磷酸酶活性的影响,结果表明:一价金属离子Na+、K+对酶活力没有影响;不同的二价金属离子对酶的影响不同,过渡态金属离子中,Ni2+、Co2+对酶的活力影响不大,Mg2+、Ca2+、Mn2+对酶有不同程度的激活作用,Zn2+、Cu2+对酶有抑制作用;重金属离子Pb2+、Cd2+对酶的活力起抑制作用。
- 张营余同赵欣平高举
- 关键词：碱性磷酸酶金属离子
