何仰东
- 作品数：12 被引量：20H指数：3
- 供职机构：武警医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰能有效抑制SARS相关冠状病毒复制被引量：4
- 2004年
- 李阳倪兵石辛甫吴玉章王希良何仰东肖宇姜曼黎万玲
- 关键词：RNA干扰SARS冠状病毒
- MAGE-12 B细胞表位联合应用的免疫原性研究被引量：2
- 2009年
- 目的设计合成肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位并研究其表位联合应用的免疫原性。方法在MAGE-12的B细胞表位序列MAGE-123-14(LEQRSQHCKPEE)、MAGE-1282-93(QSDEGSSNEEQE)的基础上,采用4分枝多重抗原肽结构设计合成抗原肽后分MAGE-123-14组、MAGE-1282-93组、MAGE-123-14联合MAGE-1282-93组,分别以MAGE-123-14、MAGE-1282-93、MAGE-123-14联合MAGE-1282-93抗原肽免疫C-57BL/6小鼠,产生多克隆抗体,应用ELISA和免疫组化实验检测多克隆抗体是否为抗原肽的特异性抗体。结果免疫C-57BL/6小鼠后可产生MAGE-12的抗原特异性的多克隆抗体,且多表位抗原肽联合使用组抗体效价高于单表位抗原肽组产生的抗体效价。结论证明MAGE-12的B细胞多表位抗原肽联合使用的免疫原性强于单个B细胞表位抗原肽的免疫原性。
- 李艳秋吴玉章倪兵何仰东
- 关键词：B细胞表位MAGE-12ELISA
- 质粒表达型siRNA对SARS-CoV复制与感染干扰的初步研究被引量：5
- 2005年
- 目的 构建针对SARS CoV的特异性siRNA质粒 ,利用RNA干扰技术抑制该病毒复制与感染。方法 根据SARS CoV的全长基因序列 ,以 4个不同的部位为靶点 ,分别设计、合成含有 19nt干扰序列的一段寡核苷酸 ,将两两互补的寡核苷酸经退火后所形成的序列克隆到pSilencer 3 .1 H1载体中 ,构建表达siRNA的质粒。采用脂质体法将质粒转染VeroE6细胞 ,经潮霉素抗性筛选后 ,再对稳定表达的细胞进行细胞病变、病毒空斑形成和MTT实验 ,以观察干扰效应。结果 对所构建的质粒分别测序 ,确定其含有siRNA的序列与预期的特异性干扰序列一致。用不同浓度的SARS CoV感染转染质粒后的细胞 ,与阴性对照相比 ,其细胞病变减轻、活细胞显著增加 ,病毒空斑明显减少。结论 利用RNA干扰能有效的抑制SARS CoV在细胞中的复制 ,并对细胞有保护作用 ,为预防、治疗SARS提供了新的思路和方法。
- 李阳倪兵石辛甫王希良何仰东肖宇姜曼黎万玲吴玉章
- 关键词：SARS病毒RNA干扰小干扰RNA基因治疗
- SSX基因家族研究进展被引量：1
- 2005年
- SSX基因家族由9个成员组成,其中ssx-1、SSX-2和SSX-4经常出现在滑膜肉瘤t(x:18)染色体易位的SYT-SSX融合基因中。SSX基因家族可编码肿瘤/睾丸抗原,在睾丸以外的正常组织中,除甲状腺微弱表达外,没有发现它们的存在。HOM-MEL-40是最早用重组cDNA表达文库血清学分析技术确定的由SSX-2基因表达的抗原。近来的研究发现蛋白SSX-241-49是CD8+CTL免疫识别的优势表位,而SSX-237-58和SSX-219-34分别是CD4+T细胞识别相关的HLA-DR及HLA-DP限制表位。日本学者也发现SYT-SSX基因融合蛋白断裂点衍生肽是MHC工分子HLA-A24和HLA-B7限制的CTL识别的表位。所有这些研究,证明SSX基因家族编码蛋白是肿瘤免疫治疗有前景的靶标之一。
- 何仰东倪兵吴玉章
- 关键词：SYT-SSX融合基因肿瘤
- 慢性白血病抗原CML28 HLA-A*0201限制性CTL表位预测被引量：3
- 2004年
- 目的 鉴定慢性白血病肿瘤抗原CML2 8的HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位。方法 采用超基序和量化基序结合的方法初步预测CML2 8的HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位 ;利用T2细胞亲合力实验初步验证预测结果。结果 在预测的4个候选CTL表位中 ,ALVDAGVPM和ALDSDGTLV有较高的亲和力 ,ALFCGVACA和SLLACCLNA仅有低度亲和力。结论 ALVDAGVPM与ALDSDGTLV最有可能是慢性白血病肿瘤抗原CML2 8的HLA A 0 2 0
- 韩俊锋吴玉章林治华万瑛何仰东
- 关键词：肿瘤抗原CTL表位
- 中和性马抗体对SARS-CoV感染的防治作用被引量：3
- 2005年
- 目的探讨马抗SARSCoV中和性抗体是否对SARSCoV感染有防治作用。方法用SARSCoV(BJ01株)免疫马匹,从免疫马血清中制备IgGs及其F(ab’)2片段。通过细胞病变法(CPE)、MTT法和空斑形成实验(PFU)等方法,在体外培养的VeroE6细胞中检测F(ab’)2片段对SARSCoV感染的预防性和治疗性作用。再在Balb/c小鼠体内模型中,用CPE法和定量RTPCR方法检测该抗体的保护性效应。结果CPE、MTT和PFU三种方法证实来自三匹马的血清F(ab’)2的中和滴度均达到1∶1600以上。体内实验证实,50μg的F(ab’)2片段可以完全中和1×104TCID50SARSCoV。结论马抗SARSCoV抗体在体内外均能有效地中和SARSCoV和预防其感染宿主细胞,为马抗体将来在大的灵长类动物或人体内进行实验提供实验依据。
- 倪兵王希良王莉赵光宇石辛甫张松乐张良艳罗德炎黎万玲姜曼毛丽伟何仰东肖宇高闻达吴玉章
- 关键词：免疫中和抗体SARS-COV
- 体外转录制备的siRNAs对SARS-CoV复制的抑制作用
- 2005年
- 目的体外研究针对SARSCoVRNA依赖性RNA聚合酶(RNAdependentRNApolymerase,RdRp)的小干扰RNA(SmallinterferenceRNA,siRNA)对SARSCoV感染的抑制效应。方法利用Ambion公司在线设计工具,设计出4条针对RdRp基因的siRNAs,并在体外利用试剂盒进行转录合成。在SARSCoV感染前1d,将这4条体外转录的siRNAs用Lipofectamine2000试剂转染入VeroE6细胞中。感染后,每天观察感染细胞的细胞病变效应(Cytopathiceffect,CPE)。第5天,用空斑形成实验(Plaqueformationunit,PFU)检测感染细胞培养上清液中SARSCoV滴度。结果CPE结果显示,在感染后的前4d,各siRNAs均能有效地保护细胞免受感染;在第5天,4条siRNAs中有3条仍能有效保护细胞不被感染。PFU实验结果显示,在第5天,所有siRNAs转染的细胞培养上清液中,SARSCoV的滴度均显著低于阳性对照(P<0.001)。结论实验结果表明针对SARSCoV的RdRp基因的siRNAs能有效而特异地抑制该病毒在哺乳动物细胞中的复制和繁殖,提示如果应用合适的给药途径,RNAi策略可以用于体内抑制SARSCoV的感染。
- 石孝民周高标毛丽伟姜曼黎万玲何仰东吴玉章倪兵
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA
- 基于α-病毒复制酶的基因疫苗对人黑色素瘤的免疫作用
- 2005年
- 目的研究基于α-病毒复制酶的人黑色素瘤基因疫苗免疫学作用。方法建立及鉴定人/鼠嵌合模型(trim-era),将基于α-病毒复制酶的mage-3基因疫苗免疫动物,检测动物体内特异抗体滴度;用标准4h51Cr释放实验检测动物体内特异CTL活性。结果FACS分析显示,trimera小鼠腹腔细胞中人白细胞占总细胞的88·84%,脾脏细胞中人白细胞的比例占57%,同国外文献报道一致。基于α-病毒复制酶的重组基因疫苗mage-3/pSMART2a对trimera小鼠免疫后,小鼠腹腔细胞的CTL在效靶比为100∶1时杀伤率达到70%左右,此时的对照组mage-3/pCI-neo组最大杀伤率为40%左右。ELISA结果显示,重组基因疫苗mage-3/pSMART2a组产生的mage-3抗原特异性抗体效价达到1∶512,mage-3/pCI-neo组为1∶256。结论成功建立了人/鼠嵌合模型,并在动物体内激发出针对人黑色素瘤基因疫苗的初次免疫应答。
- 倪兵姜曼黎万玲毛丽伟何仰东肖宇吴玉章
- 关键词：复制酶基因疫苗人黑色素瘤
- SSX基因家族HLA-A2.1限制性CTL表位预测及其MHC-Ⅰ亲和力分析被引量：1
- 2006年
- 目的 通过对肿瘤基因SSX家族不同成员进行CTL表位预测，并对其与MHC-I亲和力进行分析，为探索基于SSX肿瘤基因家族的免疫治疗奠定基础。方法 利用基于超基序结合量化基序方案开发的HLA-A2．1限制性CTL表位预测软件，对SSX基因家族不同成员进行CTL表位预测，然后合成SSX相关待测表位肽P1（AMTKLGFKA）、P4（AMT-KLGFNV）、P5（AMTKLGFKV）和P6（VMTKLGFKV），再对这些合成肽与MHC-I结合亲和力及其结合物稳定性进行实验分析。结果与实验阳性肽（HBcAg，18～27）相比，除P1外，P4、P5、P6均显示较高的结合亲和力；而结合稳定性实验（DC50）结果显示，P1、P4与阳性对照肽（HBcAg，18～27）DC。均大于8h，而P5和P6的DC50介于2～4h之间。结论 计算机软件预测的CTL表位肽，经过体外亲和力与结合稳定性实验筛选到2条理想的表位肽，为该表位的下一步体内鉴定奠定基础。
- 何仰东吴玉章林治华贾正才姜曼黎万玲付晓岚邓一静倪兵
- 关键词：表位预测
- SSX基因家族HLA-A0201限制性CTL共同表位预测、鉴定及其交叉反应性研究
- 基于抗原表位肽的疫苗,由于其中表位肽的化学成分相对简单、稳定、容易构建、可以避免各种污染及潜在的致癌物质等方面的优势,已经成为肿瘤免疫治疗研究的主要策略之一。目前这种疫苗形式中的抗原表位肽主要是来源于肿瘤//睾丸抗原/(...
- 何仰东
- 关键词：HLA-A2限制性表位预测免疫原性
- 文献传递
