丘凌
- 作品数:4 被引量:14H指数:2
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- CD8^+T细胞依赖的急性移植物抗宿主病小鼠模型的建立
- 2006年
- 目的建立CD8^+T细胞依赖的急性移植物抗宿主病(GVHD)小鼠模型。方法分别以主要组织相容性抗原(MHC)相同,而次要组织相容性抗原(miHAs)不同的8~12周龄C3H.SW(H-2D^b,CD45.2^+)和B6/SJL(H-2D^b,CD45.1^+)雌性小鼠为供受体,从供体骨髓分离去除T细胞的骨髓细胞(T BM),与其脾脏和淋巴结来源的CD8^+T细胞混合,经尾静脉输注给受致死剂量^(137)γ照射的受体鼠。观察移植后受体的体重、毛色、皮肤和生存率的变化,并用流式细胞术(FACS)和组织病理学进一步分析受鼠靶器官细胞浸润和损伤状况。结果移植后受体鼠出现体重明显减轻、毛发脱落、皮肤溃疡等表现,并在28d后出现死亡;FACS证实浸润受鼠骨髓、脾脏和肝脏的细胞主要为CD45.2^+的供鼠细胞,实验组中还有大量CD45.2^+CD8^+T细胞浸润;组织病理学发现肝脏中大量淋巴细胞浸润,皮肤结构破坏,组织坏死。结论成功建立了miHAs不匹配的异基因骨髓移植诱导的CD8^+ T细胞依赖的GVHD动物模型,该模型模拟了目前临床病人采用的同种异基因骨髓移植配型方式,可为异基因骨髓移植GVHD发病机理及该病的防治研究提供良好的实验平台和工具。
- 丘凌何珊曹琦张雁云黄瑞
- 关键词:CD8^+TCELL
- 趋化性细胞因子MIP-1α促小鼠外周血DC前体细胞动员的实验研究被引量:9
- 2005年
- 抗MIP-1α抗体可以阻断P.acnes对DC前体细胞的动员作用。对C57BL/6J(B6)小鼠静脉直接注射MIP-1α,24h后在B6小鼠外周血中F4/80-B220-CD11c+细胞明显增多,占外周血单个核细胞(PBMC)13.47%±1.4%。新鲜分离的F4/80-B220-CD11c+细胞不具有成熟DC的特征,经过细胞因子GM-CSF、IL-4和mTNF-α体外培养7d后的F4/80-B220-CD11c+细胞呈现树突状突起并形成细胞团簇,高度表达Ia、CD11c、DEC205、CD80、CD86,中度表达CD40,不表达CD8α、F4/80表面标志,并具有极强的刺激异源性T细胞增殖的能力。总之,研究表明趋化性细胞因子MIP-1α参与调节DC前体细胞的动员,并且注射MIP-1α可以直接迅速动员F4/80-B220-CD11c+DC前体细胞进入小鼠外周血。实验首次提出了用趋化性细胞因子MIP-1α动员DC前体细胞进入外周血的思路和实践,为体外获取大量功能正常的DC开辟了新的便捷途径。
- 吴雨岗汪良丘凌何宋兵杨桂林万兵张雁云
- 关键词:树突状细胞MIP-1Α动员
- 同种记忆性CD8^+T细胞与移植物抗宿主病相关性的研究被引量:1
- 2007年
- 目的用同种异基因骨髓移植诱导小鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)模型,研究GVHD与同种记忆性CD8^+T细胞的关系。方法供鼠C3H.SW(H-2D^b,CD45.2^+)和受鼠B6/SJL(H-2D^b,CD45.1^+),两者MHC抗原均为H-2D^b,但供受鼠之间miHAs有差异。小鼠致死剂量辐照后移植供鼠T^-BM+ CD8^+T细胞,构建CD8^+T细胞依赖的GVHD模型。观察受鼠体重和生存率变化;流式细胞仪检测受鼠肝脏和脾脏中供鼠来源CD8^+T细胞的浸润数、分泌INF-γ的效应CD8^+T细胞数和与凋亡相关的annexin V分子在CD8^+T细胞的表达情况。结果建立的CD8^+T细胞依赖的致死性急性GVHD小鼠模型,移植后小鼠体重显著下降并有大幅波动,其变化与分泌INF-γ的CD8^+T细胞数量成反比。移植后28d小鼠逐渐出现死亡,70d时死亡率达58%(7/12)。随着GVHD病程的进展,供鼠CD8^+T细胞表现出典型的记忆性T细胞应答的过程,即扩增、凋亡紧缩和残存T细胞的再扩增;分泌INF-γ的效应性CD8^+T细胞也表现出同样的变化;细胞表面凋亡相关分子的表达显示CD8^+T细胞的减少与凋亡的发生有关。结论在模拟目前临床病人采用的同种异基因骨髓移植配型方式的同种异基因骨髓移植小鼠模型中,供者来源的效应性记忆性CD8^+T细胞数量的波动与记忆性T细胞产生过程中数量的变化关系极为密切、受鼠的体重变化与效应性CD8^+T细胞浸润数量的波动成反比的现象说明,在GVHD发生过程中有抗原特异性记忆性CD8^+T细胞形成。
- 丘凌何珊曹琦张雁云黄瑞
- 关键词:骨髓移植CD8^+T细胞
- 荧光染料CFSE检测淋巴细胞增殖的研究被引量:4
- 2005年
- 目的 评价荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)用于淋巴细胞及其亚群增殖状况追踪的效果。方法 利用荧光染料CFSE作为细胞标记,结合荧光标记的抗体,通过流式细胞仪检测淋巴细胞及其亚群体外增殖情况。结果该方法不仅可以测定淋巴细胞及其亚群的增殖情况,而且可以估算细胞分裂的周期。结论 荧光染料CFSE是一种可以监测淋巴细胞及其亚群增殖状况的很好的示踪剂。
- 丘凌何珊黄瑞张雁云
- 关键词:流式细胞仪淋巴细胞增殖