黄晓敏
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：广州医学院实验医学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同细胞中STAT元件对刺激因子的特异性应答被引量：1
- 2012年
- 以高通量药物筛选为目的,构建转录因子STAT元件驱动的萤火虫荧光素酶报告载体,并进行功能初步验证.人工合成含IRF-1和C-FOS基因上游调控序列中的2个STAT元件的DNA片段,克隆于pGL3-promoter报道质粒作为报道载体pSTAT-luc;为检测其对不同有效因子刺激的反应性,该报道载体与荧光内参照载体pRL-SV40瞬时共转染不同细胞,在各种因子刺激条件下,双荧光素酶检测系统测定化学发光强度.结果显示,pSTAT-luc的报道基因载体符合预期设计;该载体转染细胞实验显示,在STAT途径阳性的HeLa、A549和MCF-7细胞中,特异刺激因子INF-γ和抑瘤素OSM处理能够剂量依赖性的引起细胞内萤火虫荧光素酶的升高;在STAT途径阴性的PC-12细胞,上述因子不能引起荧光素酶的活性改变;以非该途径因子刺激时,HeLa、A549和MCF-7细胞未见发光水平的改变.结果表明,构建的报道系统具有阳性细胞反应特异性以及阳性刺激-反应特异性,能够用于建立靶向STAT信号通路的高通量药物筛选平台.
- 黄晓敏李冰
- 关键词：Γ-干扰素
- 不同细胞中STAT元件对刺激因子的特异性应答
- 以高通量药物筛选为目的,构建转录因子STAT元件驱动的萤火虫荧光素酶报告载体,并进行功能初步验证。人工合成含IRF-1和C-FOS基因上游调控序列中的2个STAT元件的DNA片段,克隆于pGL3-promoter报道质粒...
- 黄晓敏李冰
- 关键词：信号转导子转录激活子Γ-干扰素
