黄晓丹 作品数:6 被引量:21 H指数:2 供职机构: 南方医科大学 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
雷奈酸锶通过TGF-β_1/Smad通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 被引量:9 2013年 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路在雷奈酸锶(strontium ranelate,Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:在大鼠BMSCs向成骨细胞的诱导分化过程中,用Sr处理细胞,用Western blotting法检测磷酸化Smad2(phosphorylated Smad2,p-Smad2)和Runx2的表达。用TGF-β1特异性阻断剂SB431542或Smad2小干扰RNA(Smad2-siRNA)预处理BMSCs后加入Sr,再观察p-Smad2和Runx2表达的改变。应用试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及钙结节水平。结果:在大鼠BMSCs向成骨细胞的诱导分化过程中,Sr可增加p-Smad2和Runx2的表达,Sr浓度为1 mmol/L、作用1 h时,p-Smad2表达最多;Sr浓度为1 mmol/L、作用5 d时,Runx2表达最多;用SB431542或Smad2-siRNA预处理BMSCs后再加入Sr,不仅可以抑制p-Smad2和Runx2的表达,且ALP活性与钙结节数量也受到明显的抑制。结论:Sr可通过TGF-β1/Smad通路促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化。 黄晓丹 吕辉珍 靳思思 郭润民 吴文关键词:雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 转化生长因子Β 雷奈酸锶通过骨形态发生蛋白-2/Smad通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量:13 2013年 目的探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)/Smad通路在雷奈酸锶(Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为成骨细胞过程中的作用。方法体外分离培养大鼠BMSCs,根据实验目的加入不同浓度Sr、BMP-2的拮抗剂noggin及Smad1小干扰RNA(SiRNA)。酶标法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红染色检测钙结节,Western blotting法检测磷酸化Smad1/5/8及Runt相关转录因子-2(Runx2)蛋白的表达。结果应用0.1~10 mmol/L Sr处理BMSCs细胞1 h后,细胞内磷酸化Smad1/5/8表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用BMP-2拮抗剂noggin预处理细胞2 h能抑制Sr对磷酸化Smad1/5/8表达的上调作用;应用0.1~5 mmol/L Sr处理细胞6 h后,细胞内Runx2表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用Smad1 SiRNA转染细胞后能下调Smad1/5/8、磷酸化Smad1/5/8的表达,并抑制Sr对Runx2表达的上调作用,还拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用。结论 BMP-2/Smad通路参与了Sr促进BMSCs成骨分化。 吕辉珍 黄晓丹 靳思思 郭润民 吴文关键词:雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白-2 小RNA干扰 SMAD1 SWI/SNF复合体基因突变促进NSCLC细胞在NSI小鼠体内肝转移的研究 2023年 背景与目的SWI/SNF复合体(switch/sucrose nonfermentable chromatin-remodeling complex,SWI/SNF)是一种重要的染色质重塑复合物,其亚基变异在多种肿瘤中存在,并与多种肿瘤细胞生物学特征相关。但其基因突变是否参与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)肝转移过程尚不清楚。本研究拟探究SWI/SNF复合体基因突变对NSCLC肝转移的影响及潜在机制。方法我们使用全外显子组测序(whole-exome sequencing,WES)分析了NSCLC细胞H1299、H23和H460中SWI/SNF复合体基因突变。通过CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)技术构建了ARID1A基因稳定敲除的H1299细胞株,建立了小鼠模型模拟NSCLC肝转移,观察不同基因突变对肝转移的影响。利用RNA-Seq和蛋白印迹分析差异基因的表达,并通过免疫组化技术(immunohistochemistry,IHC)检测了SWI/SNF复合体调控的靶分子在小鼠肝转移灶中的表达。结果WES分析确定了SWI/SNF复合体基因的突变情况。动物实验结果显示SWI/SNF复合体基因突变与免疫缺陷小鼠较高的肝转移率相关。转录组测序和蛋白印迹分析显示SWI/SNF复合体基因突变细胞中ALDH1A1和APOBEC3B表达上调,尤其是ARID1A蛋白缺失的H460和H1299 sgARID1A中ALDH1A1表达水平显著上升。IHC染色亦显示H460和H1299 sgARID1A细胞肝转移灶中ALDH1A1高表达。结论本研究强调了SWI/SNF复合体基因ARID1A和SMARCA4等突变在促进肺癌细胞肝转移中的关键作用。这些基因突变可能通过促进ALDH1A1与APOBEC3B高表达进而发挥肝特异性转移的作用,为深入探究肺癌肝转移分子机制提供了新线索。 高玲玲 谢至 林首恒 吕志异 周文斌 陈冀 朱琳琳 张莉 张莉 黄晓丹 颜文青 黄晓丹 卢丹霞 张水莲 陈宇 李鹏 张绪超关键词:肺肿瘤 突变 肿瘤转移 SHP2靶向抑制对KRAS突变肺癌细胞炎症相关基因表达的影响分析 2023年 目的 探究Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶(Src homology region 2-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP2)抑制剂对KRAS突变肺癌细胞中炎症相关基因表达的调节作用,旨在为KRAS突变肺癌治疗的个体化和精准化提供依据。方法 使用SHP2抑制剂SHP099处理5株KRAS突变的人肺癌细胞系,western blot分析ERK1/2等信号通路蛋白活化水平。采用RNA测序分析药物或DMSO作用后配对样本基因表达情况,对差异表达基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析揭示功能通路富集情况。采用RT-qPCR验证差异基因相对表达水平。结果 SHP2抑制剂处理后,KRAS突变肺癌细胞中的p-SHP2和p-ERK1/2表达水平显著下调。转录组测序和差异基因分析显示,SHP2靶向抑制改变了多个信号通路基因的表达,特别是白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)通路相关的CXCL1、CXCL2、CXCL8、MMP1、PTGS2等炎症相关基因表达受到显著下调。结论 SHP2靶向抑制可影响KRAS突变肺癌细胞的IL-17信号通路炎症相关基因表达情况,为进一步阐述靶向SHP2调节肺癌免疫微环境提供了初步证据。 周文斌 高玲玲 陈冀 曾鹏辉 张莉 朱琳琳 朱琳琳 颜文青 陈宇 黄晓丹 郭伟浜 陈宇 吕志异 卢丹霞 张绪超关键词:炎症 雷奈酸锶通过骨形态发生蛋白-2/Smad通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化 目的探讨骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)/Smad通路在雷奈酸锶(strontium ranelate,Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchy... 吕辉珍 黄晓丹 靳思思 郭润民 吴文雷奈酸锶通过TGF-β1/Smad通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 研究目的:骨质疏松症是一种以骨量低下、骨微结构破坏,导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的系统性、全身性骨病。在老年人群及绝经后妇女中骨质疏松发病率很高,严重影响了生活质量。据统计,60岁以上老年人中,患此症的比例达60%~... 黄晓丹关键词:雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 转化生长因子 成骨细胞分化 骨质疏松症