郑红
- 作品数:14 被引量:164H指数:9
- 供职机构:中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 1996年延边地区无菌性脑膜脑炎病因病毒的分离及初步鉴定被引量:11
- 1998年
- 吉林省延边地区1996年6月发生无菌性脑膜脑炎流行,在全地区216万人口中,发病人数约5~6千人,死亡2人,为历史上所罕见。从病人脑脊液和粪便标本中分离到多株病毒,分离率较高(分别达到52.4%和66.7%)。用WHO提供的RIVM肠道病毒组合血清进行中和定型,不能确定型别。RT-PCR结果表明为肠道病毒。病人早期血清特异性IgM抗体阳性率72.0%,证明所分离的病毒为此次无菌性脑膜脑炎暴发流行的病因。此病毒为肠道病毒,有可能是肠道病毒的一个新型别或变异株。
- 陈立李玉雨郑红李主宣李杰李主宣李杰李英信方勇祝双利李英信
- 关键词:无菌性脑膜脑炎肠道病毒RT-PCR
- 中国脊髓灰质炎病毒疫苗株基因特征及其神经毒力的初步观察被引量:12
- 1997年
- 中国脊髓灰质炎(脊灰)病毒疫苗株普遍存在基因变异的现象,如重组、点突变等〔1〕。我们选出10株有代表性的变异株,在具有人脊灰病毒受体基因的转基因小鼠PVR-Tg21〔2〕中做毒力分析,发现Sabin1基因型(VP1)与野毒基因型(3D)的重组株显示很强的神经毒力,其PD50inTCID50(简称PD50)值为4.5,而Sabin1标准株的PD50值大于8.0。另外两株Ⅰ型疫苗株只在关键性核苷酸位点发生突变,只在位点525-U发生突变的一株,其PD50值为5.0,另一株在位点480-G及2795-A突变,其PD50值为5.8,均显示较强的神经毒力。一株Sabin2基因型(VP1)与Sabin3基因型(3D)的重组株,其神经毒力(PD50≥5.9)亦明显高于Sabin2标准株(PD50>7.5);而1株Sabin2基因型(VP1)与(Sabin1+Sabin2)基因型(3D)重组株的神经毒力(PD50=7.50)无明显提高。对Ⅲ型疫苗株的神经毒力分析发现,1株Sabin3基因型(VP1)与Non-Sabin基因型(3D)重组株的神经毒力,高于仅在核苷酸位点472-U突变的一株疫苗株。值得提出的是,另一株Ⅲ型疫苗?
- 李杰米山彻夫张礼壁侯晓辉侯晓辉方勇郑红荻原昭夫
- 关键词:基因特征神经毒力
- 非同位素标记探针在脊髓灰质炎病毒型内鉴别中的应用
- 1993年
- 以脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型2500~2600碱基区域(病毒VP1氨基末端)为目的基因片段,人工合成了寡核苷酸引物和探针。以Digoxigenin-11-dUTP代替^(32)P-dATP,建立了Digoxige-11-dUTP末端标记寡核苷酸探针,以及在PCR过程中Digoxigenin-11-dUTP直接掺入扩增产物制备探针的方法,并将探针应用于分离的脊灰野毒株和疫苗相关株的鉴别诊断。Digoxigenin末端标记探针和掺入PCR探针均具有型特异性,用于鉴别我国部分地区分离的脊灰毒株的结果表明,Ⅰ型分离株中90%为野毒株,Ⅱ、Ⅲ型分离株均为疫苗相关株,说明我国近年引起脊灰暴发的仍以Ⅰ型野毒株为主。探针可检测至少10~2~10~3TCID_(50)/ml样品。与同位素标记探针敏感性一致。在PCR过程中直接掺入Digoxigenin标记探针,不需纯化,大大简化了操作步骤,提高了标记效率。Digoxigenin标记探针敏感、特异,对人体无害,不受同位素半衰期影响,可回收反复使用;操作简单,出结果快,易于判断,适合在我国推广使用。
- 马静雅郑红孙立连李杰谭文杰张礼璧
- 关键词:脊髓灰质炎病毒
- 中国脊髓灰质炎病毒中Ⅱ_(17)和中Ⅲ_2疫苗株部份基因序列的分析被引量:3
- 1994年
- 对中国脊髓灰质炎Ⅱ型减毒活疫苗株──中Ⅱ17和Ⅲ型减毒活疫苗株──中Ⅲ2的VP1段部份核酸片段进行序列分析,并分别与相应的Sabin2和Sabin3株有关片段的核苷酸序列进行比较。在416个核苷酸序列中,中Ⅱ17与Sabin2有99.3%同源性,中Ⅲ2与Sabin3株完全一致。从我国服用国产活疫苗地区急性弛缓性麻痹病例中分离到的部份2型疫苗株,分别与中Ⅱ17和Sabin2相比较,发现与中Ⅱ17株更为近缘,海南、山东、湖南株分别只有0、1或2个核苷酸的改变。
- 张礼璧原稔米山彻夫郑红荻原昭夫
- 关键词:脊髓灰质炎减毒活疫苗病毒
- 在江苏省发现曾有Ⅰ型脊髓灰质炎疫苗衍生病毒在自然界循环被引量:21
- 2001年
- 目前我国已通过了世界卫生组织 (WHO)西太平洋区关于中国无脊髓灰质炎 (脊灰 )的认证。但近几年在实验室监测中发现了为数不少的脊灰疫苗相关株病毒。经逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)、限制性酶切片段长度多态性分析 (RFLP)和核苷酸序列分析证实 ,在我国存在不同型别脊灰疫苗衍生株间的重组病毒 ,以及同一型别脊灰疫苗株病毒基因组核苷酸序列的差异。最近从江苏省 1996年和 1998年的急性弛缓性麻痹病例粪便标本中 ,各分离到 2株Ⅰ型脊灰病毒 ,经鉴定 ,这 4株病毒均为同源Ⅰ型脊灰疫苗的衍生株病毒。证明江苏省曾有Ⅰ型脊灰疫苗衍生株病毒在自然界循环。
- 侯晓辉张礼璧冷红英张勇郑红方勇
- 关键词:脊髓灰质炎野病毒强化免疫核苷酸序列分析
- PCR-RFLP法在鉴别脊髓灰质炎野毒和疫苗株的应用被引量:2
- 1994年
- PCR-RFLP法在鉴别脊髓灰质炎野毒和疫苗株的应用中国预防医学科学院病毒学研究所(100052)张礼璧,李杰,原稔,郑红,侯晓辉,陆群,方勇BALANANT[1]设计了用一对引物扩增脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒基因VP1片段中的约480个核苷酸片段,...
- 张礼璧李杰原稔郑红侯晓辉陆群方勇
- 关键词:脊髓灰质炎野毒株疫苗株RFLP
- 全文增补中
- 脊髓灰质炎疫苗重组株病毒在我国的循环及其致病性被引量:90
- 2001年
- 我国自 1994年 10月以后已无脊髓灰质炎 (脊灰 )本土野病毒引起的病例。现在从急性弛缓性麻痹病例粪便标本中分离到的脊灰病毒都是 3个血清型的疫苗衍生株 ,并以Ⅱ型为主。近几年每年Ⅱ型分离株的数量均多于同年Ⅰ型株加Ⅲ型株之和。 1997~ 1999年从贵州、云南省分离到的Ⅱ型疫苗株中 ,除了疫苗变异株外 ,还发现了不同血清型间的重组株 ,如VP1片段来自SabinⅡ ,而 3D片段分别来自SabinⅢ (S2 ×S3 )和SabinⅠ (S2 ×S1) ,它们的基因序列与脊灰疫苗株SabinⅡ型有差异。能从未服苗儿童的粪便标本中分离到这类毒株 ,表明在外环境中有这类毒株在循环。这些毒株可以致病 ,其致病性与该儿童是否接受了疫苗全程免疫有很大的相关性。重组株的发现提示我们 ,它们在自然环境中已有循环。从贵州省Ⅱ型病例发生时间和区域上看 ,病例有聚集分布的趋势 ,但目前尚处于小范围的循环中 ,其原因与对策有待进一步研究。
- 张礼璧侯晓辉朱晖郑红叶绪芳徐闻李杰
- 关键词:脊髓灰质炎病毒
- 中国脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的PCR-RFLP法分析被引量:9
- 1994年
- 近年来我国流行地区分离的脊髓灰质炎病毒多为Ⅰ型野毒。本文报导对我国一些省、自治区防疫站从急性驰缓性麻痹病人粪便中分离的77株Ⅰ型野毒株,经PCR-RFLP法分析结果,发现不同地区分离的野毒株在电泳图像上有明显差异。根据电泳图像所显示的三种酶切条带的数目,可分为14个类型,而且同一省、自治区内不同地区(如新疆),或同一地区不同年份(如广东)的毒株也存在着明显差异。但在某些相邻省份如广东省与海南省,92年流行毒株电泳图像完全一致。说明本法虽不如核酸序列分析精确,但在一定程度上也能反映毒株间的差异,有助于说明流行株的亲疏关系,可用于研究毒株的分子流行病学。
- 张礼壁李杰原稔郑红侯晓辉陆群方勇吉仓广
- 关键词:脊髓灰质炎病毒RFLP
- 用蚀斑抑制试验研究中国脊髓灰质炎Ⅰ型流行毒株的株间差异被引量:1
- 1993年
- 利用株特异性的抗Sabin-I株与抗Brunhilde株的豚鼠免疫血清进行蚀斑抑制试验,以研究Polio-I型毒株的型内差异。对国内近年分离株的分析结果表明,Sabin-I疫苗株抗体对不同地区流行株的中和效果有明显差异,对徐州与云南流行的野毒株的中和效果较好,只需160单位(中和单位)的抗体即可达到80%的抑制率,而对山东、广西两暴发流行区的野毒株,则需1280才能抑制80%,相差8倍。对北京地区野毒株的抑制率介于上述两类毒株之间,与对Mahoney株的抑制率相近似。该方法以测中和抗体为基础,但比常规中和试验法更精确,是一种简便、客观、有效的研究型内差别的分析手段,具有重要的理论和实际意义。
- 谭文杰张礼璧马静雅郑红
- 关键词:脊髓灰质炎
- 我国脊髓灰质炎Ⅰ型野病毒JX基因型特异RNA探针及其应用
- 1998年
- 及时发现脊髓灰质炎(脊灰)野病毒,是消灭脊灰工作中病毒学监测的首要任务。近期我国存在4个脊灰Ⅰ型野病毒基因型,其中P1/CHN-JX89和P1/CHN-R91为两个主要的流行基因型。在分析了我国大量脊灰野病毒VP1核酸序列的基础上,选取了1338JX89病毒VP15′端的96个核苷酸片段(2480-2575),经PCR扩增,克隆至pUC/T7质粒,线性化后,用T7RNA多聚酶制备RNA探针,并将Dig标记物渗入探针分子中。经杂交试验,两个主要基因型病毒全部与此探针呈阳性反应,而其它基因型和疫苗相关病毒均为阴性反应,体现了较好的特异性与敏感性,而且实验结果由核酸序列分析等证实。脊灰野毒探针的应用在国际上尚未见报道,它克服了疫苗探针杂交中容易遗漏野毒株的缺点,直接查出野病毒。这对疫苗株中混有少量野毒株的分离物有重要意义。
- 郑渡平朱宏郑红张礼璧
- 关键词:RNA探针脊髓灰质炎