费嫦
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:湖南医药学院检验医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 重组腺病毒AdE-SH2-Caspase8对耐伊马替尼的K562/G01细胞凋亡的影响被引量:1
- 2015年
- 目的:研究表达融合蛋白SH2-Caspase 8的重组腺病毒Ad E-SH2-Caspase 8-HA-GFP(SC)对BCR/ABL阳性的耐伊马替尼的K562/G01细胞凋亡的影响。方法:K562/G01细胞经重组的腺病毒SC感染后,分别设突变Ad E-SH2m-Caspase 8-HA-GFP(Sm C)组、病毒空载Ad EGFP(CM V)组和PBS对照组。荧光显微镜和流式细胞仪(FCM)检测病毒感染效率,Western blot检测融合蛋白SH2-Caspase 8-HA的表达水平,光学显微镜观察经瑞氏染色后的细胞形态,FCM和DNA梯度电泳检测细胞凋亡情况,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase3和PARP的表达水平。结果:重组腺病毒在K562/G01细胞中的感染效率较高;Western blot能检测到目的蛋白SH2-Caspase 8-HA的表达;与对照组比较,瑞氏染色后SC组出现明显的凋亡形态改变,FCM检测结果表明SC组早前凋亡细胞明显增高(P<0.05),DNA梯度电泳检测结果发现SC组出现明显细胞凋亡特异性的梯度条带,Western blot结果表明SC组凋亡相关蛋白Caspase 3、PARP活化片段的表达水平升高。结论:重组腺病毒SC表达的SH2-Caspase 8融合蛋白能明显诱导K562/G01细胞的凋亡。
- 王林王林费嫦黄峥兰李会刘张玲
- 关键词:细胞凋亡BCR-ABL融合蛋白SH2结构域
- 人siALK2重组腺病毒的构建及其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭的影响被引量:2
- 2013年
- 用前期设计并合成好的重组腺病毒质粒pAdsiALK2,经Pac I酶切后转染至HEK293细胞进行包装,制备重组腺病毒,扩增后进行病毒滴度测定,以重组腺病毒siALK2(AdsiALK2)感染MDA-MB-231细胞,以含RFP的腺病毒作为感染对照,并设空白对照组。通过RT-PCR验证MDA-MB-231细胞中ALK2表达显著下降;MTT法、平板集落形成试验、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验证实MDA-MB-231/siALK2组相比MDA-MB-231/RFP组细胞的增殖活力、集落形成率及划痕愈合率均显著降低(P<0.05),穿膜细胞数也明显减少(P<0.05),而MDA-MB-231/RFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。该研究表明,下调ALK2表达后可以在体外抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭。
- 费嫦王林孙笑笑刘月红万绍恒王维陈莹莹王婷张彦
- 关键词:重组腺病毒乳腺肿瘤细胞增殖细胞运动肿瘤浸润
- 人siALK2重组腺病毒的构建及其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外增殖、迁移和侵袭的影响
- 目的:构建人siALK2(hsiALK2)重组腺病毒;探讨hsiALK2对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭能力的影响。为ALK2功能的深入研究奠定基础。 方法:用前期设计并合成好的重组腺病毒质粒pAds...
- 费嫦
- 关键词:乳腺癌重组腺病毒细胞增殖细胞转移