许泓瑜
- 作品数：40 被引量：356H指数：11
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金无锡市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 中温α-淀粉酶高产菌株的选育及其粗酶性质被引量：4
- 2011年
- 以从自然界中筛选的野生芽孢杆菌XLG-1为出发菌株,通过紫外线诱变及紫外线-氯化锂复合诱变筛选出高产中温α-淀粉酶的优异菌株XLG-51,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。初步研究了其所产的α-淀粉酶的酶学性质:通过SDS-starch-PAGE电泳与酶谱分析得该酶分子质量为60 ku左右,最适作用温度为60℃,最适作用pH范围为5.0～6.5,且在最适条件下具有较强的稳定性。以该菌株为生产菌进行5 L罐发酵实验,产酶达5298 U/mL。
- 李文秀张旦旦窦文芳许泓瑜许正宏史劲松陆震鸣
- 关键词：枯草芽孢杆菌Α-淀粉酶诱变
- 搅拌转速和通气量对灰树花深层发酵培养的影响被引量：12
- 2006年
- 采用15 L搅拌式发酵罐研究灰树花的扩大培养条件,主要考察了搅拌转速和通气量对灰树花菌丝量、胞外多糖产率、溶氧、菌丝形态以及发酵液粘度的影响.研究结果表明搅拌转速和通气量能显著影响灰树花的生长,并且通过对灰树花菌丝球的大小、形态以及胞外多糖的分泌影响发酵液的粘度.并得出较为优化的培养条件为:温度25℃,通气量0.75 vvm,搅拌转速80 r/min,装液量60%;在此条件下,发酵10 d后,灰树花菌丝体最大得率为22.95 g/L,胞外多糖的得率为1.521 g/L。
- 崔凤杰陶文沂许泓瑜许正宏敖宗华
- 关键词：灰树花搅拌转速
- 融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究被引量：1
- 2013年
- GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH类似物的基因片段,以pPIC9K为表达质粒构建了重组表达质粒,将双酶切和测序验证正确的重组质粒电转至分泌型菌株毕赤酵母GS115,然后经过MD平板筛选获得转化子,利用甲醇诱导表达72 h,SDS-PAGE检测上清产物与未修饰的GGH对比,得到阳性转化子。融合蛋白经过发酵液8 000 r/min离心10 min,0.45μm的微孔滤膜微滤,采用截留分子量为10 kD的超滤膜超滤20倍,再依次经过Blue Sepharose 6 Fast Flow、Phenyl Sepharose Fast Flow、Q Sepharose Fast Flow、Sephadex G-25层析柱。在RINm5f细胞上测cAMP的生成,通过与阳性对照的标准曲线对比发现,A-GGH活性比GGH提高10倍,表现出较好的体外活性。
- 冯均尚窦文芳张晓梅许泓瑜史劲松许正宏
- 关键词：类似物毕赤酵母纯化活性
- 运用多元数学模型优化灰树花发酵培养基组成的研究被引量：34
- 2006年
- 利用BoxBehnken3×3设计优化了影响灰树花深层发酵菌丝体和胞外多糖生产的主要培养基组成,碳源(葡萄糖)、氮源(蛋白胨)和无机盐(KH2PO4),响应面分析结果表明,各因素及其交互作用对响应值灰树花菌丝体和胞外多糖产量均存在显著的相关性。通过典型性分析,获得最大菌丝体量(17.61g/L)时,培养基组成为:葡萄糖45.2g/L,KH2PO42.97g/L,蛋白胨6.58g/L,MgSO4·7H2O1g/L和玉米浆15g/L;而获得最佳胞外多糖量(1.326g/L)时的培养基组成为:葡萄糖58.6g/L,KH2PO44.06g/L,蛋白胨3.79g/L,MgSO4·7H2O1g/L和玉米浆15g/L。与其他实验组的结果相比,优化后的灰树花菌丝体与胞外多糖的量都有较大的增加。15L发酵罐扩大培养的结果表明,在优化培养基组成的条件下,扩大培养后的菌丝体产量最大值达22.50g/L。
- 崔凤杰许泓瑜许正宏敖宗华陶文沂
- 关键词：灰树花深层发酵培养基优化响应面
- 玉米芯木聚糖硫酸酯抗凝血活性及其机制的研究被引量：7
- 2006年
- 采用活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT)检测了玉米芯木聚糖硫酸酯(wisX-SB)的抗凝活性,结果表明wisX-SB能明显延长APTT和TT,而不影响PT,提示wisX-SB是通过内源性和/或共同途径发挥抗凝血作用的。采用发色底物法及纤维蛋白原转化实验分别考察了wisX-SB对凝血酶及纤维蛋白原的作用,结果提示wisX-SB的抗凝机制包括:直接抑制纤维蛋白原的转化;通过增强抗凝血酶III(AT-III)的活性,抑制凝血酶活性,从而达到抗凝目的。较低浓度时以前者为主,较高浓度下两者皆起作用。
- 许泓瑜韩亮许正宏
- 关键词：玉米芯木聚糖硫酸酯抗凝血
- 不同搅拌速度对松口蘑菌丝体发酵的影响被引量：2
- 2005年
- 在摇瓶发酵条件优化的基础上,研究了松口蘑在25L搅拌式发酵罐上的分批放大实验,探讨了不同搅拌转速对菌丝生物量、生产强度、pH、溶氧及对菌丝形态的影响,在发酵温度25℃,通风量0.8vvm,罐压0.5kg/cm2的条件下,最佳搅拌转速为100r/min。发酵培养8d后,发酵液由浑浊变为澄清,上清液亮黄色,菌丝形态呈均匀颗粒状,菌丝生物量增加趋于平缓,最高可达11.5g/L。
- 魏元青许正宏许泓瑜张宏斌陶文沂
- 关键词：松口蘑深层发酵搅拌转速搅拌速度菌丝生物量发酵条件优化
- 提高重组表达体系相对活性促进外源蛋白表达:人干扰素毕赤酵母表达体系研究被引量：1
- 2011年
- 以毕赤酵母KM71/IH的hIFNβ-HAS表达体系为研究对象,较为系统地研究了不同因素引起的细胞相对活性变化与毕赤酵母外源蛋白表达的相关性。结果表明:(1)细胞相对活性变化与外源蛋白的表达成正相关;(2)处在对数生长中后期的细胞相对活性最高,更适合用于外源蛋白的表达;(3)诱导阶段的环境因素直接影响诱导期细胞相对活性,合适的甲醇浓度、诱导pH及温度是维持细胞高活性,促进外源蛋白高表达的关键。对于hIFNβ-HAS表达体系最佳诱导条件为:以培养21～24h的细胞为诱导种子,初始甲醇浓度为2%(V/V),pH6.0,25℃,细胞活性维持在98%以上,hIFNβ-HSA表达量高达45.6mg/L,较优化前提高了62.3%。
- 窦文芳张旦旦许泓瑜金坚许正宏史劲松陆震鸣
- 关键词：毕赤酵母
- 运用多元数学模型优化灰树花发酵培养基组成的研究
- 本文利用Box-Behnken 3×3设计优化了影响灰树花深层发酵菌丝体和胞外多糖的生产的主要培养基组成碳源(葡萄糖)、氮源(蛋白胨)和无机盐(KHPO),响应面分析结果表明,各因素及其交互作用对响应值灰树花菌丝体和胞外...
- 崔凤杰许泓瑜许正宏敖宗华陶文沂
- 关键词：灰树花深层发酵培养基优化响应面
- 文献传递
- 六味地黄汤对雄性大鼠生殖系统的影响被引量：22
- 2004年
- 目的 :研究六味地黄汤对雄性大鼠生殖系统的作用。方法 :用醋酸棉酚建造大鼠生精障碍模型后 ,用六味地黄汤(分煎与合煎 )ig治疗 ,以市售品成药和甲基睾酮作为对照和阳性对照 ,计数各实验组大鼠的精子数量 ,考察各实验组大鼠精子的质量 ,观察睾丸曲细精管的结构 ,检测血清NO、T、FSH、LH水平。结果 :六味地黄汤治疗组大鼠的精子数量与模型组有显著差异 (P <0 .0 1 ) ,并高于阳性对照组 ;精子活力也显著优于模型组 ;模型组大鼠血清的NO、T均低于六味地黄汤治疗组。结论 :六味地黄汤可显著地促进生精障碍大鼠的精子发生 ,同时可显著提高精子的质量 ;对损伤的睾丸曲细精管有较好的修复作用 ;可提高模型大鼠血清的NO、LH和T水平 。
- 凌庆枝敖宗华许泓瑜许正宏尹光耀陶文沂
- 关键词：六味地黄汤雄性大鼠精子一氧化氮生殖激素
- 六味地黄汤对生精障碍模型大鼠精子及其血清NO的影响被引量：9
- 2004年
- 目的:观察六味地黄汤对生精障碍模型大鼠促进生精的作用及其对大鼠血清一氧化氮(NO)的影响。方法:用醋酸棉酚建造Wistar雄性大鼠生精障碍模型后,用分煎和合煎的六味地黄汤灌胃给药治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮为对照,计数各组精子数量,观察各组精子的活力,测定大鼠血清NO水平。结果:模型组大鼠的精子数量与六味地黄汤分煎组、六味地黄汤合煎组、市售六味地黄丸对照组、西药对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);各治疗组、对照组的精子活力也显著优于模型组。模型组大鼠血清NO水平与各组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);血清NO水平和精子数量、精子质量基本成正相关。结论:六味地黄汤对生精障碍大鼠有显著的促生精作用,同时可升高大鼠血清NO水平,显著提高大鼠精子的质量。
- 凌庆枝敖宗华许泓瑜许正宏尹光耀陶文沂
- 关键词：六味地黄汤精子产生一氧化氮动物模型血清
