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诊断试剂用己糖激酶的制备工艺研究被引量：1: 2017年; 为获得微生物工程菌株来源的己糖激酶(Hexokinase,HK)并提高HK的发酵水平,对已构建产HK的大肠工程菌株BW25113-pYBE/schk进行发酵工艺优化,为HK法血糖检测试剂盒的配制提供技术支撑。本研究采用正交试验对菌株发酵工艺进行优化,并对超声破壁获取粗酶及粗酶的纯化工艺进行研究。结果表明:工程菌株BW25113-pYBE/schk的最佳发酵培养条件为:装液量80mL/500mL,发酵液初始pH 6.5,发酵温度37℃,接种量2%,诱导剂添加时间为接种后1h,转速180r/min。超声破壁最佳工艺为:功率200 W,工作1.5s间歇1s,破壁5min。在最佳发酵和破壁工艺条件下,HK的发酵活力稳定在157U/mL,经过Ni-Agarose His标签蛋白试剂纯化获得60kD的HK。本研究建立了高产己糖激酶大肠杆菌工程菌株的发酵工艺,有利于降低己糖激酶法血糖试剂盒的成本,为糖尿病患者的准确诊断及普及提供便利条件。; 刘春卯罗同阳胡美荣吴芳彤曹倩荣郑翔; 关键词：大肠杆菌诊断试剂正交试验

共表达分子伴侣PDI和Ero1对葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中表达的影响被引量：7: 2018年; 通过单独表达蛋白质分子伴侣二硫键异构酶(PDI)和共表达PDI和内质网氧化还原酶(Ero1),提高重组葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的分泌表达。将构建的蛋白质分子伴侣表达载体p PICZ/PDI和p PICZ/Ero1-PDI线性化后,电击转化重组毕赤酵母X33/p MD-GOD细胞,用含有250μg/m L G418和50μg/m L Zeocin的YPD双抗平板筛选阳性转化子,阳性转化子进行试管发酵和10 L发酵培养后,分析共表达PDI和Ero1-PDI对GOD表达水平的影响。结果显示,共表达PDI及Ero1-PDI分别使葡萄糖氧化酶在10 L发酵罐中30℃培养,酶活分别达到476 U/m L和736 U/m L,相比原始菌株在相同条件下分别提高了29.7%和100%。整合分子伴侣PDI和Ero1促进蛋白正确折叠明显地提高葡萄糖氧化酶蛋白表达。; 高庆华董聪王玥胡美荣王庆庆王云鹏罗同阳刘蕾; 关键词：葡萄糖氧化酶分子伴侣蛋白表达毕赤酵母

浸钙处理对切分哈密瓜的保鲜效应被引量：4: 2006年; 研究浸钙处理对切分哈密瓜保鲜效果的影响,结果表明:0.2%CaCl2浸钙处理可降低切分哈密瓜的呼吸速率,保持其硬度,延缓Vc含量的降低;同时也较好抑制了切分哈密瓜透明化,直到贮存的第九天透明化低于20%。浸钙处理可以显著延缓切分哈密瓜的衰老,延长了其保鲜期。; 阮燕晔胡美荣樊金娟张立军; 关键词：钙切分哈密瓜保鲜

利用分子伴侣prsA构建的中性蛋白酶基因、蛋白、枯草芽孢杆菌及制备和应用: 本发明属于新基因的制备及工程菌的构建，特别是指一种利用分子伴侣prsA构建的中性蛋白酶基因、蛋白、枯草芽孢杆菌及制备和应用。本发明运用分子生物学技术，将分子伴侣PrsA与中性蛋白酶基因进行整合，构建了pHT43‑npr‑...; 杨何宝胡美荣郑翔高沛汝牟庆璇秦艳梅陶勇马清河; 文献传递

一种新型蛋白酶的酶学特性及脱毛应用被引量：9: 2017年; 蛋白酶可作为清洁化产品应用在制革脱毛工艺,旨在明确枯草工程菌株WB800N/p HT43-npr发酵生产重组中性蛋白酶(JW-3蛋白酶)的脱毛效果及脱毛工艺条件,为清洁化脱毛制革工艺提供技术参考。研究了JW-3蛋白酶的热稳定性、pH耐受性,金属离子及化学试剂对酶活力的影响,酶解胶原蛋白的能力,同时对酶法与传统灰碱法黄牛皮脱毛效果进行评价。结果显示,JW-3蛋白酶的耐高温能力差,40℃保存1 h酶活力便开始衰减;在pH6、pH7稳定性良好;Ca^(2+)、Mn^(2+)对酶活力有激活作用;在表面活性剂Triton X-100、Tween20、Tween80中稳定;JW-3蛋白酶不具有水解胶原蛋白的能力,与传统灰碱法脱毛的皮粒面效果相当,且可以回收完整的动物毛发再利用。JW-3酶法可替代灰碱法脱毛实现清洁化脱毛制革工艺。; 郑翔杨何宝胡美荣刘春卯吴芳彤曹倩荣; 关键词：制革业清洁化技术蛋白酶酶学性质

一种高效利用葡萄糖合成肌醇的大肠杆菌重组菌及其构建方法与应用: 本发明公开了一种高效利用葡萄糖合成肌醇的大肠杆菌重组菌及其构建方法与应用。本发明所提供的产肌醇的大肠杆菌重组菌构建方法包括：将肌醇‑3‑磷酸合成酶基因和肌醇单磷酸酶基因导入宿主菌，得到产肌醇的大肠杆菌重组菌；所述宿主菌为...; 胡美荣王雷尤然张莎莎陶勇; 文献传递

利用分子伴侣DnaK构建的中性蛋白酶基因、蛋白、枯草芽孢杆菌及制备和应用: 本发明属于新基因的制备及工程菌的构建，特别是指一种利用分子伴侣DnaK构建的中性蛋白酶基因、蛋白、枯草芽孢杆菌及制备和应用。本发明运用分子生物学技术，将分子伴侣DnaK与中性蛋白酶基因进行整合，构建了pHT43‑npr‑...; 杨何宝胡美荣郑翔高沛汝牟庆璇秦艳梅陶勇马清河; 文献传递

共表达分子伴侣PDI和Ero1对灰盖鬼伞过氧化物酶在毕赤酵母中表达的影响被引量：7: 2015年; 来源于灰盖鬼伞长度为1 092 bp的CiP目的基因与AOX1启动子一起整合进酵母染色体基因组中。重组蛋白CiP在酿酒酵母信号肽的引导下成功分泌到胞外,质谱鉴定为目的蛋白,成功在毕赤酵母中表达灰盖鬼伞过氧化物酶(CiP)。将伴侣蛋白内质网氧化还原酶1(Ero1)、二硫键异构酶(PDI)分别单独及同时转入CiP酵母受体菌中,研究它们对CiP在毕赤酵母中表达的影响。结果表明:在摇瓶中,相对于无分子伴侣的菌株,单独整合PDI及同时整合Ero1、PDI菌株的CiP酶活分别提高了2.43和2.62倍,活力达到316 U/m L和340 U/m L。挑选同时整合Ero1、PDI伴侣蛋白的CiP菌株,5 L发酵罐进行高密度发酵,酶活最高达到3 379 U/m L,比摇瓶提高约10倍。本实验结果较目前已报道的1 200 U/m L已是最高水平。; 陈飞胡美荣江贤章陶勇黄建忠; 关键词：毕赤酵母二硫键异构酶

枯草工程菌Bacillus subtilis及其构建以及利用其生产脱毛酶制剂的方法: 本发明属于微生物发酵，特别是指一种枯草工程菌Bacillus？subtilis及其构建以及利用其生产脱毛酶制剂的方法。是利用基因工程技术构建皮革脱毛用枯草工程菌Bacillus？subtilis？CGMCC？No.116...; 郑翔胡美荣刘春卯陶勇薛刚马清河秦艳梅胡常英杨何宝李江燕董聪; 文献传递

一种生产2-氧-α-D-吡喃葡糖基抗坏血酸的方法及其专用工程菌: 本发明公开了一种生产2‑氧‑α‑D‑吡喃葡糖基抗坏血酸的方法及其专用工程菌。本发明提供了一种生产2‑氧‑α‑D‑吡喃葡糖基抗坏血酸的方法，包括如下步骤：以抗坏血酸类物质和蔗糖为原料，在工程菌的作用下，生产2‑氧‑α‑D‑...; 胡美荣王雷彭颖陶勇; 文献传递

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胡美荣