- 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)诱导人脑胶质瘤细胞凋亡机制的研究
- 目的：探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的机制.方法：分别构建携带LIRG1的质粒和针对LRIG1基因的小干扰片段,将LRIG1质粒和小干扰片段分别转染进入人脑胶质瘤细胞系U251后...
- 郭振涛刘宝辉喻军华易伟冀保卫纪振刚吴立权田道锋陈谦学
- 关键词：LRIG1胶质瘤细胞凋亡
- MS-275阻断STAT3信号通路诱导U251细胞凋亡被引量：13
- 2011年
- 目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对脑胶质瘤细胞株U251细胞增殖的影响及促凋亡机制.方法 以不同药物浓度梯度和U251细胞分别共培养24、48、72 h后,应用CCK-8法检测肿瘤细胞增殖,瑞氏-姬姆萨染色法观察细胞形态变化,PI单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI法经流式检测细胞凋亡率,免疫印迹检测STAT3蛋白和PARP蛋白表达.结果 MS-275能显著抑制U251细胞的增殖,药物浓度40 nmol/ml,培养72 h,抑制率为（79.0±1.7）%;经药物作用后,细胞呈现凋亡形态,胞质和胞核浓缩或碎裂;G0/G1期细胞由（66.320±0.456）%降至（38.288±1.242）%（P＜0.01）,G2/M期细胞由（19.940±0.580）%升高至（35.650±0.507）%,而后降至（22.343±1.224）%（P＜0.01）,亚G0凋亡峰由（0.230±0.035）%增高至（18.393±1.449）%（P＜0.01）;总凋亡率由（2.133±0.416）%增高至（29.000±2.307）%（P＜0.01）;免疫印迹检测提示磷酸化STAT3表达水平降低,PARP被剪切.结论 MS-275对胶质瘤细胞的增殖抑制作用具有浓度和时间依赖性,它通过阻断STAT3磷酸化,诱导激活Caspase-3凋亡途径.
- 冀保卫陈谦学田道锋吴立权刘宝辉郭振涛纪振刚朱晓楠
- 关键词：胶质瘤STAT3脱噬作用
- 脑胶质瘤多药耐药细胞株U251／VP16的建立及其生物学特性被引量：5
- 2012年
- 目的采用依托泊苷诱导建立多药耐药细胞株U251／VP16。方法采用浓度递增法使U251细胞对依托泊苷耐药，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测其多药耐药性；瑞氏一姬姆萨染色观察亲本细胞U251和耐药细胞株U251／VP16的细胞形态；流式细胞仪检测细胞周期的变化；计算细胞倍增时间；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测多药耐药基因（MDRI）、B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、多药耐药相关蛋白5（MRP5）、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP1）等耐药基因的表达变化。结果（1）成功建立多药耐药细胞株U251／VP16，其对VP-16、硫酸长春新碱、环磷酰胺、阿霉素、替莫唑胺的耐药倍数分别为：12．36、2．64、2．00、3．61、1．63。（2）光学显微镜下耐药细胞胞体增大，呈多形性，瑞氏一姬姆萨染色后可见增大的明显不规则的胞核，胞质内颗粒样物质增多。（3）细胞周期结果显示U251／VP16细胞株较亲本细胞G0／G1期和S期明显减少．G2／M期明显增多。（4）U251／VP16的倍增时间为（20．644-1．98）h，长于亲本细胞U251的（10．26±1．03）h。（5）RT—PCR检测结果显爪MDRl、bcl-2、MRP5、LRPl等耐药基因的表达上调。结论采用浓度递增法可成功建立多药耐药的人脑胶质瘤细胞株且耐药性稳定，其耐药性可能与bcl-2、MRP5、LRPI的表达上调有关。
- 郭振涛刘宝辉喻军华冀保卫纪振刚吴立权田道锋陈谦学吴立权田道锋陈谦学
- 关键词：脑胶质瘤依托泊苷多药耐药性
- 胶质瘤细胞株化疗敏感性与骨形成发生蛋白4之间的关系被引量：6
- 2012年
- 目的探讨骨形成发生蛋白4（BMP4）与胶质瘤细胞化疗敏感性的关系。方法构建布有各级人脑星形胶质细胞瘤标本的组织芯片，评估BMP4与锰超氧化物岐化酶（MnSOD）、B淋巴细胞／白血病一2（bcl一2）表达的相互关系。构建替莫唑胺（TMZ）耐药细胞株，检测BMP4表达变化。转染BMP4质粒体进入多药耐药细胞株，检测对化疗药物敏感性变化。结果BMP4蛋白在标本中的平均吸光度（A）值于WHOI级中为0．3320±0．0065，WHOII级中为0．2485±0．0066，WHOHI级中为0．1701±0．0083，WH01V级中为0．0831±0．0077，其表达强度随肿瘤级别的增高存在降低趋势，差异有统计学意义（P〈0．05）；BMP4表达强度与MnSOD表达呈负相关（r=-0．821，P〈0．05），与bcl-2表达呈负相关（r=-0．711，P〈0．05）。TMZ耐药细胞株成功构建，其BMP4表达明显降低（P〈0．05）。将BMP4质粒体转染人耐药细胞株后，TMZ对空白组（耐药细胞株）的抑制率为（2．10±0．04）％，TMZ对转染组的抑制率为（45．70±2．20）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BMP4与肿瘤的化疗敏感性相关，它与TMZ引起的胶质瘤细胞耐药有关。
- 刘宝辉陈谦学纪振刚郭振涛冀保卫朱晓楠董慧敏吴立权田道锋蔡强
- 关键词：胶质瘤化疗敏感性
- 人脑星形细胞瘤中LRIG1与BCL-2、MnSOD表达的相关性研究
- 目的探讨LRIG1与BCL-2、MnSOD在星形细胞瘤中的表达情况及相互关系。方法构建布有各级人脑星形细胞瘤标本的组织芯片,采用SP法检测98例原发性星形细胞瘤组织中LRIG1、BCL-2、
- 纪振刚陈谦学陈治标田道锋吴立权
- LRIG1与MnSOD、bcl-2在人脑星形胶质细胞瘤组织芯片中的表达被引量：3
- 2011年
- 多亮氨酸重复区免疫球蛋白样区1（LRIG1）是新近发现的一种细胞表面跨膜蛋白,在人类各种组织及多种肿瘤中均有表达,因与果蝇跨膜蛋白KeKKon1（Kekl）结构相似而被发现.我们通过检测LRIG1、锰超氧化物岐化酶（MnSOD）、bcl-2三种因子,探讨LRJG1与人脑星形胶质细胞瘤多药耐药性的关系.
- 纪振刚刘宝辉冀保卫郭振涛吴立权田道锋陈谦学
- 关键词：脑星形胶质细胞瘤LRIG1BCL-2组织芯片MNSOD
- 小脑幕区脑膜瘤的临床特征和显微手术治疗振刚陈(附29例报告)被引量：1
- 2010年
- 目的探讨小脑幕区脑膜瘤的临床特征及治疗策略。方法回顾性分析2004年10月至2009年10月收治的29例小脑幕区脑膜瘤患者的临床资料。结果 29例小脑幕区脑膜瘤中,SimpsonⅠ级切除19例,SimpsonⅡ级切除6例,SimpsonⅢ级切除3例,死亡1例。术后临床症状消失或缓解27例,动眼神经功能障碍1例。结论小脑幕区脑膜瘤临床表现以颅内压增高为主,合适的手术入路及术中对静脉窦的恰当处理对改善患者的预后有重要帮助。
- 纪振刚陈谦学陈治标田道锋吴立权刘宝辉
- 关键词：小脑幕脑膜瘤手术治疗
- MS-275阻断STAT3信号通路诱导U251细胞凋亡
- 目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对脑胶质瘤细胞株U251细胞增殖的影响及促凋亡机制.方法：以不同药物浓度梯度和U251细胞分别共培养24、48、72h后,应用CCK-8法检测肿瘤细胞增殖,瑞氏一姬姆萨染色法观...
- 冀保卫陈谦学田道锋吴立权刘宝辉郭振涛纪振刚朱晓楠
- 关键词：胶质瘤STAT3
- 胶质瘤干细胞疫苗治疗恶性脑胶质瘤的体外研究
- 目的研究应用脑胶质瘤干细胞抗原制备的树突状细胞疫苗在体外对胶质瘤细胞的杀伤作用并探讨其机制。方法从脑胶质瘤临床标本中培养获得肿瘤干细胞,应用反复冻融法获得胶质瘤干细胞冻溶物。诱导小鼠间充质干细
- 冀保卫陈谦学田道锋刘宝辉吴立权郭振涛纪振刚
- 应用热诱导凋亡法制备靶向胶质瘤细胞的树突状细胞疫苗
- 2012年
- 目的应用热诱导凋亡U251细胞致敏树突状细胞，观察其诱导特异性细胞毒性T细胞的能力，探讨其对肿瘤细胞的杀伤机制。方法应用改良Inaba法，从小鼠骨髓细胞中诱导出树突状细胞，应用电镜和流式细胞技术行表型鉴定，然后和经热诱导凋亡的胶质瘤细胞共培养获得树突状细胞疫苗，细胞计数试剂盒（CCK-8）检测疫苗在体外促T细胞增殖和杀伤肿瘤细胞作用，将疫苗经尾静脉注入荷瘤裸鼠体内，检测体内肿瘤生长抑制作用。结果44℃孵育3h能有效诱导胶质瘤细胞凋亡，凋亡率达（40．10±1．08）％。负载凋亡细胞抗原的树突状细胞在体外能有效促进T细胞增殖，增加干扰素（IFN）-γ的分泌，并随效靶比增加，对胶质瘤细胞的杀伤率增大。体内注射疫苗4周后，治疗组肿瘤体积（301．704±21．659）mm2，空白对照组为（487．116±65．975）mm2，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论热诱导凋亡胶质瘤细胞致敏的树突状细胞能在体外有效促进T细胞增殖，诱导特异性细胞毒性T细胞杀伤胶质瘤细胞，有效抑制体内肿瘤生长。
- 冀保卫陈谦学刘宝辉吴立权田道锋郭振涛纪振刚
- 关键词：脑胶质瘤树突状细胞肿瘤疫苗免疫疗法
