田勇 作品数:4 被引量:26 H指数:3 供职机构: 西安交通大学医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 陕西省科学技术研究发展计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
5HRE和CEAp联合调控的TSST-1激活淋巴细胞特异杀伤CEA阳性肿瘤细胞 被引量:3 2010年 目的:研究5拷贝缺氧反应元件(5HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合调控的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)在缺氧环境下激活淋巴细胞对CEA阳性的结肠癌细胞株LoVo的杀伤作用。方法:用5HRE和CEAp构成基因表达调控元件,构建出以该元件调控跨膜型超抗原TSST-1-linker-CD80TM(TC)基因靶向表达的真核表达载体。用该载体转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LoVo及CEA阴性的人宫颈癌细胞株HeLa,利用G418筛选稳定转染的细胞。用RT-PCR检测TC融合基因的表达。分离健康人外周血淋巴细胞(PBL),用稳定转染TC的细胞裂解物进行PBL刺激实验;将PBL与稳定转染的细胞共培养,行淋巴细胞杀伤实验;MTT法检测TSST-1促PBL增殖和PBL对稳定转染细胞的杀伤效应。结果:成功筛选出稳定转染目的基因的单克隆LoVo细胞和HeLa细胞。RT-PCR证实单克隆LoVo细胞中TC在mRNA水平的表达,且缺氧环境中的表达量更高;单克隆HeLa细胞在常氧和缺氧条件下均无TC的表达。MTT法检测发现,缺氧环境下单克隆LoVo细胞表达的TSST-1能有效激活人PBL增殖,PBL剂量依赖性的抑制表达TSST-1的LoVo细胞的生长(P<0.05);但HeLa细胞和野生型LoVo细胞不能刺激PBL增殖,PBL对其也无抑制作用。结论:5HRE和CEAp双重调控的超抗原TSST-1在体外缺氧环境下可激活人PBL特异杀伤CEA阳性肿瘤细胞。 田勇 孙学军 王炜 王伟关键词:缺氧反应元件 癌胚抗原 超抗原 CEA阳性肿瘤 免疫基因治疗 原发性胆囊癌1222例诊治分析 目的 分析原发性胆囊癌(primary carcinoma of gallbladder,PCG)的临床特点,总结临床诊治经验,探讨影响预后的有关因素.方法 回顾性分析西安交通大学医学院第一附属医院1956-2008年收... 石景森 赵凤林 王健生 焦兴元 朱爱军 任予 刘刚 田勇 郑见宝 刘绍诰 孙学军 王林 王作仁 陈革 郝秀元 卢云 周连锁 杨毅军缺氧微环境对TSST-1诱导的抗CEA^+结肠癌LoVo细胞免疫治疗的调控 被引量:3 2011年 目的:研究缺氧微环境对靶向性表达的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(toxic shock syndrome toxin-1,TSST-1)激活人外周血淋巴细胞(peripheral bloodlymphocyte,PBL)对CEA^+结肠癌LoVo细胞杀伤作用的调控。方法:包装、收集前期构建的缺氧反应元件(hypoxia-response elements,HRE)和癌胚抗原启动子CEAp联合调控的逆转录病毒载体pLEGFP-N1-5HRE-CEAp-TSST-1-1inker-CD80TM(简称pLEGFP-N1-5HCTC),感染CEA^+LoVo细胞及CEA^-宫颈癌HeLa细胞,获取稳定表达跨膜型超抗原TSST-1-linker-CD80TM蛋白(TC融合蛋白)的肿瘤细胞。用缺氧模拟试剂CoC1_2模拟缺氧微环境,RT-PCR和WesterRblotting分别检测缺氧调控下TSST-1的表达水平。将健康人PBL与pLEGFP-N1-SHCTC感染后的肿瘤细胞共培养,~3H-TdR掺入法检测缺氧调控下PBL的增殖能力,MTT法检测缺氧调控下PBL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果:pLEGFP-N1-5HCTC病毒成功感染CEA^+LoVo细胞(5HCTC/LoVo),RT-PCR和Western blotting证实,缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞中TSST-1mRNA和蛋白的表达,CEA^-HeLa细胞在常氧和缺氧条件下均无TSST-1的表达。缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞诱导的人PBL的增殖(7.3×10~3 vs 3.1×10~3cpm,P<0.05),缺氧环境下PBL对5HCTC/LoVo细胞的杀伤率明显高于常氧环境(82.69%vs53.50%,P<0.01);CEA^-HeLa细胞不能刺激PBL增殖,PBL对其也无抑制作用。结论:缺氧微环境可显著上调靶向性表达的超抗原TSST-1诱导的对CEA^+LoVo细胞的杀伤作用。 王炜 孙学军 王伟 田勇 郑见宝 成亮 张超关键词:缺氧微环境 LOVO细胞 原发性胆囊癌诊治分析(附1222例报告) 被引量:20 2014年 目的分析原发性胆囊癌(primarycar cinoma of gallbladder,PCG)的临床特点,总结临床诊治经验,探讨影响预后的相关因素。方法回顾性分析西安交通大学医学院第一附属医院1956—2008年收治的1222例PCG临床资料.并进行相关统计分析。结果有明确的病理资料636例,其中腺癌占90.7%,鳞癌和腺鳞癌分别占2.8%和3.6%,其余类型占极少数。2004--2008年行手术治疗的247例中,胆囊癌侵犯肝床或肝转移者152例,有局部及远处淋巴结肿大者107例,其中30例证实为癌转移,32例为腹腔广泛播散。2004-_2008年267例病人的随访资料分析表明,肿瘤分期、手术方式与病人预后有关,而年龄、性别、病理类型、血清CEA及CA19—9与预后无关。生存分析显示,Nevin分期越高,生存曲线下降速度越快;行标准根治手术的病人1—5年存活率及生存时间均高于其他治疗方式。结论PCG早期诊断困难,超声和CT联合检查可作为PCG的常规诊断方法;以手术为主的综合治疗仍是PCG治疗的主要手段,对于PCG病人积极行根治性手术可延长部分病人存活期。 孙学军 石景森 王林 王作仁 陈革 郝秀原 卢云 周连锁 杨毅军 赵凤林 王健生 焦兴元 朱爱军 任予 刘刚 田勇 郑见宝 刘绍诰关键词:原发性胆囊癌