王桂花
- 作品数：8 被引量：22H指数：1
- 供职机构：中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病检测实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划实验用小型猪地方标准研究星火计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定
- 目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exsomes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exsomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗...
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利锋周海云张交儿刘爱林赵德明
- 关键词：免疫胶体金
- 文献传递
- Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定
- 目的：为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exsomes。
方法：采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exsomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotill...
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利锋周海云张交儿刘爱林赵德明
- 关键词：巨噬细胞免疫胶体金多克隆抗体免疫印迹法
- Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定
- 2010年
- 目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exo-somes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exosomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70mAb和calnexin多克隆抗体,通过免疫印迹法和免疫金标记法进行免疫鉴定。结果:电镜下可以观察到提取的exosomes平均大小为50～100nm。免疫印迹法分析结果显示,提取的exosomes表达Flotillin、Tsg101和Hsp70蛋白,相对分子质量(Mr)分别为45000、43000和70000,但不表达calnexin蛋白;免疫电镜分析显示ex-osomes膜表面和内部有明显的金颗粒。结论:Ana-1巨噬细胞分泌exosomes。
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利锋周海云张交儿刘爱林赵德明
- 关键词：免疫胶体金免疫印迹
- 小鼠脑14-3-3ζ蛋白的基因克隆及鉴定
- 2009年
- 提取小鼠脑组织总RNA,采用RT-PCR法扩增14-3-3ζ蛋白的cDNA,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体上,并用双酶切法和PCR法对结果进行鉴定。结果显示,RT-PCR扩增出1条大小约为738 bp的特异性条带,双酶切法和PCR法鉴定结果表明,PCR产物已被克隆到pGEM-T Easy载体中。DNA测序结果表明,所克隆的DNA片段与GenBank中已收录序列一致,表明小鼠脑14-3-3ζ蛋白重组pGEM-T克隆载体构建成功。
- 王桂花孙霞王致远赵德明
- 关键词：基因克隆
- 人外周血单核细胞释放PrP^C与其分泌Exosomes相关性研究
- 2009年
- 为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中PrP^C的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes,并利用电镜技术和免疫印迹分析对其形态学和生物学特征进行鉴定。结果显示所提取的exosomes主要分布在1.13～1.16 g/ml的密度层中,平均直径在30～100 nm之间,呈杯状,这与相关报道关于其他细胞分泌的exosomes特征分析的结果相一致;与exosomes相关的分子Tsg101、flotillin-1、Hsp70、PrP^C均为阳性标记,而作为内质网标志蛋白的钙连接蛋白在exosomes上没有检测到。以上结果说明人外周血单核细胞分泌的exosomes没有被细胞器污染,而且细胞向培养基中释放PrP^C与其分泌exosomes有关。
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利峰杨建民赵德明
- 关键词：传染性海绵状脑病EXOSOMESTSG101
- Ana-1巨噬细胞分泌ezosomes的提取及免疫鉴定
- 目的：为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exsomes。方法：采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exsomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗...
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利锋周海云赵德明张交儿刘爱林
- 文献传递网络资源链接
- 国内外小型猪资源概况
- 猪和人在解剖学、生理学上有极大的相似性,而小型猪还具有品系繁多、遗传性能稳定等诸多优点,因此,作为实验动物已经被广泛应用于生物医学研究的多个方面。本文主要介绍了从40年代末美国开始培育小型猪以来,国内外小型猪的主要品系、...
- 王桂花尹晓敏孙霞赵德明
- 关键词：小型猪基础群实验动物解剖生理学品系培育
- 文献传递
- 国内外小型猪资源概况被引量：22
- 2009年
- 猪和人在解剖学、生理学上有极大的相似性,而小型猪还具有品系繁多、遗传性能稳定等诸多优点,因此,作为实验动物已经被广泛应用于生物医学研究的多个方面。本文主要介绍了从40年代末美国开始培育小型猪以来,国内外小型猪的主要品系、培育、开发研究的发展情况以及国内培育小型猪的优势。
- 王桂花尹晓敏孙霞赵德明
- 关键词：小型猪基础群实验动物
