王敬春
- 作品数：23 被引量：39H指数：4
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- 靶向增殖诱导配体（APRIL）的RNA干扰对人结直肠癌裸鼠移植瘤的影响
- 目的在裸鼠体内利用RNA干扰（RNAi）技术研究裸鼠结直肠癌移植瘤内敲低增殖诱导配体（APRIL）基因后对移植瘤的抑制影响,以及APRIL基因对人结直肠癌的促细胞增殖、侵袭转移、凋亡抑制作用。方法建裸鼠SW480结直肠癌...
- 王敬春
- 关键词：增殖诱导配体结直肠癌裸鼠RNA干扰
- 文献传递
- 串联siRNA干扰沉默结肠癌SW480细胞APRIL基因表达被引量：2
- 2012年
- 目的检测串联siRNA对SW480细胞中增殖诱导配体（APRIL）基因的影响。方法设计并筛选针对APRIL基因的4条shRNA片段（sh644、shl451、shl938、sh2231），分别将其连接至pGenesil-1．1质粒表达载体，形成pGsh644、pGsh1451、pGshl938、pGsh2231单一表达载体，同时将4条shRNA连接至pGenesil4-T质粒形成pG4串联siRNA表达载体。阳离子脂质体法转染至结直肠癌细胞株SW480。实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测SW480细胞中APRILmRNA和蛋白表达水平。结果经酶切和测序鉴定，构建的串联siRNA质粒载体符合要求。几条siRNA均可有效抑制SW480细胞APRIL基因的表达，APRILmRNA的抑制率分别是pGsh644（56．2％）、pGshl451（49．5％）、pGshl938（50．9％）、pGsh2231（49．2％）、pG4（79．3％）。蛋白质表达抑制率分别为pGsh644（56．9％）、pGshl451（48．7％）、pGshl938（50．1％）、pGsh2231（46．4％）、pG4（87．5％）（P〈0．05）。其中以pG4抑制效应最强。结论与传统单一的siRNA表达载体相比，串联siRNA表达载体大大地敲低了结直肠癌细胞株中APRIL基因的表达，为针对结直肠癌APRIL基因的基因治疗提供研究基础。
- 卢美红李海泉汪桂华王敬春丁伟峰王惠民
- 关键词：增殖诱导配体
- 增殖诱导配体基因在实体瘤辅助诊断及治疗的应用研究
- 自增殖诱导配体(APRIL)基因发现以来，由于其促肿瘤增殖效应，受到研究人员广泛关注，然而目前很多研究都聚焦于多发性骨髓瘤、霍奇金氏病等血液性疾病中APRIL及其受体的表达定位和功能等，而APRIL与实体瘤的研究甚少。2...
- 丁伟峰王惠民王峰王敬春孙宝兰张冬雷施健鞠少卿王跃国
- 关键词：肿瘤治疗病理诊断
- 文献传递
- 结直肠癌细胞增殖诱导配体的异常表达促进肿瘤的生长和转移被引量：6
- 2013年
- 目的探讨增殖诱导配体（APRIL）对结直肠癌细胞生长和转移的影响，以进-步明确APRIL在结直肠癌生物学行为中的作用。方法APRIL基因的小干扰RNA质粒载体（APRIL．siRNA）转染人结直肠癌细胞SW480，重组人APRIL蛋白（rhAPRIL）刺激结直肠癌细胞HCT．116，采用CCK-8法检测细胞的增殖能力，流式细胞术检测细胞周期变化，Westernblot检测细胞周期和凋亡调控蛋白cyclinD1、p21和Bcl-2的表达水平，Transwell小室侵袭和转移试验分析细胞侵袭及转移能力，逆转录聚合酶链反应检测摹质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9mRNA的表达变化。APRIL．siRNA转染的结直肠癌细胞SW480拨种裸鼠，分析APRIL-siRNA对移植瘤生长和MMP表达的影响。结果APRIL—siRNA组G。／G1期细胞比例（73．5％）高于非特异性序列转染组（53．9％）和未转染组（51．1％，均P〈0．05）。刺激48h后，400ng／mlrhAPRIL组和800ng／mlrhAPRIL组HCT-116细胞Go／G1期细胞比例（分别为34．9％和22．7％）低于未刺激组（45．1％，均P〈0．05）。转染48h后，与非特异性序列转染组相比，APRIL—siRNA组SW480细胞cyclinD1和Bcl-2蛋白表达下降，p21蛋白表达增高。刺激48h后，与未刺激组相比，400ng／mlrhAPRILHCT-116细胞组cyclinD1和Bcl-2蛋白表达升高，p21蛋白表达下降。APRIL—siRNA转染SW480细胞后，APRII，siRNA组Transwell小室滤膜上每低倍视野侵袭和转移细胞数低于非特异性序列转染组。rhAPRIL（100ng／m1）刺激HCT-116细胞后，侵袭和转移细胞数均高于末刺激组。APRIL—siRNA组SW480细胞中MMP-2和MMP-9mRNA相对表达水平低于非特异性序列转染组。rhAPRIL刺激48h后，HCT-116细胞中MMP-2和MMP-9mRNA相对表达水平明显高于未刺激组。与非特异性序列转染组和未转染组相比，APRIL-siRNA组移植瘤的生长速度较缓慢，APRll．-siRNA组移植瘤组织中APRIL、MMP-2和MMP-9蛋白表达量明显降低。结论APRIL
- 汪桂华卢美红王敬春王峰丁伟峰王跃国鞠少卿王惠民
- 关键词：结直肠肿瘤细胞增殖肿瘤转移增殖诱导配体
- 裸鼠移植瘤实验研究APRIL在人结直肠癌中的作用
- 目的利用RNA干扰技术增殖诱导配体(APRIL)对BALB/c裸鼠体内人结直肠癌作用的研究。方法pGCsi-vetor和pGC-shAPRIL(含APRIL sh637干扰片段质粒)G418稳定转染SW480细胞。实验动...
- 王敬春王惠民丁伟峰孙宝兰景蓉蓉
- 文献传递
- 靶向增殖诱导配体的RNA干扰对人结直肠癌裸鼠移植瘤的影响被引量：6
- 2010年
- 目的利用RNA干扰（RNAi）技术观察增殖诱导配体（APRIL）siRNA（pGC—shAPRIL重组干扰质粒）对裸鼠SW480移植瘤的影响。方法建立裸鼠人结直肠癌移植瘤模型，待皮下瘤块长到一定体积，全部裸鼠分为APRILsiRNA组、空载体组和磷酸盐缓冲液（PBS）组，分别进行瘤块内注射。逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测移植瘤APRILmRNA水平；瘤块和裸鼠肝肺苏木素-伊红（HE）染色病理检测；免疫组织化学法检测APRIL、核增殖抗原（Ki-67）、基质金属蛋白酶（MMP）-2蛋白表达。结果APRILsiRNA组，与空载体组和PBS组比较，APRILmRNA[（1．36±0．03）×10^8、（1．05±0．02）×10^7、（1．04±0．01）×10^8copy／ml]和蛋白表达得分（2．00±0．40、7．00±0．45、8．00±0．40）明显降低（P〈0．05）；瘤块体积显著减小[（0．78±0．04）、（1．60±0．07）、（1．66±0．06）cm3]（P〈0．05）；与之相应Ki-67（2．00±0．45、8．00±0．54、7．00±0．44）和MMP-2（3．00±0．44、7．00±0．45、7．00±0．55）蛋白表达显著减弱（P〈0．05）。结论RNAi敲低APRIL基因表达，抑制了裸鼠SW480移植瘤的生长和转移，打靶APRIL基因的RNAi技术有望成为人结直肠癌的治疗途径。
- 王敬春王惠民丁伟峰黄华孙宝兰景蓉蓉
- 关键词：RNA干扰结直肠癌增殖
- RNA干扰技术在裸鼠移植瘤中的应用
- 2009年
- RNA干扰（RNAi）技术是由人工导入的双链RNA介导的特异性的转录后基因沉默技术。近年RNAi技术已大量应用于裸鼠移植瘤中，RNAi裸鼠体内实验，通过敲低肿瘤的凋亡抑制基因、促增生基因、肿瘤细胞浸润转移基因的表达，达到抑制肿瘤的效果。同时，RNAi在裸鼠移植瘤内可作为肿瘤放化疗的辅助手段。
- 王敬春王惠民
- 关键词：RNA干扰基因肿瘤治疗方案
- 增殖诱导配体基因在实体瘤辅助诊断及治疗中的应用
- 背景 增殖诱导配体(APRIL)基因是肿瘤坏死因子家族的一员,具有促肿瘤细胞增殖作用.APRIL蛋白有膜结合型(全长)与可溶型(胞外区,sAPRIL)二种形式,具有相同的生物学活性.目前,大量研究聚焦于多发性骨髓瘤、霍奇...
- 丁伟峰王惠民王峰王敬春孙宝兰张冬雷施健鞠少卿王跃国
- 半肝入肝血流阻断联合CLCVP对腹腔镜肝切除术患者组织灌注及肝肾功能影响研究被引量：1
- 2022年
- 目的研究半肝入肝血流阻断联合控制性低中心静脉压(CLCVP)对腹腔镜肝切除术患者肝组织灌注及肝肾功能影响。方法回顾性分析2018年6月至2020年12月100例行腹腔镜肝切除术患者资料,根据术中是否联合CLCVP技术分为两组,CLCVP组及对照组各50例。临床数据分析使用统计学软件SPSS 24.0,围手术期指标、术中血流动力学、术中乳酸水平、手术前后肝肾功能等计量资料采用(x±s)表示,采用独立样本t检验;计数资料采用χ^(2)检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果CLCVP组手术时间、术中出血量、肝门阻断时间及术中输血例数均少于对照组(P<0.05)。肝脏离断前及肝脏离断后5min,CLCVP组中心静脉压(CVP)平均动脉压(MAP)明显低于对照组(P<0.05)。肝门阻断时及肝脏离断后,两组患者乳酸水平均较前一时间点明显增高,且CLCVP组明显高于对照组(P<0.05)。术后1 d两组患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、血肌酐(Ser)、尿素氮(BUN)均较前明显增高(P<0.05)。结论半肝入肝血流阻断后应用CLCVP技术可有效控制腹腔镜肝切除术中出血量,缩短手术时间,减少输血率,虽然可致术中乳酸水平升高,但对肝肾功能无明显影响。
- 康焕菊曹苏王敬春王雷刘学
- 关键词：肝切除术腹腔镜控制性低中心静脉压组织灌注肝肾功能
- RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨沉默增殖诱导配体（a proliferation-inducing ligand,APRIL）基因对人结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体（siRNA-APRIL）转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组（nontargeting control）及未转染组（nontransfected control）作为对照.Real-time PCR和Western blot评价APRIL沉默效率;CCK-8（cell counting kit-8）法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因p21及p27的表达.结果 与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制APRIL mRNA及蛋白的表达（P＜0.05）;siRNA-APRIL转染SW480细胞48 h、72 h和96 h后细胞增殖能力明显下降（P＜0.05）;转染48 h,siRNA-APRIL组G0/G1期细胞比例增高,S期及G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 mRNA的表达上调（P＜0.05）;而上述指标两对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 siRNA-APRIL能特异性抑制结肠癌SW480细胞APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表达有关.
- 王峰丁伟峰王敬春景蓉蓉倪红兵丛辉王跃国鞠少卿王惠民
- 关键词：增殖诱导配体小干扰RNA结肠癌细胞周期
