王士洪
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- APPL1对高糖及炎症因子诱导的胰岛β细胞凋亡和功能损伤的保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的 明确适配蛋白APPL1在胰岛β细胞中的作用。方法 采用腺病毒转染使INS-1细胞过表达APPL1。Western印迹法检测蛋白表达水平，碘化丙啶/Hoechst染色法检测细胞凋亡，用ELISA检测胰岛素分泌。结果 20 mmol/L葡萄糖或30 U/ml白细胞介素-1β加20 ng/ml TNF-α作用INS-1细胞48 h后，可明显诱导胰岛β细胞凋亡（P〈0.01），并降低2 h葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平（P〈0.01）。INS-1细胞过表达APPL1后，与各自的对照病毒组相比，APPL1可使细胞凋亡降低34.16%～42.79%（P〈0.01），并使葡萄糖刺激的胰岛素分泌升高至对照组的1.39～2.20倍（P〈0.05）。结论 APPL1对高糖和炎症因子诱导的胰岛β细胞损伤具有保护作用，可降低β细胞凋亡并改善葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
- 王士洪李晓雯李羚慕开达王琛贾伟平
- 关键词：细胞凋亡胰岛素分泌
- 早期单纯性脂肪肝基因组学改变
- 2013年
- 目的检测轻微脂肪肝患者全基因组表达,探索早期单纯性脂肪肝相关基因的改变。方法肝外科收集肝脏良性疾病的手术标本,各选取4例脂肪变性的肝细胞占肝组织切片<5%的样本(对照组)和脂肪变性的肝细胞占肝组织切片15%～25%的样本(脂肪肝组)。对两组进行基因芯片检测,对差异基因进行生物学分析及应用实时荧光定量聚合酶链反应验证。结果共得出128个差异基因。各样本差异基因表达结果均可区分对照组与脂肪肝组;脂肪肝组上调基因占63%,下调基因占37%;对照组上调基因占37%,下调基因占63%。102个基因参与分子功能;103个基因参与细胞成分;97个基因参与生物学过程,其中53个基因参与代谢过程。合成通路中,脂肪肝组甘油磷酸代谢通路上调,其关键酶1酰基甘油3磷酸O酰基转移酶2(AGPAT2)、甘油激酶基因表达为对照组的1.6(P=0.006)及2.1倍(P=0.037);脂肪酸从头合成通路下调,其关键酶乙酰COA酶羧化酶(ACACA)、脂肪酸合成酶(FASN)及脂肪酸延长酶(ELOVL6)的基因表达为对照组的60%(P=0.003)、40%(P=0.011)和40%(P=0.032);脂肪肝组脂肪酸摄取通路中膜蛋白CD36表达上调,为对照组的1.4倍(P=0.038);两组间参与脂肪酸β氧化的通路关键酶肉毒碱棕榈酰基转移酶及极低密度脂蛋白分泌的关键酶微粒体三酰甘油转移酶表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05);两组间调控三酰甘油合成的转录因子,固醇调节元件结合蛋白1、核因子、过氧化物酶体增生物激活受体α/λ的差异也无统计学意义(P值均>0.05),但脂肪肝组新发现的调控因子——成纤维细胞生长因子21(FGF21)显著上调,为对照组的2.0倍(P=0.04)。结论单纯性脂肪肝早期,脂肪摄取及三酰甘油合成基因上调,但脂肪酸从头合成基因下调,表明脂肪摄取增多及三酰甘油合成增加可能是促进早期单纯性脂肪肝进展的重要因素。
- 慕开达朱云霞王士洪王琛贾伟平
- 关键词：非酒精性脂肪肝基因芯片脂代谢
- 流式细胞仪分选大鼠胰岛β细胞方法的建立及应用被引量：2
- 2012年
- 目的:应用流式细胞仪(FCM)结合侧向角散射光(SSC)和细胞自发荧光强度分选大鼠胰岛β细胞。方法:选取正常雄性SD大鼠,胶原酶消化显微镜下手捡纯化胰岛。胰岛以胰蛋白酶和DNA酶消化成单细胞悬液。依据细胞自发荧光强度和SSC的差异通过流式细胞仪进行细胞分选。细胞存活率用PI/HO双染法鉴定,β细胞的纯度用细胞免疫组化鉴定。胰岛素测定采用酶联免疫吸附法。结果:自发荧光强度和SSC均高的细胞群中胰岛素染色阳性的细胞百分比为(94.5±0.95)%,较分选前单细胞中胰岛素染色阳性细胞百分比(81.2±1.12)%增高,为β细胞富集群;自发荧光强度和SSC均较低的细胞群中胰岛素染色阳性的细胞百分比为(10.0±0.82)%,为non-β细胞群。分选出的β细胞群死亡率低(<5%),其胰岛素分泌随葡萄糖刺激浓度的增加而增加(r=0.8,P<0.001),其中葡萄糖浓度在20 mmol/L时β细胞分泌的胰岛素明显大于浓度为2.8 mmol/L时的分泌量(P<0.001)。此外,Forskolin(FK)和Exendin-4(EX4)可以显著增强β细胞胰岛素的分泌(PFK<0.001,PEX4<0.05)。结论:根据β细胞自发荧光和SSC与non-β细胞的差异进行纯化的β细胞死亡率低、纯度高,胰岛素分泌功能较好,是一种值得推广的分选β细胞的方法。
- 尹德超李羚张明亮李晓雯王士洪幕开达王琛贾伟平
- 关键词：胰岛Β细胞流式细胞仪
- 糖复合物与人类相关疾病相关性的研究进展被引量：1
- 2013年
- 糖与蛋白质或脂类共价结合而成的糖蛋白、蛋白聚糖及糖脂统称为糖复合物，是人体内重要的信息分子，在许多生命和疾病过程中起着特异性的识别和介导作用。其结构或数量发生微小的变化可能就会引起功能发生改变，从而导致各种疾病的发生。以下就糖复合物与人类相关疾病，如肝病、糖尿病及阿尔兹海默病（AD）的相关性的研究进展作一综述。
- 王士洪王琛
- 关键词：疾病相关性糖复合物共价结合蛋白聚糖信息分子介导作用
