王克敏
- 作品数:14 被引量:26H指数:2
- 供职机构:上海交通大学医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科委科研计划项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- IL-2基因修饰瘤苗治疗进展期胃癌的临床系列研究
- 目的:循序观察IL-2基因修饰人胃癌细胞瘤苗 (HG-1/IL-2)治疗进展期胃癌的临床应用安全性及耐受性, 并初步评价其疗效。方法:采用基因工程的方法,将细胞因子 IL-2基因,转导入人胃癌细胞株MKN 45,通过一系...
- 张俊朱正纲程枫王克敏王秀玲尹浩然燕敏叶正宝王天翔钱关祥陈诗书林言箴
- 关键词:IL-2基因瘤苗胃癌免疫治疗
- 文献传递
- IL-2基因修饰瘤苗治疗进展期胃癌的临床系列研究
- 目的:循序观察IL-2基因修饰人胃癌细胞瘤苗(HG-1/IL-2)治疗进展期胃癌的临床应用安全性及耐受性,并初步评价其疗效。方法:采用基因工程的方法,将细胞因子IL-2基因,转导入人胃癌细胞株MKN45,通过一系列后续处...
- 张俊朱正纲程枫王克敏王秀玲尹浩然燕敏叶正宝王天翔钱关祥陈诗书林言箴
- 关键词:IL-2基因瘤苗胃癌免疫治疗
- 文献传递
- 脂质体介导端粒酶基因转染人口腔黏膜角化细胞的实验研究被引量:1
- 2009年
- 目的:将端粒酶基因转染入人正常口腔黏膜角化细胞,观察人端粒酶反转录酶(hTRT)的表达情况。方法:采用脂质体LipofectAMINE 2000与转铁蛋白共同将含有hTRT基因的pEGFP-hTRT质粒转染人正常口腔黏膜角化细胞,经荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察荧光,并进行流式细胞仪检测转染效率,采用RT-PCR检测转染细胞中外源性hTRT的表达,并经G418筛选观察其稳定表达情况。结果:LipofectAMINE 2000与转铁蛋白共同将pEGFP-hTRT转染入人正常口腔黏膜角化细胞,转染率为15.34%,转染细胞表达外源性hTRT。结论:脂质体LipofectAMINE 2000与转铁蛋白成功介导含有端粒酶基因的pEGFP-hTRT质粒转染人口腔黏膜角化细胞。
- 周海文杨雯君王克敏周曾同
- 关键词:端粒酶脂质体基因转染
- 基因治疗中若干关键问题的基础研究
- 钱关祥戴冰冰卢健李锋应磊张萍梅文瀚徐荣婷胡亮王克敏
- 该项目是针对基因治疗中存在的一些关键问题的基础研究工作,从目的基因的克隆,基因表达的靶向性以及基因表达水平的提高多个方面进行了研究。主要用于基因治疗中进一步的基础以及临床研究工作。主要是:用于提高肿瘤基因治疗中的目的基因...
- 关键词:
- 关键词:基因治疗靶向表达
- 一种恶性肿瘤中突变pTEN基因
- 本发明关于一种恶性肿瘤中突变基因,本发明技术方案如下:一种恶性肿瘤中突变pTEN基因,其中:该基因突变位置:缺失序列1329-1470;基因改变:缺失第6外显子+GCA。本发明所公开一种恶性肿瘤中突变pTEN基因,其优点...
- 郑新民王克敏梅文瀚徐荣婷
- 文献传递
- “瘤苗”-细胞因子基因转导人肝癌和胃癌细胞的研究
- 陈诗书钱关祥张腾飞钱书兵胡亮徐荣婷程枫孙洁提孙欲晓王立群许伟榕朱敏杨红英厉兴君王克敏
- 将人源hIL-2,hINF-γ,hGM-CSF,hTNF-α等cDNA经逆转录病毒载体转导人肝癌和胃癌细胞,经分析细胞因子基因已整合至瘤细胞,能表达相应mRNA和蛋白质,并具有细胞因子的活性,而且不含复制潜能的病毒,也无...
- 关键词:
- 关键词:瘤苗IL-2
- 流式细胞术纯化脐血嗜碱性粒细胞被引量:1
- 2010年
- 目的采用流式细胞术提纯脐血嗜碱性粒细胞,以期得到研究过敏性疾病发病机制的理想标本。方法6份足月产妇新生儿脐血经沉淀红细胞及Ficoll-泛影葡胺处理后,采用流式细胞术分选CD203c-PE+、CD45-PerCPint的细胞。通过特异性识别嗜碱性粒细胞的阿利新蓝染色和细胞计数脐血嗜碱性粒细胞的纯度和回收率。结果流式细胞术分选嗜碱性粒细胞所得的纯度为(95.02±2.94)%,回收率为(61.42±5.95)%。结论用流式细胞术分选脐血中CD203c-PE+、CD45-PerCPint的细胞可获得高纯度、高回收率的嗜碱性粒细胞。
- 杨玲许以平姚苏杭熊瑛祝捷王克敏郭胤仕
- 关键词:流式细胞术免疫磁珠细胞纯化脐带血嗜碱性粒细胞
- HaCaT细胞ADAR1基因沉默对Wnt11表达和A375细胞酪氨酸酶活性的影响被引量:3
- 2013年
- 目的探讨遗传性对称性色素异常症致病基因ADARl对Wntll表达和酪氨酸酶活性的影响。方法将HaCaT细胞等细胞数量分为对照组、实验1组、实验2组、实验3组。用3种针对ADARl基因的shRNA质粒分别沉默3个实验组中HaCaT细胞的ADARI基因,用Western印迹法检测4个组HaCaT细胞相关蛋白的表达水平。建立HacaT细胞与黑素瘤细胞A375共培养模型,对实验组(HacaT细胞中的ADARI和Wntll蛋白低表达)与对照组(HaCaT细胞中的ADARl和Wntll蛋白正常表达)的细胞形态和酪氨酸酶活性进行比较。结果蛋白印迹法发现,ADARl基因沉默的HaCaT细胞中的Wntll蛋白条带灰度值明显低于正常HaCaT细胞中的Wntll蛋白条带灰度值,证实HaCaT细胞中的ADARl基因沉默后,Wntll蛋白的表达水平明显下降。在共培养模型中,实验组HaCaT细胞与A375细胞连接处的树突状突起明显少于对照组,实验组A375细胞的酪氨酸酶活性与对照组相比显著降低,减去空白组A值后,实验组A值为0.0168±0.0069,对照组为0.0490±0.0132,P〈0.01。结论HaCaT细胞中ADARl基因沉默可降低Wntll的表达,并影响A375细胞酪氨酸酶活性。
- 李聪颖沈征宇汪蓓青徐慧刘俊岭王克敏陈向东
- 关键词:黑素细胞角蛋白细胞
- 实验性肿瘤联合基因的治疗研究
- 陈诗书夏爱娣钱关祥魏道严王克敏唐展云钱书兵糜军赖冠华杨劲松王建华郑新民孙文长张景迎李煜厉兴君
- 采取多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。成功克隆并鉴定包括细胞因子、MHC分子、抑制血管生成有关因子等11种cDNA,并选用脑心肌炎病毒和骨髓灰质炎病毒的内核糖体进入位点(IRES),构建成多基因表达载...
- 关键词:
- 关键词:基因治疗肿瘤
- 体外诱导人口腔上皮异常增生细胞系建立及癌变实验研究
- 周曾同周海文黄吉燕黄鹤杨雯君王克敏刘德莉吴娟娟胡洪亮周晓健张萍李卿沈雪敏周永梅
- 体外诱导人口腔上皮异常增生细胞系建立及癌变实验研究。建立稳定的人类正常口腔粘膜角化细胞体外培养体系,可传4-5代,存活30-50天。构建重组pEGFP-hTRT质粒载体;脂质体介导pEGFP-hTRT转染OKC的瞬时表达...
- 关键词:
- 关键词:端粒酶癌前病变