柯亨宁
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBsAg DNA疫苗诱导小鼠体液免疫及抑制转基因鼠表面抗原的产生被引量：8
- 2000年
- 目的 观察乙型肝炎病毒S基因表达质粒 (PS)诱导小鼠体液免疫及对HBV转基因(Tg)小鼠血清HBsAg的影响。方法 将S基因插入到pcDNA3 1+的BamH1位点上构建了PS。体外证实PS表达HBsAg。再分别免疫BALB/C小鼠和Tg小鼠各 10只。另用pcDNA3 1+免疫 4只BALB/C小鼠。每只小鼠每次肌肉注射纯化质粒 10 0 μg ,共 3次。用ELISA检测每份血清抗 HBs的效价。结果 PS免疫BALB/C小鼠 ,2～ 4周时出现抗 HBs,第 8周时平均为 135IU/L。该PS免疫Tg鼠多在 6～ 8周时出现抗体 ,平均 39IU/L。其中 4只HBsAg阳性的Tg鼠免疫后HBsAg转阴。结论 PS不仅能够有效地诱导BALB/C和Tg小鼠的体液免疫 。
- 柯亨宁斯崇文成军于敏刘丹田秀兰
- 关键词：转基因疫苗HBSAG体液免疫
- HBsAg及其与小鼠白介素-18融合蛋白表达质粒的构建和DNA免疫被引量：13
- 2001年
- 目的 观察乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)基因表达质粒 (pS)及其与鼠白细胞介素 18基因融合表达质粒 (p18S)的构建及其诱导BALB/c鼠免疫应答的能力。 方法 用聚合酶链反应(PCR)法获得的S基因克隆到真核表达质粒 pcDNA3.1+上 ,构建 pS。另用三步PCR法将小鼠白细胞介素 18基因融合到S基因的 5′端 ,再插入到 pcDNA3.1+的EcoRI位点上 ,构建了 p18S。分别免疫 10只和 6只BALB/c小鼠 ,阴性对照用 pcDNA3.1+免疫 4只BALB/c小鼠。用酶联免疫方法检测每份血清的抗 HBs的效价。采用3 H标记法检测脾细胞HBsAg特异性细胞毒反应。 结果 pS质粒免疫BALB/c小鼠多数于 4周时出现抗 HBs,最高可达 5 30mIU/ml,平均为 135mIU/ml。p18S质粒也能诱导低水平的抗 HBs ,平均为 2 0mIU/ml。pS和 p18S诱导的HBsAg特异性的细胞毒活性分别为 37.1%和 34 % ,而 pcDNA3.1+载体质粒免疫小鼠血清未能检出抗 HBs,细胞毒活性为 13.2 %。结论 pS质粒能够有效地诱导BALB/c小鼠的体液和细胞免疫反应 ,白细胞介素 18基因与S基因融合表达质粒免疫似乎不能增强免疫应答 。
- 柯亨宁斯崇文成军于敏刘丹
- 关键词：DNA免疫乙型肝炎表面抗原白细胞介素18小鼠
- 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白基因的克隆及其在P815细胞中的表达被引量：1
- 2000年
- 柯亨宁斯崇文于敏张琦刘丹曲春燕
- 关键词：乙型肝炎表面抗原基因克隆
- 小鼠白细胞介素-18的cDNA克隆及在真核细胞中初步表达的研究被引量：6
- 2000年
- 克隆小鼠白细胞介素 18(IL 18)编码区的cDNA ,并实现在真核细胞中的表达。方法 :用小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA核苷酸序列 ,设计、合成基因序列特异性引物 ,应用逆转录多聚酶链反应RT PCR ,以植物血凝 (PHA)和细菌脂多糖 (LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板 ,扩增获得全长mIL 18,转染小鼠成纤维细胞系SVT2 ,并进行IL 18生物学活性的检测。结果 :经测序证实获得的小鼠IL 18的cDNA序列与文献报道的mIL 18的cDNA序列完全一致。构建的小鼠IL 18的重组表达载体在转染小鼠成纤维细胞SVT2后 ,获得具有生物学活性mIL 18的分泌表达。结论 :克隆了小鼠IL 18的cDNA ,并实现了在真核细胞中的表达。
- 成军柯亨宁刘妍斯崇文王勤环洪卫国钟彦伟
- 关键词：白细胞介素18CDNA基因克隆化基因表达
